virologia-medica (674)

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VIROLOGÍA MÉDICA / Guadalupe Carballal - José Oubiña708
a concentraciones seriadas del compuesto y posterior medida de la 
de viabilidad celular en función de la concentración del compuesto 
el mismo tipo de células utilizadas para evaluar 
. 
Luego de incubar en condiciones de tiempo y temperatura adecuadas 
-
La relación entre los valores de CC y CE es el llamado índice de 
perspectivas de uso del compuesto ensayado: cuanto mayor sea el 
virus respecto de la célula.
2) Prueba preclínica en animales. Si se dispone de un modelo 
animal, que preferentemente reproduzca la patología en el humano, 
la segunda etapa en el desarrollo de un agente antiviral es el ensayo 
en dicho modelo. Como ocurre en los ensayos in vitro, la evaluación 
de administración del compuesto, número de dosis, farmacociné-
tica, biodisponiblidad, degradación, metabolismo, eliminación del 
compuesto o sus productos, respuesta inmune, relación entre la vía 
ensayo in vitro son, en muchas ocasiones, determinantes de la falla 
en el modelo animal de drogas que pueden haberse mostrado como 
muy efectivas inhibidoras de la infección viral en un sistema de 
células cultivadas in vitro.
3) Tres fases de ensayo clínico. -
perado los ensayos in vitro y en el modelo animal, se encaran los 
ensayos clínicos en seres humanos, que comprenden tres fases de 
Fase 1.
-
damentalmente ensayos para controlar farmacocinética, tolerancia, 
Fase 2. -
fectados. Se realizan nuevamente controles de seguridad de la 
droga en un número mayor de individuos y se determina el efecto 
evo-
lución de la misma, primordialmente signos y síntomas clínicos 
y 
Fase 3. Se incrementa el número de pacientes infectados para 
-
tarse de una infección para la que ya se dispone de un antiviral 
con la otra seleccionada como referencia.
3. PROBABLES BLANCOS DE ATAQUE POR
ANTIVIRALES EN EL CICLO DE MULTIPLICACIÓN VIRAL
-
tintas etapas del ciclo de multiplicación viral y la estructura de las 
proteínas virales intervinientes, se pueden elegir blancos adecuados 
para el ataque con un agente antiviral. Dichos blancos pueden ser 
por la célula y especialmente inducidas por una infección viral. En 
la fase de adsorción se pueden proponer agentes que mimeticen 
Ensayo de citotoxicidad
Cultivos de células en microplacas
Incubación 2-7 días en medio de cultivo con diferentes concentraciones de la droga
Cuantificación de viabilidad celular (recuento de células viables o técnica colorimétrica)
Cálculo de la concentración citotóxica 50%
CC50: dosis de droga que reduce al 50% la viabilidad celular respecto del control sin droga
Ensayo de actividad antiviral
Cultivos de células susceptibles en microplacas
Infección con una dosis constante de virus
Incubación en medio de cultivo con diferentes concentraciones de la droga en condiciones de tiempo y temperatura 
adecuadas para la multiplicación viral
Cuantificación de la multiplicación viral (efecto citopático, número de placas, viabilidad celular, proteína viral, 
actividad de una enzima viral, genoma viral)
Cálculo de la concentración efectiva 50%
CE50: dosis de droga que reduce 50% el efecto del virus respecto del control sin droga
Determinación del índice de selectividad
Índice de selectividad (IS) = CC50/CE50
Figura 49.1. Esquema de los ensayos de citotoxicidad y actividad antiviral in vitro.
	VIROLOGÍA MÉDICA
	PARTE 5
	CAPÍTULO 49
	3. PROBABLES BLANCOS DE ATAQUE POR
ANTIVIRALES EN EL CICLO DE MULTIPLICACIÓN VIRAL