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María Laura Minassian - Cintia Wanda Rivero - José Raúl Oubiña 1. ASPECTOS HISTÓRICOS causante de hepatitis no-A no-B transmitido a través de la sangre. Éste fue el primer virus descubierto mediante clonado molecular utilizando la tecnología del DNA recombinante, sin recurrir a pro- cedimientos biológicos o biofísicos, que posibilitaran su aislamien- to y caracterización. - Chiron Corporation Centers for Disease Control and Prevention, - ello, habían utilizado el plasma de un chimpancé contaminado con el "presunto virus" productor de hepatitis no-A no-B al que –una virus Hepatitis C Escherichia coli - fragmento . - génica para - infectado con el hasta entonces denominado agente de la hepatitis El obtener dos proteínas recombi nantes capaces de reaccionar con an- RIA. Estas reacciones inmunológicas posibilitaron la detección de anticuerpos presentes en la sangre de hemo donantes involucrados en la transmisión del virus hepatitis C por transfusiones. Este del virus. 2. EVOLUCIÓN NATURAL DE LA INFECCIÓN El HCV es uno de los principales agentes asociados a la hepato- patía crónica. La enfermedad aguda -aunque muy infrecuen- temente observada- tiene un período de incubación que oscila a veces formas leves. Las hepatitis fulminantes son inusuales. Sin embargo, esta etapa inicial de la infección suele ser general- La evolución de la infección es determinada por la intensidad de la respuesta inmune, el tipo de citoquinas secretadas y la activi- HCV. El - los limi tes normales, y es común comprobar ascensos y descensos metafóricamente designados como tipo "yo-yo". La hepatitis cró- nica es el mayor factor de riesgo para el desarrollo del carcino- como consecuencia de la cirrosis. Si bien el mecanismo por el cual demostrado que algunas proteínas del virus podrían actuar como transactivadoras, afectando la homeostasis celular y contribuyendo a la generación del HCC. 3. AGENTE ETIOLÓGICO 3.1. MORFOLOGÍA Mediante diversos métodos se había estableci do que el agente res- ponsable de las de haberse conocido la primera secuencia nucleotídica del HCV– M. obtenidas mediante inmunomicroscopia electrónica. El agente mide core - - Flaviviridae, en la cual el HCV ha sido incluido como prototipo del género Hepacivirus 3.2. ORGANIZACIÓN ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL El HCV posee un genoma a RNA monocatenario de polaridad po- Plasma de chimpancé infectado con material contaminado que había sido causa de hepatitis no A no B Ultracentrifugación Extracción de DNA y RNA del sedimento Transcripción inversa del RNA y DNA mediante cebado aleatorio (random priming) Clonado del cDNA en el bacteriófago 6 unidades formadoras de placas Transferencia de las proteínas a filtros de nitrocelulosa Incubación de los filtros con el suero de pacientes que habían padecido hepatitis clínica no A no B Detección de anticuerpos mediante incubación con anticuerpos anti-Igs humanas marcadas con I Realización de autorradiografía para detectar los clones que expresaban las proteínas específicas Verificación de que los clones seleccionados eran originados exclusivamente en el agente de la hepatitis no-A no-B Figura 24.5.1. Estrategia de detección molecular y ca- racterización del virus hepatitis C. Hepatitis C 24.5 VIROLOGÍA MÉDICA PARTE 2 CAPÍTULO 24 CAPÍTULO 24.5 1. ASPECTOS HISTÓRICOS 2. EVOLUCIÓN NATURAL DE LA INFECCIÓN 3. AGENTE ETIOLÓGICO 3.1. MORFOLOGÍA 3.2. ORGANIZACIÓN ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL
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