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Tema 9: Mycoplasma y Chlamydia REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA CÁTEDRA DE MICROBIOLOGÍA UnC BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA MARACAIBO, MARZO DE 2016 Mycoplasma 200 Especies de Bacterias Sin pared Animales y Plantas 16 especies - Humanos Mycoplasma pneumoniae Mycoplasma hominis Mycoplasma genitalium Ureaplasma urealyticum Clase Mollicutes Familia Mycoplasmataceae Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Eperythrozoon • Haemobartonella • Mycoplasma • Ureaplasma Familia Mycoplasmataceae • 123 especies • 4 subespecies Género Mycoplasma • Son las bacterias mas pequeñas de vida libre (125 a 250 nm). • Son peculiares y pleomorfas, ausencia de pared celular y presencia de esteroles en su membrana celular. • Son resistentes a la Penicilina, Cefalosporinas, Vancomicina; pero son inhibidos por Tetraciclinas o Eritromicina. • Se dividen por fisión binaria, crecen en medios artificiales acelulares, donde el centro de toda la colonia está incrustado debajo de la superficie. • Contienen ARN y ADN. • Tienen afinidad por las membranas de las células de mamíferos. • Son únicos en microbiología debido a 1) su pequeño tamaño y 2) su crecimiento sobre medios complejos libres de células. Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • El cultivo se realiza en medios con suero o líquido de ascitis, factores de crecimiento, extracto de levadura o un sustrato metabólico como glucosa o urea. • No existe un medio óptimo para todas las especies. • Los micoplasmas son anaerobios facultativos (M. pneumoniae, aerobio estricto). • Incubación a 37°C durante 48-96 horas puede no observarse enturbiamiento en los caldos de cultivo. • El subcultivo en un medio sólido permite el crecimiento de colonias pequeñas. En humanos han sido identificadas al menos 16 especies: M. hominis, M. salivarum, M. orale, M. fermentans, M. pneumoniae, M. genitalum. Las especies se clasifican de acuerdo a características bioquímicas y serológicas. Algunas especies tienen más de un serotipo. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. Adherencia forma filamentosa y estructuras polares especializadas con abundante prolina (grupo complejo de proteínas interactivas, adhesinas P1/MgPa y proteínas accesorias de adherencia). Se unen a la superficie de células ciliadas y no ciliadas probablemente a través de sialoglicoconjugados de células mucosas y glucolípidos sulfatados. Citotoxicidad directa a través de generación de peróxido de hidrógeno y radicales superóxido. Citólisis mediada por inmunocomplejos o por quimiotaxis y acción de mononucleares Competencia por nutrientes hasta agotarlos. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. Son parte de la flora normal de boca y pueden crecer en saliva, membranas mucosas orales, esputo. M. salivarus y M. orale : su asociación con enfermedad clínica es incierta. M. pneumoniae : en orofaringe está generalmente asociado con enfermedad. Algunos son habitantes de tracto genitourinario (mujeres). Tanto en hombres como en mujeres, el transporte genital de micoplasmas está directamente relacionado con el número de parejas sexuales en el tiempo. INFECCIONES DE HUMANOS INFECCIONES DE ANIMALES Y PLANTAS Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Es un patógeno humano estricto. • Produce enfermedad respiratoria (Traqueobronquitis, Neumonía atípica). • Tiene una distribución universal, durante todo el año. • Afecta a personas entre 5 – 20 años de edad. • Se transmite por contacto directo a través de secreciones de la vía respiratoria. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. PATOGENIA e INMUNIDAD Secreciones Aparato Respiratorio Adhiere al epitelio Respiratorio Complejo Proteínas De adhesión de Ácido siálico Destrucción Cilios Destrucción Células Epitelio TOS PERSISTENTE Factor de Necrosis Tumoral alfa Interleucina – 1 Interleucina – 6 Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 • Los sindromes clínicos mas comunes son traqueobronquitis aguda, neumonía atípica, faringitis, otitis media o miringitis. • La neumonía por micoplasmas es de poca intensidad y benigna. • El espectro clínico varía desde un estado asintomático hasta neumonitis grave. • El periodo de incubación varía de 1 – 3 semanas. • El paciente cursa con malestar general, fiebre, cefalea. • Los pacientes con neumonía presentan tos y persistir durante 3 – 4 semanas. • 10% niños con neumonía presenta exantema maculopapuloso. Red Book. Enfermedades Infecciosas en Pediatría, 2009 SISTEMA NERVIOSO CENTRAL CORAZÓN PIEL SANGRE Meningitis aséptica Encefalitis Enfermedad desmielinizante Neuropatía periférica Miocarditis Pericarditis Erupción Mucocutánea Polimorfa Anemia hemolítica Red Book. Enfermedades Infecciosas en Pediatría, 2009 Radiografía de Tórax AP. Neumonía por Mycoplasma pneumoniae. Paciente Adolescentes masculino de 13 años. Reyes – Aristizábal. Neumología Pediátrica, 2006 CLÍNICA Microscopía Cultivo Molecular Reacción en Cadena De la Polimerasa Serología Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 Hisopados de faringe, esputo, exudados inflamatorios y respiratorio, secreciones uretrales y genitales. Examen directo de las muestras poca utilidad. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. Medios sólidos especiales o caldos especiales (aerobiosis). 3-10 días a 37°C, 5% de CO2. Examen microscópico de las colonias mediante coloraciones o inmunofluorescencia. Las colonias tienen apariencia de huevo frito sobre el agar. Detección de anticuerpos en humanos infectados: • Fijación de complemento • Hemaglutinación • Inmunofluorescencia indirecta • ELISA • Tetraciclina y Eritromicina. • Aislamiento de ganado infectado. • No existe vacuna disponible. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Produce Infecciones del tracto urinario superior (Pielonefritis). • Se encuentra estrechamente vinculado con infección de trompas uterinas (salpingitis) y abscesos tuboováricos. • Se ha aislado Mycoplasma hominis en 10% de mujeres febriles después de aborto. • Ocasionalmente en cultivos de líquido sinovial con artritis. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. HOMBRES MUJERES Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. Uretritis no gonocócica (UNG) Pielonefritis Aborto espontáneo Parto Prematuro MUESTRAS EXAMEN MICROSCÓPICO CULTIVOS SEROLOGÍA Lavados Faríngeos Lavados Bronquiales Esputo No tiene valor diagnóstico M. pneumoniae Colonias pequeñas Aspecto granular homogéneo (Forma de Mora) M. hominis Aspecto característico (Huevo frito) Fijación de Complemento ELISA Aglutininas Frías Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 RESISTENTES Penicilinas Cefalosporinas Vancomicina SENSIBLES Tetraciclina Fluoroquinolonas Macrólidos Niños Adultos Red Book. Enfermedades Infecciosas en Pediatría, 2009 (Secreciones Respiratorias) AISLAMIENTO NO HAY VACUNAS (Contacto Sexual) Métodos Físicos Protectores Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 Chlamydia • Chlamydia • Chlamydophila Familia Chlamydiaceae • 6 especies Género Chlamydia Al principio fueron considerados “virus”. Sin embargo, tienen las siguientescaracterísticas de las bacterias: 1) poseen una membrana interna y otra externa semejantes a las de las bacterias gram negativas; 2) contienen ADN y ARN; 3) poseen ribosomas procariotas; 4) sintetizan sus propias proteínas, ácidos nucleícos y lípidos y 5) son sensibles a numerosos antibióticos antibacterianos. Son parásitos intracelulares obligados. Arraiz y colaboradores. Revista de la Sociedad Venezolana de Obstetricia y Ginecología, 2008 Las clamidias presentan un ciclo vital peculiar, ya que pasan por formas infecciosas inactivas desde el punto de vista metabólico (cuerpos elementales [CE] resistentes a los factores ambientales adversos) y por formas no infecciosas con actividad metabólica (cuerpos reticulados [CR]) osmóticamente frágiles. Carecen de la capa de peptidoglucano que se encuentra en la mayoría de las bacterias. No se replican en la forma del CE, pero son infecciosas. Los CR son activos desde el punto de vista metabólico y constituyen la forma replicadora de las clamidia. Otros componentes estructurales importantes de la familia Chlamydiaceae son el lipopolisacárido (LPS) específico de género, que se puede detectar en una prueba de fijación del complemento (FC) y las proteínas específicas de especie y de cepa de la membrana externa. • Alta afinidad por las células epiteliales del hospedador. • Adhesinas (PPME, proteínas de superficie) • Receptores • Mecanismos de entrada Arraiz y colaboradores. Revista de la Sociedad Venezolana de Obstetricia y Ginecología, 2008 El abanico de células que puede infectar C. trachomatis es limitado. Los receptores para CE se restringen fundamentalmente a las células del epitelio cilíndrico no ciliado, cuboidal y de transición que se encuentran en las membranas mucosas de la uretra, el endocérvix, el endometrio, las trompas de Falopio, el ano y el recto, aparato respiratorio y la conjuntiva. La serovariante LGV se replica en los fagocitos mononucleares presentes en el sistema linfático. Las manifestaciones clínicas de las infecciones por clamidias son debido a: 1) la destrucción directa de las células durante la replicación, y 2) la respuesta inflamatoria del organismo anfitrión. Las clamidias logran acceder al anfitrión a través de mínimas abrasiones o laceraciones. Tracoma Linfogranuloma Venéreo (LGV) Diferencias antigénicas Proteína principal de Membrana externa Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 18 Serotipos ENFERMEDADES CLÍNICAS Tracoma Conjuntivitis de inclusión en adultos Conjuntivitis neonatal Linfogranuloma venéreo Infecciones urogenitales • Es una queratoconjuntivitis crónica que empieza con cambios inflamatorios agudos en la conjuntiva y córnea. Luego degenera en cicatrización y ceguera. • Es producido por los serotipos A, B, Ba y C. • El periodo de incubación es de 3 a 10 días. • Los primeros síntomas de tracoma son lagrimeo, secreción mucopurulenta, hiperemia conjuntival e hipertrofia folicular. • Cicatrización de la conjuntiva, deformidades de los párpados. • Pérdida de la visión Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. Anticuerpos fluorescentes Método de Giemsa Grupo – Serotipo Suero y Secreciones oculares Inmunofluorescencia Reacción en Cadena De la Polimerasa (PCR) Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Tracoma endémico se utiliza la Azitromicina. • Se observa mejoría clínica luego de 6 a 12 meses. • La Azitromicina ha sustituido a la Eritromicina y Doxiciclina. • Los tratamientos tópicos no son efectivos. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • 400 millones de personas sufren la enfermedad y de ellos aproximadamente 20 millones quedan ciegos. • Es más frecuente en Asia, África y Mediterráneo (higiene es deficiente- escases de agua) • En las regiones hiperendémicas, la infección en los niños es universal y es frecuente la enfermedad grave (ceguera) • Puede transmitirse por fomites contaminados, toallas, piscinas o delineadores de ojos. La OMS ha iniciado el Programa S-A-F-E Surgery (cirugía) de los párpados deformados Tratamiento periódico con Azitromicina Face (lavado e higiene de la cara) Enviromental (mejoramiento ambientales) Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Los serotipos D – K de C. trachomatis causan enfermedades de transmisión sexual y en ocasiones infecciones oculares (Conjuntivitis de inclusión). • En varones se produce uretritis no gonocócica, epididimitis. • En la mujer causa uretritis, cervicitis y enfermedad inflamatoria pélvica, esterilidad, embarazo ectópico. • La infección por C. trachomatis puede dar lugar a clínica o ser asintomática pero muy contagiosa. • 50% de varones (UNG) y mujeres con síndromes uretrales, se acompaña de disuria, secreción no purulenta, micciones frecuentes. Nelson. Tratado de Pediatría. 2009 • Conjuntivitis de Inclusión del Adulto En ocasiones las secreciones genitales de los adultos infectados son inoculados por la misma persona en la conjuntiva, provocando una infección similar al tracoma. Conjuntivitis de Inclusión del RN El RN adquiere la infección al pasar por el canal del parto. 20 – 60% de los hijos de mujeres infectadas adquieren la infección. Se manifiesta como una conjuntivitis mucopurulenta 7 a 12 días luego del parto, el cual mejora con tratamiento. Nelson. Tratado de Pediatría. 2009 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS MOLECULAR EXAMEN CITOLÓGICO DIRECTO CULTIVO SEROLOGIA Secreciones Vaginales Secreciones Uretrales Conjuntiva Método de Elección (PCR) Sensible - Específica Anticuerpos Fluorescentes Directos (DFA) Inmunoanálisis Ligado a Enzimas (ELISA) Inmunofluorescencia Directa Inclusiones citoplasmáticas Determinación Títulos de anticuerpos • Es importante el tratamiento de la pareja sexual. • En la uretritis no gonocócica y en las mujeres no embarazadas se puede utilizar tetraciclinas (doxiciclina). • La Azitromicina es eficaz y se puede administrar en mujeres embarazadas. Nelson. Tratado de Pediatría. 2009 Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • La infección genital por clamidia y la conjuntivitis por inclusión constituyen enfermedades de transmisión sexual, que se disemina por contacto con pareja infectada. • La conjuntivitis neonatal por inclusión se origina por contacto del RN con genitales infectado de la madre. • Para prevenir los problemas oculares neonatales es necesario diagnosticar y tratar a la embarazada y a su pareja. • Practicar sexo seguro con protección. Nelson. Tratado de Pediatría. 2009 • 10 – 20% de los RN hijos de madres infectadas por C. trachomatis manifiestan problemas respiratorios 2 a 12 semanas después del nacimiento. • C. trachomatis se considera una causa frecuente de neumonía neonatal. • Presenta taquipnea, tos paroxística, ausencia de fiebre. • El diagnóstico se sospecha en caso de neumonía en un RN que presente conjuntivitis de inclusión. • Elevación de las concentraciones de anticuerpos IgM contra C. trachomatis 1:32 o mas se considera diagnóstica. Nelson. Tratado de Pediatría. 2009 Es una enfermedad de transmisión sexual causada por Chlamydia trachomatis, que se caracteriza por la presencia de adenitis inguinal supurativa. Es ocasionada por los serotipos L1, L2, L2a, L2b, L3. Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 • La primera fase aparece una lesión primaria, una pápula indolora y transitoria en los genitales. • La segunda fase se caracteriza por linfadenitis femoral o inguinal, unilateral, con bubones dolorosos de tamaño progresivo. • Estos ganglios pueden abrirse y drenar (hombres). • Puede aparecer fiebre, mialgias, cefaleas. • La tercera fase se produce un síndrome genitoanorectal, con fístulas rectovaginales,estenosis rectales y destrucción uretral. Nelson. Tratado de Pediatría. 2009 DIAGNÓSTICO SEROLOGÍA Anticuerpos (ELISA, Fijación de Complemento) 1:64 o mayores TRATAMIENTO PRIMERA FASE Sulfonamidas Tetraciclinas TERCERA FASE Cirugía Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • El Linfogranuloma venéreo es frecuente en las regiones subtropicales y tropicales. • Se transmite por contacto sexual. • El aparato genital y recto de las personas con infección crónica sirven como reservorios de la infección. • Medidas preventivas de enfermedades de transmisión sexual. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. CITOLOGÍA CULTIVO DETECCIÓN ANTIGÉNICA La citología no es sensible ni recomendable. El cultivo celular continúa siendo el método más específico para diagnosticar infecciones por Chlamydia trachomatis. Inmunofluorescencia directa de las muestras clínicas o ELISA para detectar anticuerpos frente a las MOMP o LPS. SONDAS DE ÁCIDOS NUCLEICOS SEROLOGÍA Las técnicas de amplificación de ácidos nucleícos comercializadas en la actualidad son: 1) PCR 2) la reacción en cadena de la ligasa; 3) la amplificación mediada por transcripción, y 4) la amplificación del desplazamiento de la cadena. Sensibilidad 90-98% Muy específicas. Se puede utilizar la primera orina de la mañana de un paciente con uretritis. La serología tiene un valor limitado en el diagnóstico de las infecciones urogenitales por C. trachomatis en adultos, dado que los títulos de anticuerpos pueden persistir durante períodos de tiempo prolongados. Por tanto, la prueba es incapaz de diferenciar entre infecciones actuales y previas. • Produce enfermedad en el aparato respiratorio (bronquitis, neumonía y sinusitis). • El único hospedador conocido es el ser humano. • Produce inclusiones intracitoplasmáticas redondas, densas y sin glucógeno. • Son resistentes a las sulfonamidas. • Las infecciones que se transmiten de una persona a otra mediante las secreciones respiratorias. Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Los pacientes pueden ser asintomáticos o presentar cuadros leves a moderados. • Puede manifestarse como neumonía atípica, bronquitis aguda y con menor frecuencia faringitis, laringitis, otitis media y sinusitis. • En algunas ocasiones el dolor de garganta precede al inicio de la tos. Red Book. Enfermedades Infecciosas en Pediatría, 2009 35 -37°C 3 días de incubación Tinción de Anticuerpos Fluorescentes Específicos de género y especie Método mas sensible Detecta anticuerpos IgG - IgM 1 – IgM > 1:16 1 – IgG > 1:512 Elevación del cuádruple en la concentración IgM o IgG Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • Macrólidos • Tetraciclinas • Fluoroquinolonas Jawetz, Melnick y Adelberg. Microbiología Médica, 2014 • La infección por C. pneumoniae se transmite de persona a persona a través de secreciones respiratorias infectadas. • La enfermedad se observa en todo el mundo, pero es mas frecuente en países tropicales y en vías de desarrollo. • Suele presentarse entre los 5 y 15 años de edad. • Es frecuente la infección recurrente. • Minimizar el hacinamiento y mantener higiene personal • Desecho cuidadoso de secreciones nasales y orales y frecuente higiene de manos. Red Book. Enfermedades Infecciosas en Pediatría, 2009 C. psittaci es la causa de la psitacosis (fiebre del loro), que se puede transmitir al ser humano (psittakos es la palabra griega para loro). El reservorio natural de C. psittaci es casi cualquier especie de ave, y la enfermedad se ha denominado más correctamente como ornitosis (que deriva de la palabra griega ornithos, ave). Otros animales como las ovejas, vacas y cabras, así como el ser humano, se pueden infectar. El microorganismo está presente en la sangre, los tejidos, las heces y las plumas de los animales infectados, que pueden parecer enfermos o sanos. Transmisión al humano inhalación de los excrementos secos de las aves, de la orina o de las secreciones respiratorias. La infección penetra a través del aparato respiratorio, desde donde las bacterias se diseminan a las células reticuloendoteliales del hígado y del bazo. Los microorganismos se multiplican en estas localizaciones, produciendo una necrosis focal. Los pulmones y otros órganos se ven afectados como consecuencia de la diseminación hematógena, que produce fundamentalmente una respuesta inflamatoria linfocitaria en los alvéolos y en los espacios intersticiales. En estas localizaciones aparece edema, engrosamiento de la pared alveolar, infiltración de macrófagos, necrosis y algunas veces hemorragia. Excremento – Orina – Secreciones respiratorias (Loro) Vía Respiratoria Aparato Respiratorio Células Reticuloendoteliales Hígado – Bazo Necrosis Focal. Respuesta inflamatoria linfocitaria Alvéolos – Espacios intersticiales Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 • El periodo de incubación 5 – 14 días. • Aparece cefalea, fiebre, escalofríos, malestar general, mialgias. • Los signos pulmonares son tos no productiva, crepitantes y consolidación. • Es frecuente la afección del Sistema Nervioso Central (cefalea, encefalitis y convulsiones). • Síntomas gastrointestinales como náuseas, vómito, diarrea. • Carditis, hepatomegalia, esplenomegalia y queratoconjuntivitis folicular. Murray, Rosenthal, Pfaller. Microbiología Médica, 2009 CULTIVO SEROLÓGICO MOLECULAR Anticuerpos en Suero Fijadores de Complemento Microinmunofluorescentes Caso Confirmado - Cultivo positivo - Clínica compatible - Aumento del cuádruple Títulos de anticuerpos 1:32 - IgM por microinmunofluorescencia 1:16 Caso Probable - Enfermedad compatible + Epidemiología Caso confirmado -Concentración anticuerpos 1:32 en una sola muestra Peligroso - Laborioso PCR Laboratorios de Referencia O investigación Brooks y col. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología Médica. McGraw Hill Lange.26ª edición. 2014. • TRATAMIENTO: Macrólidos y Tetraciclinas • EPIDEMIOLOGÍA : Las aves son el principal reservorio y pueden transmitir la enfermedad a los seres humanos al estar en contacto con excrementos, orinas o secreciones. • Las personas mas susceptible obreros de mataderos de corral, granjas de aves de corral, dueños de mascotas. • Es una enfermedad poco frecuente en niños. • CONTROL: Continuo monitoreo por parte de los veterinarios. • Las aves infectadas que han muerto o han sido sacrificadas deben colocarse en recipiente impermeable y con hielo seco. • Limpieza con desinfectantes y detergentes. Red Book. Enfermedades Infecciosas en Pediatría, 2009
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