4 Fertilizacion in vitro 2015

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FERTILIZACIÓN IN VITRO 
MV Raúl Enzo Scarnatto 
Auxiliar Docente de Iº 
Cátedra de Teriogenología 
Facultad de Ciencias Veterinarias 
UNNE 
1 
Producción in vitro de embriones 
2 
Obtención de los óvulos 
COMPLEJO CUMULUS OVOCITOS (CCOs o COCs) 
Maduración 
Fecundación in vitro 
Cultivo in vitro de los embriones 
Evolución de la técnica 
3 
1951 Reconocimiento de la capacitación espermática Austin; Chang 
1959 Fertilización in-vitro en el conejo Chang 
1963 FIV con esperma capacitado in vitro Yanagimachi and Chang 
1969 Fertilización de ovulo humano in vitro Bavister et al.; Edwards et al. 
1977 Fertilización de óvulo bovino in vitro Iritani and Niwa 
1978 Primer humano nacido de un embrión FIV Steptoe and Edwards 
1982 Primer ternero nacido después de FIV en vaca Brackett et al. 
1986 Clonado en oveja por transferencia nuclear Willadsen 
1986 Preñeces después de FIV de óvulos MIV Hanada et al. 
1988 Mellizos vacunos de embriones PIV Lu et al. 
4 
5 
6 
SOV 
PIV 
TE IA LAVAJE 
TE OPU 
7 
SOV 
OPU-PIV 
TE 
IA LAVAJE 
1- Obtención de ovocitos 
a. De ovarios de Matadero 
b. Punción Folicular in vivo (OPU) 
8 
OVARIOS DE MATADERO 
9 
FOLICULOS 
lavado 
10 
11 
Obtención de ovocitos por cortes 
12 
Obtención de ovocitos por aspiración 
13 
Aspirar con bomba de vacio 
14 
Obtención de ovocitos 
De animal vivo por medio de 
Aspiración folicular guiada por ecografía 
Ovun Pick-Up (OPU) 
15 
OBTECIÓN DE 
OVOCITOS POR 
MEDIO DE 
OVUN PIK UP 
ASPIRACION 
FOLICULAR GUIADA 
POR 
ULTRASONOGRAFIA 
 
16 
17 
OBTECIÓN DE OVOCITOS POR MEDIO 
DE OVUN PIK UP 
18 
OBTECIÓN DE OVOCITOS POR MEDIO 
DE OVUN PIK UP 
19 
20 
OBTECIÓN DE OVOCITOS POR MEDIO 
DE OVUN PIK UP 
21 
Estufa portátil 
22 
Filtrado 
23 
Ovarios de 
matadero 
OPU 
Filtrado 
24 
PASAR EL CONTENIDO A UNA 
PLACA DE BUSQUEDA 
25 
Placas de búsqueda 
26 
Deben estar atemperadas 
27 
Búsqueda de ovocitos 
28 
Búsqueda de ovocitos 
29 
Instrumentos para manipulación 
de ovocitos o embriones 
30 
Complejos Cumulus-Ovocitos de 
excelente calidad 
31 
32 
MADURACIÓN 
33 
CULTIVO EN GOTAS 
34 
35 
Cultivo en tubos o bolsas gaseadas 
36 
Maduración 
37 
Ovocito con cúmulus expandido 
38 
CCOs maduros (24hs) 
39 
FECUNDACIÓN IN VITRO 
40 
CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA 
Fecundación in vitro 
41 
Swim-up 
42 
Espermatozoides 
Motiles 
Swim-up 
43 
Swim-up 
44 
Gradiente de Percoll 
45 
Gradiente de Percoll 
46 
Gradiente de Percoll 
47 
ESPERMATOZOIDES 
Gradiente de Percoll 
48 
EVALUACIÓN DEL SEMEN 
49 
EVALUACIÓN DEL SEMEN 
50 
EVALUACIÓN DEL SEMEN 
51 
52 
53 
Cámara de flujo laminar 
54 
Fecundación in vitro 
55 
56 
CULTIVO 
57 
Cultivo en gotas 
58 
59 
Cultivo en tubos o bolsas gaseadas 
60 
61 
62 
Desarrollo 
embrionario 
63 
64 
CONCIDERACIONES PRACTICAS 
65 
15 
12 
8 
3 
1 
0 
2 
4 
6 
8 
10 
12 
14 
16 
COCs MADURACION CLIVAJE EMBRIONES PREÑEZ 
EFICIENCIA DE PRODUCCION IN VITRO 
66 
FRECUENCIA 
SOV 
• UNA VEZ AL MES 
 
• 10 VECES AL AÑO 
 
• 5 EMB/LAVAJE 
 
• 50 EMB/AÑO 
 
• 25 A 30 PREÑEZ/AÑO 
OPU 
• 2 VECES POR SEMANA 
 
• 100 VECES AL AÑO 
 
• 3 EMB/OPU 
 
• 1 PREÑEZ/OPU 
 
• 100 PREÑEZ/AÑO 
67 
VENTAJAS 
SOV-IA-TE 
• Resultados 
repetibles 
• Criopreservación 
OPU-PIV-TE 
• Numero de embriones 
obtenidos en un año 
• Mayores 
combinaciones 
genéticas 
• Vacas que no 
responden a la sov 
• Vaquillas impúberes 
68 
TRABAJOS SOBRE LA DONANTE 
69 
SOV 
OPU 
LAVAJE INSEMINACION 
SOV ? 
70 
OPU 
LABORATORIO 
OPU 
OPU 
OPU 
OPU 
OPU 
TE 
TE 
TE 
TE 
TE 
TE 
OTROS MÉTODOS DE 
FECUNDACIÓN 
71 
INYECCION INTRACITOPLASMATICA 
72 
Inyección de pronúcleo 
73 
74 
Biopsia del 
embrión 
75