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9 FRECUENCIA DE POBLADORES DEL DISTRITO DE CHILETE (CAJAMARCA) CON SEROLOGÍA POSITIVA A Trypanosoma cruzi KERMES ESCALANTE y MIRTHA ANGULO-PLASENCIA Departamento de Microbiología y Parasitología Facultad de Ciencias Biológicas Universidad Nacional de Trujillo. Apartado 315-Trujillo, Perú RESUMEN El presente trabajo tuvo como objetivos determinar la frecuencia de pobladores de Chilete (Cajamarca) que presentan anticuerpos de tipo IgG a Trypanosoma cruzi; así como, determinar la relación que existe entre la seropositi vidad con el sexo, la edad y el caserío de residencia del poblador. El estudio se hizo entre Setiembre de 19 93 y Agosto de 1994, en 186 pobladores de ambos sexos y diversas edades elegidos al azar, cuyas muestras sanguíneas fueron procesadas a través de la prueba de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI), utilizando como antígenos a epimastigotas de T. cruzi obtenidos de Panstrongylus chinai encontrados en la misma zona, y una anti-IgG humana marcada con fluoresceina. Se encontró que 22 (11.38%) muestras sanguíneas contenían anticuerpos a T. cruzi; ocho de las cuales presentaron positividad hasta diluciones de 1/4, nueve a 1/8 y cinco al/16, títulos bajos en comparación a los hallados en zonas endémicas de América Latina. Se encontró, asimismo, que la seropositi vidad no se relaciona con el sexo ni la edad, aunque si con el caserío de residencia. Este trabajo comunica por primera vez el hallazgo de casos humanos con serología positiva a T. cruzi en Chilete. Se recomienda continuar investigando para confirmar si estos pobladores realmente tienen Tripanosomiasis. INTRODUCCIÓN La enfermedad de Chagas o tripanosomiasis americana es una zoonosis causada por Trypanosoma cruzi, proto-zoario que causa un importante problema de salud en la mayoría de países latinoamericanos por la gran cantidad de individuos que infecta y por la gravedad de la enfermedad, en algunos casos 1 . El T. cruzi infecta al hombre y a varios animales domésticos o silvestres, trasmitiéndose entre ellos a través de insectos hematófagos pertenecientes a la subfamilia Triatominae 2 . Esta característica ha determinado que la enfermedad de Chagas tenga connotaciones de endemicidad en varios países de Sudamérica, tales como Brasil, Chile y Argentina, donde laprevalencia es alta 3,4 . En el Perú, dicha enfermedad es endémica en la zona sur, específicamente en el departamento de Arequipa, donde es trasmitida por Triatoma infestans, encontrándose infección humana en un 10% de la población en algunas zonas, So cual equivale a 80,000 individuos infectados 5 . Para el estudio serológico de la tripanosomiasis se dispone de varias técnicas, entre ellas, la Reacción de Fijación de Complemento (FC) o Reacción Machado-Guerrero; la Reacción de Hemaglutinación Indirecta (RHAI), la prueba de ELISA y la Inmunofluorescencia Indirecta (IFI). Esta última da resultados positivos un mes antes que las demás, al declinar el período agudo de la infección, ayudando de este modo en el diagnóstico oportuno de las infecciones agudas ya sean congénitas o adquiridas 6,7 En la zona norte del Perú se han encontrado elementos importantes en la cadena epidemiológica de la enfermedad de Chagas 8,9 . Se ha comunicado, por ejemplo, la presencia de Panstrongylus chinai y de Rattus rattus norvegicus naturalmente infectados por T. cruzi en la zona de La Viña, distrito de Magdalena, 10 en Cajamarca, siendo la primera especie considerada como agente trasmisor y la segunda como reservorio de la enfermedad 10 No se han detectado casos humanos de tripanosomiasis en la zona en estudio, sin embargo, la presencia de los demás elementos de la cadena epidemiológica permite plantear la probabilidad de que existan infecciones humanas no detectadas, lo cual justifica la realización de investigaciones en este campo. En el presente informe se muestran los resultados de una investigación orientada a determinar la frecuencia de pobladores del distrito de Chilete (Cajamarca) que presentan anticuerpos de tipo IgG a T. cruzi y la relación que existe entre la seropositividad con el sexo, la edad y el caserío de residencia de los pobladores.. MATERIAL Y MÉTODOS Población en estudio El trabajo se realizó entre Setiembre de 1993 y Agosto de 1994 en los habitantes del pueblo de Chilete y los caseríos aledaños de Zapotal, Huaquillas y La Pampa (Cajamarca) Muestra y muestreo La muestra estuvo constituida por 186 pobladores de ambos sexos y diferentes edades. Para determinar el tamaño de muestra se utilizó el programa de computación EPIINFO, versión 5.0, con un valor Z ,o error aceptable del 0,025%, con un nivel de confiabilidad del 95% y con una frecuencia esperada del 2.5% 11 Para seleccionar la muestra se determinó primero el número total de viviendas de la zona, a las cuales se les asignó un número, luego se realizó un sorteo para seleccionar al azar 35 casas cuyos habitantes fueron muestreados en su totalidad. A cada persona seleccionada se le encuesto con la finalidad de obtener algunos datos epidemiológicos. Serología por Limunofluorescencia Indirecta l.-Preparación del antígeno. El T. cruzi fue cultivado en medio difásico BHI los que fueron mantenidos por una semana a temperatura ambiente (18 - 24°C). La fase líquida que contenían los epimastigotas del parásito fueron lavados tres veces por centrifugación y decantación con PBS a pH 7.2. Los parásitos se fijaron con formaldehido al 2% por 18 horas a temperatura ambiente y luego se lavaron dos veces con PBS para eliminar el fijador. Se determinó la concentración de epimastigotas por observación microscópica a una concentración aproximada de 100 parásitos por campo (40X), para ser distribuidos en las áreas delimitadas de las láminas de inmunofluorescencia, las que fueron desecadas en la estufa a 37°C. Finalmente, las muestras con los antígenos fueron conservadas a -20°C, hasta su uso. 2.-Detección de los niveles de anticuerpos y criterios de lectura: La técnica utilizada para realizar la prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI) es la propuesta por Camargo 12 Tratamiento estadístico Se utilizó la prueba estadística de Ji cuadrado, con un nivel de significancia del 0.05 para comparar las frecuencias en relación al sexo, origen, edad y caseríos en el que residen 11 RESULTADOS Se encontró que de los 186 sueros analizados 22 (11.83%) dieron serología positiva a T. cruzi (Tabla 1). No se encontró diferencias significativas cuando se relacionó la seropositividad con el sexo (Tabla 2) y la edad de los pobladores (Tabla 3); sin embargo, estuvo relacioná*da con el caserío de residencia, ya que la mayor frecuencia de serología positiva se encontró en los pobladores de La Pampa (Tabla 4). 11 DISCUSIÓN El porcentaje de pobladores del distrito de Chilete con serología positiva a T. cruzi es alta, si se compara con los resultados de otros trabajos realizados recientemente en el Dpto. de Lanibayeque con la misma técnica, donde se encuentran porcentajes del 2% en Reque 13 y 3.49% en Jequetepeque 14 . Tal diferencia podría deberse a que en al zona muestreada, además de P. chinai ha sido encontrado R. r. norvegicus naturalmente infectados por T. cruzi 10 . Por otro lado, es probable que las condiciones ecológicas de Chilete sean más adecuadas que en las zonas de Lambayeque 9,13,15 . Los títulos bajos encontrados en los casos positivos podría indicar infecciones leves por T. cruzi y probablemente reacciones cruzadas con otros agentes parasitarios, tales como Leishmania. Estos resultados no permiten determinar si los sujetos tienen realmente la enfermedad, puesto que no se ha hecho la evaluación clínica correspondiente. En países donde la enfermedad es endémica como Chile y Brasil, se consideran títulos elevados a los superiores a 1/32, para evitar precisamente, fenómenosde reacciones cruzadas producidas por protozoos 16,17 No se encontraron diferencias significativas entre la seropositividad y el sexo. Estos resultados coinciden con los trabajos realizados en el departamento de Lambayeque, lo que indica que tanto individuos del sexo masculino como del femenino tienen probabilidad de infección, lo cual está en relación con los hábitos y la labor que realizan; sin embargo, se encuentran diferencias en este aspecto con resultados obtenidos de trabajos en otros países como Brasil, donde se muestra un mayor porcentaje de infectados a individuos del sexo masculino 17 Se encontró diferencias significativas entre la serología positiva y el caserío donde habitan, siendo los pobladores de «La Pampa» los que presentan mayor porcentaje y menor los de Chilete-pueblo. Estos resultados podrían deberse a que La Pampa es zona rural y está aledaña a La Viña lugar donde se encontró a R. r. norvegicus y aP. chinai naturalmente infectados con T. cruzi 17 . En Zapotal, lugar donde se han hecho importantes hallazgos del vector, la mayoría de sus habitantes manifestó conocer al insecto como chirimacha y chinche, encontrándolo generalmente por la cama o paredes de sus habitaciones. En Huaquillas, donde se obtuvo menor frecuencia que en los poblados anteriores, los pobladores tienen menor conocimiento sobre el vector confundiéndolo generalmente con otros chinches fitófagos, a pesar que su ubicación es inmediata con los dos anteriores; mientras que en los individuos procedentes de Chilete no se encontró ningún seropositivo, lo que podría deberse a la mejor calidad en la infraestructura de sus viviendas y a la variación de los hábitos del poblador sobre todo en la cría de animales, factores que hacen variar los resultados, puesto que varían las condiciones requeridas por el vector y los reservorios para su propagación, En relación a la edad, tampoco se encontró diferencias significativas, estos hallazgos concuerdan con los resultados de trabajos realizados en Lambayeque 13,14 ; sin embargo, en otros países como Chile y Argentina la mayor frecuencia de infectados lo presentan individuos que se encuentran entre 20 y 70 años, siendo afectado así el grupo de personas económicamente productivas para el país 4 . Este último aspecto depende de muchos factores, como el tipo de trabajo que realizan y la diferente respuesta inmunológica por parte del huésped, entre otros. La infección chagásica humana se presenta en la mayoría de países latinoamericanos, produciéndose cuantiosas pérdidas de vidas en edades económicamente activas, contribuyendo así a un retraso en el desarrollo del país 3 . Teniendo en cuenta que la información sobre la enfermedad de Chagas en el Perú es escasa, se recomienda hacer estudios clínicos complementarios para determinar si los supuestos chagásicos hacen realmente la enfermedad, para así 12 poder determinar si esta área corresponde a una nueva zona chagásica en el Perú. De los resultados encontrados se puede concluir que el porcentaje de serología positiva a T. cruzi en pobladores del distrito de Chilete es de 11.83%. No se encontró diferencias significativas entre seropositividad a T. cruzi con el sexo y la edad, encontrándose tal diferencia solamente cuando se relacionan con el caserío de residencia REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS l.Schenone, H. 1989. Aspectos epidemiológicos de la enfermedad de Chagas en Chile. Bol. Chile. Parasit. 44 (3-4): 66-86 2. Atías, A y A. Neghme. 1991. Parasitología Clínica. 3a ed. Edit. Mediterráneo Santiago de Chile. 3.Pérez, C.C.Miranda y G. Castillo. 1988. Enfermedad de Chagas en las comunasde Pirque y San José de Maipo, Provincia de Cordillera, Región Metropolitana. Chile. Parasitol.alDía. 12:88-90 �� Salvatella, R., L. Calegari y L. Casserone. 1989. Seroprevalencia de anticuerpos contra Trypanosoma cruzi en 13 departamentos del Uruguay. Bol. Of. Sanit.Panam. 107 (2): 108-117 �� Calderón, G. 1977. Actualización de la distribución geográfica de los triatominos en el Perú (Hemitera,Reduviidae). Libro de resúmenes del V Cong. Nac. deBiología. Cuzco, Perú. 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