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INFORME N° 2-3/2023/UNAMBA/MVZ/AB “MATERIALES, EQUIPOS Y ESTERILIZACIÓN” I. INTRODUCCION El laboratorio de microbiología es un lugar habilitado para estudiar y manipular microorganismos, trabajando bajo los estándares técnicos y de seguridad propios de este tipo de lugares. A través de los materiales de laboratorio de microbiología es posible determinar cuáles son los microorganismos presentes en cualquier muestra, extremando las precauciones para evitar posibles contaminaciones que pudieran arrojar resultados equivocados. En el laboratorio de microbiología debe existir un lugar donde se colocará el material contaminado, pero es importante saber que estos recipientes deben ser esterilizados posteriormente. Por su parte, las muestra que esté contaminadas no deben ser arrojarse por el inodoro, al fregadero o al cesto de la basura. Cada laboratorio debe contar con los materiales e instrumentales necesarios para el perfecto desarrollo de las actividades que en él se realizan. Asimismo, es necesario que existan procedimientos de control de calidad que monitoreen los instrumentos y medios para asegurar el correcto procedimiento y la precisa realización de las pruebas. (1) La esterilización es el proceso físico o químico que destruye a todas las formas de microorganismos: la esterilización es un procedimiento esencial en la microbiología, ya que la preparación de medios, el aislamiento y mantenimiento de cultivos puros depende de la esterilidad de recipientes, artículos de vidrio e instrumentación; comprende todos los procedimientos físicos, mecánicos y químicos, que se emplean para destruir gérmenes patógenos. (2) II. OBJETIVOS 2.1 Objetivo Materiales y equipo Ver el material y equipo a usar durante las practicas. 2.2 Objetivo esterilización Realizar la esterilización de equipo necesaria para los cultivos. III. MARCO TEORICO ESTERILIZACIÓN La esterilización es el proceso de destruir todas las formas de vida microbiana; un objeto esterilizado, en el sentido microbiológico, está libre de microorganismos vivos. Los términos estériles, esterilizar y esterilización se refieren a la ausencia o destrucción completa de los microorganismos y no se utilizan en sentido relativo, una sustancia o un objeto están estériles o no están estériles, pero no semiestériles o casi estériles. Los métodos de esterilización son por: calor (ya sea seco o húmedo), filtración, radiaciones y agentes químicos. ESTERILIZACIÓN POR CALOR La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad es uno de los métodos más efectivos para destruir microorganismos. Es importante distinguir entre calor húmedo y calor seco en cualquier procedimiento de control microbiano; el calor húmedo mata a los microorganismos porque coagula sus proteínas y es más rápido y efectivo que el seco, que los destruye al oxidar sus constituyentes químicos. Los procedimientos prácticos se dividen convenientemente en dos categorías: 1. El calor húmedo: que comprende los métodos de esterilización por vapor a presión (autoclave) y la tindalización o esterilización fraccionada. 2. El calor seco: que comprende la esterilización con aire seco o caliente (horno) y la incineración. ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN Algunos materiales, particularmente los líquidos biológicos como el suero de los animales o las soluciones de sustancias como las enzimas y algunas vitaminas o antibióticos, son termolábiles, o sea, se destruyen por el calor; asimismo, otros agentes físicos como las radiaciones son perjudiciales para estos materiales e imprácticos para esterilizarlos, en consecuencia, queda la opción de hacerlo por filtración. material (ni tampoco salen del cultivo al exterior) a menos que el algodón este húmedo. ESTERILIZACIÓN POR RADIACIONES Las radiaciones más comunes que se usan para destruir a los microorganismos son: 1. La luz ultravioleta. Se utiliza principalmente para la esterilización de áreas y superficies, y cuya principal limitación es que debe ser absorbida para ser efectiva, no pasa a través del vidrio transparente u objetos opacos e irrita los ojos y la piel. 2. La luz infrarroja. Se emplea para reducir la contaminación de ciertos alimentos y se aplica durante la preparación de los mismos; el efecto esterilizante de este tipo de radiaciones se debe a la energía térmica que imparte de manera rápida, y por ello oxidan los componentes celulares de los microorganismos. 3. Radiaciones ionizantes. Se utilizan para la esterilización de material quirúrgico sensible al calor y otros materiales usados en medicina. ESTERILIZACIÓN GASEOSA Algunos gases ejercen una poderosa acción letal sobre los microorganismos, ya que destruyen varias enzimas y estructuras que son vitales para la duplicación de los mismos. El óxido de etileno es un gas que se difunde a través de los materiales porosos y penetra fácilmente la mayoría de los plásticos, tiene gran utilidad en la esterilización de artículos desechables, como las jeringas de plástico, así como los instrumentos voluminosos, tales como las máquinas cardiopulmonares (3) Autoclave Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. El modelo más usado es el de Manual de Laboratorio De Microbiología 7 Chamberland. Esteriliza a 121º C a una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante 20 a 30 minutos. Equipo: Consta de una caldera de cobre, sostenida por una camisa externa metálica, que en la parte inferior recibe calor por combustión de gas o por una resistencia eléctrica, esta se cierra en la parte superior por una tapa de bronce. Esta tapa posee tres orificios, uno para el manómetro, otro para el escape de vapor en forma de robinete y el tercero, para una válvula de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte. (2) IV. METODOLOGIA 4.1 Materiales en general Cámara Papel kraft Algodón hidrófilo Pabilo Papel Toalla Tijeras Marcador Cinta para rotular Bandeja Gasa 4.2 Procedimiento: 4.2.1 Procedimiento “Materiales y equipo” Primero: Clase introductoria y descriptiva de los materiales a usar. Segundo: Una exposición de todos los materiales desde el laboratorio hasta el área de almacenaje. 1) Microscopios 2)Medios de cultivo 3) Mechero de bunsen 4)Incubadora de bacterias 5) Incubadora de CO2 6) Asa bacteriológica 7) Centrifuga 8) Autoclave y su malla de acero inoxidable 9) Gradilla y tubos de ensayo 10) Trípode y malla de asbesto 4.2.2 Procedimiento “Esterilización “ Primero: Cortar el papel Kraft con las tijeras en pequeños trozos para poder envolver todos los implementos de vidrio. Segundo: Hacer los tapones usando el algodón hidrófilo y la gasa. Tercero: Introducir los tapones. 11) Tintes 12) Placas Petri . Sexto: Rotular la cantidad que hay en cada envoltura. Séptimo: Almacenar todo el material dentro de las estufas de esterilización Cuarto: Envolver (3 si son grandes y 2 si son pequeñas) placas Petri con el papel kraft y luego amarrarlos con el pabilo Quinto: Envolver los matraces de Erlenmeyer y La probeta con el papel kraft, y amarrarlos con el pabilo V. CONCLUSION 5.1 Conclusión materiales y equipo Se vio y reconoció cada material y equipo para usar. 5.2 Conclusión esterilización Se esterilizo correctamente le material VI. Bibliografía 1. Material de laboratorio. [Online] Acceso 2023 de mayode 11. Disponible en: https://materialeslaboratorio.com/microbiologia/. 2. Ramirez J, Medina Y, Unsanga I. Manual de laboratorio de microbiologia.. 3. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO. Manual de Microbiología General I.. Temperatura de la estufa https://materialeslaboratorio.com/microbiologia/
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