EstabilidadgeneticaTheobromacacao-CEDAIT 25-marz-21

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VALIDACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE PLANTAS DE CACAO 
(Theobroma cacao L.) DERIVADAS DE EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA USANDO 
MARCADORES MOLECULARES TIPO MICROSATÉLITES (SSR)
HÉCTOR JAIME SALAZAR DUQUE M.Sc. 
hector.Salazar@udea.edu.co
Variación 
Somaclonal
• Mutaciones genéticas de novo
• Cambios epigeneticos
Variación 
Somaclonal
• Esta condición de variación 
presenta ventajas y desventajas 
para la tecnología de 
multiplicación Invitro.
Variación Somaclonal
• Genotipo (ploidia)
• Tipo de explante
• Vía de Regeneración
• Tiempo del cultivo
• Composición del medio
• Reguladores de crecimiento
• Fuentes de carbono 
• Fuentes de aminoácidos
• pH en el medio
• Deficiencia de oxigeno
• Deficiencia o exceso de 
minerales
Detección de la variación somaclonal
• Un marcador molecular se refiere a cualquier molécula de proteína, ARN o ADN de tamaño 
molecular conocido.
• Permiten evidenciar variaciones en la secuencia de ADN de dos individuos , reconocimiento 
de genotipos, banco de germoplasma, clonación de genes y estudios evolutivos.
• Señaladores de diferentes regiones del genoma.
AFLPRFLP SNPS
Microsatélites o secuencias 
simples repetidas (SSR)
MARCADORES MOLECULARES (SSR) 
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
VALIDACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE PLANTAS DE CACAO 
(Theobroma cacao L.) DERIVADAS DE EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA USANDO 
MARCADORES MOLECULARES TIPO MICROSATÉLITES (SSR)
Material vegetal propagado por métodos convencionales
Granja de Yariguíes
Material vegetal propagado por métodos Biotecnológicos
Arboles Flores Botones florales 
Estaminodio Pétalos 
Se colocan los 
botones florales 
estériles en tubos 
cónicos 
Se descartan los 
botones 
semiabiertos y las 
flores
Se retira el exceso 
de humedad con 
papel absorbente 
Se sujeta el botón 
floral por el 
pedúnculo y se 
corta la parte apical
Se retiran los 
pétalos y 
estaminodios 
Se colocan 5 
explantes por caja 
de Petri (Pétalos y 
estaminodios)
Inducción de embriones Incubación 
Proceso de siembra
Urrea et al., (2011)
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
• Extracción 
de ácidos 
nucleicos
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
CONCLUSIONES
• Se verifica que la Embriogénesis Somática secundaria y que el protocolo establecido para regeneración puede 
ser usado para producir plántulas de Theobroma cacao desde el cultivo in vitro, de acuerdo a lo confirmado y 
encontrado usando marcadores moleculares tipo microsatelites SSR.
• No se encontraron diferencias significativas de variabilidad genética entre las plantas producidas a través 
Embriogénesis Somática secundaria y las plantas donadoras de campo.
• Debido a la alta reproducibilidad y confiabilidad, los marcadores tipo microsatelites son apropiados para 
determinar la fidelidad genética y la estructura poblacional, entre individuos provenientes de 
microprapagacion in vitro y plantas donadoras de cultivo en campo.
DETERMINACION DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA DE 
PLANTAS DE CACAO (Theobroma cacao L.)
CONSIDERACIONES
• Verificar mediante una etapa posterior piloto (Embriogénesis terciaria u otro ciclo de multiplicación 
posterior) la aparición o no de Embriones Somáticos morfológicamente diferentes o que describan 
perdida de vigor y fidelidad genético como lo reportan trabajos para la especie.
• Continuar de manera estricta con el seguimiento de las plántulas que son sometidas a la aclimatación de 
adaptación ex vitro, con el animo de garantizar que el material además de genotípico es fenotípicamente 
estable e igual a las platas de su procedencia
• Se esta realizando la validación del material que esta inmerso en el proyecto CEDAIT, para garantizar la 
fidelidad genética de los materiales entregados. 
GRACIAS! 
hector.Salazar@udea.edu.co