INFORME TINCIÓN GRAM

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UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
CARRERA DE MEDICINA 
BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA 
 PERIODO ABRIL - AGOSTO 2020 
 
 
1.- DATOS DE IDENTIFICACIÓN 
NOMBRES Y APELLIDOS PARALELO FECHA FECHA DE 
ENTREGA 
MELANIE MICHELLE LOPEZ 
CARRERA 
 
C 
 
 
2.- OBJETIVOS 
Identificar bacterias Gram positivas y bacterias Gram negativas 
Especificar el procedimiento de la técnica de Tinción Gram 
Determinar la importancia de la utilización Tinción Gram. 
3.- PREREQUISITOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
4.- MATERIALES E INSUMOS 
• Mechero 
• Asa 
• Cultivos 
• Colorantes: Cristal violeta, lugol, alcohol cetona, safranina 
• porta objetos 
• agua 
• puente de vidrio 
• aceite de inmersión 
• microscopio 
5. PROCEDIMIENTO 
1. Primero ponerse el equipo de bioseguridad correctamente 
2. Alistar los materiales 
Tema: Normas de bioseguridad y tinción Gram 
Calificación: (Informe) 
 Calificación: (Lab) 
UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
CARRERA DE MEDICINA 
BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA 
 PERIODO ABRIL - AGOSTO 2020 
 
3. Tener listo el cultivo de la caja petri previamente preparado 
4. Se toma una pequeña muestra del cultivo 
5. Se procede a realizar el frotis colocando en el porta objeto una gota de solución salina y 
mezclar con la muestra del cultivo bacteriano. Este frotis se lo lleva al mechero a una 
distancia de 80cm y posteriormente dejar secar. 
6. Colocar los portaobjetos sobre el puente de vidrio. 
7. Añadir unas gotas del cristal violeta cubriendo el frotis evitando que se vaya a derramar 
8. Se deja actuar durante 1 min 
9. Se escurre el exceso de colorante con agua desde el borde para evitar dañar el frotis 
10. Se aplica el segundo reactivo, el lugol, dejando actuar 1 min para evitar que salgo el cristal 
violeta durante 1 min 
11. Se procede a lavar echando agua delicadamente 
12. Se añade gotas del alcohol acetona hasta quedar incolora durante 30 segundos 
13. Luego se vierte gotas de safranina. 
14. Después se lava el exceso del colorante. 
15. Se le deja secar las muestras 
16. Finalmente se observa en el microscopio iniciando con el objetivo de 10x para enfocar 
luego se usa 40x para afinar la imagen o seleccionar un mejor campo, luego se procede a 
añadir el aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100x. 
17. Luego de observar se identifica y se describe a las bacterias gram positivas y gram 
negativas. 
6.- OBSERVACIÓN 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 
UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO 
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
CARRERA DE MEDICINA 
BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA 
 PERIODO ABRIL - AGOSTO 2020 
 
Gráfico N°1: Gram + Gráfico N°2: Gram - 
• Estas bacterias se tiñen de color morado 
• Posee una pared celular gruesa de peptido 
glucano 
• Su pared celular presenta: 
 El peptido glucano esta compuestas 
por numerosas capas entrecruzadas. 
 No poseen membrana externa 
 Acidos Teicoicos 
 No presentan lipopolisacaridos 
 Acidos lipoteicoicos 
 Polisacaridos C 
 No presentan fosfolipidos 
 No poseen espacio periplasmico 
• No presentan endotoxina 
• Presentan esporulacion algunas veces 
• Presentan capsula a veces 
• Senbile a la lisozima 
• Son mas sensibles a la penicilina 
 
 
• Estas se tiñen de un color rojo debido al 
colorante safranina 
• Posee una pared celular delgada de 
peptidoglucano 
• Además en su pared celular presentan: 
 Su peptidoglucano es más delgado 
 Membrana externa 
 No presentan ácidos teicoicos 
 Lipopolisacaridos: lípido A, 
polisacárido de la región central y 
antígeno O. 
 No presentan ácidos lipoteicoicos 
 Proteínas: canal de porina, 
dispositivos secretores y lipoproteína. 
 fosfolípidos 
 espacio periplasmico 
• Presentan endotoxina 
• No presentan esporulación 
• Tienen capsula algunas veces 
• Resistente a la lisozima 
• Más resistentes a la penicilina 
7.- CONCLUSIONES 
La tinción de Gram tiene importancia puesto a que sirve como herramienta de diagnóstico 
sencillo de realizar y de igual manera facilita la realización de un tratamiento eficiente contra 
las infecciones por bacterias ya que permite identificar sus características ya sean de gram 
positivas o gram negativas además de determinar qué tipo de bacteria es la causante de la 
patología. Una vez reconocida la bacteria será más fácil especificar sus componentes o 
estructuras bacterianas lo que favorece el entendimiento del mecanismo de acción de algunos 
antibióticos. 
8.- BIBLIOGRAFIA 
• Murray R. Microbiologia medica. 8th ed. Barcelona; 2017. 
• Artículo. La coloración de gram y su importancia en el diagnóstico microbiológico. Tinción de 
Gram [Internet]. Revista-portalesmedicos.com. 2013. Disponible en: https://www.revista-
portalesmedicos.com/revista-medica/coloracion-gram-diagnostico-microbiologico/ 
• López-Jácome L. [Internet]. Medigraphic.com. 2014. Disponible en: 
https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf