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UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA PERIODO ABRIL - AGOSTO 2020 1.- DATOS DE IDENTIFICACIÓN NOMBRES Y APELLIDOS PARALELO FECHA FECHA DE ENTREGA HENRY STALYN OÑA IZA C 15-05-2020 20-05-2020 2.- OBJETIVOS 1. Emplear la técnica de la tinción Gram y establecer diferencias entre bacterias Gram(+) y Gram(-) 2. Observar la morfología bacteria, y reconocer los modelos de la pared bacteriana. 3.- PREREQUISITOS 4.- MATERIALES E INSUMOS 1. Pipetas 2. Vasos de precipitados 3. Matraces 4. Kit de disección 5. Mechero de alcohol 6. Asas de inoculación 7. Gradilla 8. Portaobjetos 9. Cubreobjetos 10. Microscopio REACTIVOS 1. Alcohol antiséptico 2. Metanol 3. Etanol 4. Ácido acético 5. Formol 6. Jabón liquido 7. Azul de metileno – Cristal violeta 8. Safranina 9. Etanol 95% - Alcohol acetona 10. Yodo de Gram Tema: TINCIÓN GRAM Calificación: (Informe) Calificación: (Lab) UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA PERIODO ABRIL - AGOSTO 2020 5. PROCEDIMIENTO 1. Colocar gotas de agua sobre el portaobjetos, y disolver una pequeña cantidad de cultivo bacteriano 2. Preparas una fina extensión de frotis y dejar secar 3. Fijar el frotis 4. Tinción 5. Cubrir el frotis con cristal violeta durante aproximadamente 3 minutos, retirar el colorante lavándole con agua de manera indirecta evitando que la muestra se estropee. 6. Cubrir el frotis con Lugol durante 1 minutos, luego retirarlo cuidadosamente con un lavado 7. Retirar el colorante con etanol, hasta que las gotas que caen queden sin color. 8. Añadir una gota de agua a la preparación, añadir la safranina y colocar el cubreobjetos 9. Lavar el colorante de contraste (safranina) con agua. 10. Observar al microscopio 6.- OBSERVACIÓN Gráfico N°1: Gram + Gráfico N°2: Gram - • Las Gram positivas retienen la tinción azul • Las Gram positivas no tienen espacio periplasmático • Las bacterias Gram positivas poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano. • Gram negativas se tiñen de color rosado • Las Gram negativas tiene espacio periplasmático • Las negativas poseen una pared celular más completa. UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA PERIODO ABRIL - AGOSTO 2020 7.- CONCLUSIONES Las bacterias Gram (+)son a aquellas que se tiñen de azul oscuro o violeta. Por otra lado las bacterias Gram (-) se tiñen de un color rosado tenue. La tinción de Gram es un herramienta fundamental para determinar qué tipo de bacteria es; Gram (+) o Gram (-), de tal manera que nos permita reconocer estructuras, junto con el conocimiento de su metabolismo catalasa (+) catalasa (-), al conocer esta información podemos determinar el tipo de antibiótico a utilizar. En el caso de ser una bacteria Gram positiva se podría recomendar el uso de penicilinas, a diferencia de las Gram negativas estas no son sensibles a dichos medicamentos. 8.- BIBLIOGRAFIA PatrickR. Murray, PhD., Ken S. Rosenthal, PhD., George S. Kobayashi, PhD., Michael A. Pfaller, MD. 2017. "MICROBIOLOGÍA MÉDICA"., 8va Edición., Ed. Mosby. Tinción de Gram: fundamento, materiales, técnica y usos - Lifeder. (2020). Retrieved 21 May 2020, from https://www.lifeder.com/tincion-de-gram/ A-Z, E., auxilios, P., médicas, P., día, S., niños, B., & nutrición, D. et al. (2020). Tinción de Gram. Retrieved 21 May 2020, from https://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram- 13399 DRA. ESP. SANDRA VILLACIS MD. ESP. ALICIA ZABALA HARO FIRMA…………HENRY OÑA…………….. DOCENTE NOMBRE DEL ESTUDIANTE https://www.lifeder.com/tincion-de-gram/ https://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram-13399 https://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram-13399
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