Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
1 2 1 HISTOLOGÍA I 1.0 Generalidades 3 2.0 Histoquímica y citoquímica 4 3.0 Microscopio 5 4.0 Citoplasma y núcleo celular 7 ROSS, Michael. Histología. Editorial Pan-americana. México. 7ª Edicion www.consultec.com.br/uniderp/vestibular2020 www.studentconsult.com UNIDAD 1 RESUMENRESUMEN 3 1 Introducción a la Histología 1.0 - Generalidades de técnicas utilizadas, preparación del tejido. El objetivo de un curso de histología es con- ducir al estudiante a comprender la microanatomía de las células, tejidos y órganos y a correlacionar la estructura con la función. Histología (del griego: histos = tejidos y logos = ciencia) también llamada anatomía microscópica, es el estudio científico de las estructuras microscópi- cas de los tejidos y órganos del cuerpo. El estudio de los especímenes biológicos debe ser ordenado y efectuado con los métodos apropia- dos; cada uno debe tratarse de forma tan individual como sea posible. Los organismos están formados por órganos, tejidos, células, partículas y sustancias contenidas en la matriz celular, por lo cual se necesita de una serie de técnicas para su observación. Técnicas histológicas: se denominan a varios procesos en el cual se prepara un tejido para su ob- servación microscópica. Se utiliza tejido muerto que se mantiene mediante acciones químicas inmediata- mente después de extraído y se cortan en secciones muy delgadas, denominadas cortes histológicos. Las técnicas utilizadas por los histólogos son diversas en extremo, utilizando microscopio óptico o microscopía virtual, que representa métodos para examinar muestras microscópicas en la pantalla de un ordenador, en algunas ocasiones utilizamos micros- copía electrónica por la micro anatomía más detallada de algunas estructuras no visibles en microscopio óp- tico. Este capítulo proporciona un estudio de téc- nicas y una explicación de cómo los datos aportados por éstas pueden ayudar al estudiante a comprender mejor la función de las células, tejidos y órganos. Preparación del tejido: el desarrollo de nue- vas metodologías obliga a diversificar los métodos; sin embargo, existe un método estándar para prepa- rar cortes de material biológico que comprende varios pasos utilizando sustancias, que sin ellos sería impo- sible la identificación de ciertas estructuras celulares. Obtención de la muestra: antes de iniciar cualquier procedimiento se debe primeramente re- tirar la muestra, se puede realizar de varias formas; si proviene de un individuo vivo recibe el nombre de biopsia; la manera de tomarla puede ser excisional, incisional, por sacabocado, por aspiración, punción, raspado, etc. Cuando la toma de las muestras es de un cadáver, entonces se trata de una necropsia, pero generalmente lo estudiamos de tejidos vivos. El primer paso en la preparación de una mues- tra de tejido u órgano es la fijación para conservar la estructura. Fijación: El objetivo de este primer paso es conservar y fijar estructuras, existen varias sustancias químicas que se utilizan, pero el fijador más común es la formalina, una solución acuosa de formaldehído al 37%, en diluciones variadas. El formaldehído con- serva la estructura general de la célula de los compo- nentes extracelulares, éste no altera su estructura tri- dimensional de forma significativa. Deshidratación: Después de la fijación la muestra se lava y se deshidrata en una serie de solu- ciones alcohólicas de concentración creciente hasta alcanzar alcohol al 100%. Aclaramiento: En este paso se sustituye el al- cohol por una sustancia que haga de intermediario entre el agua y la parafina que se usará posteriormente para la infiltración. La sustancia comúnmente utiliza- da es el Xileno o Tolueno, aunque también pueden UNIDAD 1 RESUMENRESUMEN 4 usarse otros disolventes orgánicos como benceno. Tras varios baños, se consigue eliminar el alcohol puro y todo el tejido queda impregnado del xilol, el cual habrá entrado hasta lo más profundo del tejido. Durante este proceso el tejido pierde color dando lu- gar al término de aclaramiento. Inclusión: Es el método más común de endu- recer el tejido y consiste en infiltrar la muestra con sustancias líquidas que tras un proceso de polimeri- zación o enfriamiento se solidifican, sin afectar a las características del tejido. Para examinar una muestra se requiere su infiltración con un medio de inclusión que permita realizar cortes muy delgados, la cual uti- lizamos la parafina para este proceso. Corte: Se realizan cortes histológicos, muy delgados según lo requerido o la costumbre del la- boratorio donde se realice la técnica (en el rango de 5µm a 15 µm). El ángulo de corte entre el cuchillo de acero del micrótomo. Una vez realizado el corte se da un baño de agua destilada, para que la parafina se estire. Un buen corte histológico debe tener un gro- sor aproximado de 3-5 micras para que sea fácilmente atravesado por la luz del sol y atraviese los poros ce- lulares. Existen diversos tipos de corte: longitudinal, transversal y oblicuo, dependiendo de lo que se quiere observar generalmente el oblicuo es el que tiene mejor campo de visibilidad de ciertas estructuras. Montaje: Los cortes obtenidos se montan so- bre portaobjetos de vidrio la cual se coloca la mues- tra y antes de cubrirla se realiza la tinción, se cubre con un medio de montaje como resinas de acrílico o generalmente un cubre de vidrio, para facilitar su ob- servación. Tinción: Las células, por sí mismas, no poseen coloración. Por tanto, para poder observar la morfo- logía tisular deben “teñirse”. Existen muchos tipos de tinciones para diferenciar las distintas estructuras o sustancias en los tejidos. La tinción más usada o tam- bién llamada “de rutina” es la de hematoxilina y eo- sina (H&E). Se usa un colorante llamado hematoxili- na que tiñe las sustancias ácidas o que las contengan, como el núcleo que contiene ácido desoxirribonuclei- co (ADN) La eosina amarillenta tiñe las estructuras básicas como el citoplasma y demás orgánulos eosin- ofílicos de la célula. 2.0 - Histoquímica y citoquímica La histoquímica es el estudio químico de los tejidos independientemente del método de análisis empleado. Esta técnica permite la identificación y lo- calización de compuestos o radicales químicos en las células y tejidos. Los procedimientos químicos espe- cíficos pueden proveer información acerca de la fun- ción de las células y de los componentes extracelulares de los tejidos. La citoquímica es una rama de la biología ce- lular enfocada en el estudio de la composición quími- ca de las células y sus procesos biológicos moleculares mediante análisis químico y químico físico que per- mitan su observación. Existen varios tipos de colorantes; pero las más comunes son la hematoxilina y eosina. La hematoxilina, que es un colorante básico, colorea los componentes ácidos de la célula (núcleo) de color morado o lila; y la eosina, que es un colorante ácido, se une a estructuras básicas de la célula (cito- plasma) otorgándole una tonalidad rosácea. La finalidad de utilizar estos dos colorantes es separar e identificar las principales estructuras que son el nú- cleo y el citoplasma. Sin olvidar que estos colorantes tienen afini- dad con ciertas estructuras: Los componentes ácidos de una célula, tienen afinidad por colorantes básicos, entonces se denomi- na componente basófilo o basofilia, mientras que los componentes básicos de una célula tienen afinidad por los colorantes ácidos, entonces se denomina com- ponente acidófilo o acidofilia. El termino filia = afinidad. UNIDAD 1 5 HEMATOXILINA EOSINA Actúa como un colorante BÁSICO que se asocia y tiñe componentes ÁCIDOS de la célula como estructuras aniónicas (que posean fosfatos, sulfatos y/o carboxilos ionizados) Heterocromatina y nucléolos ARN ribosoma, Matriz extracelular Color: azul o violeta Colorante ÁCIDO(predomina densidad de carga negativa), que se asocia y colorea estructuras catióni- cas (componentes BÁSICOS) del citoplasma y matriz extracelular Filamentos citoplasmáticos. Componentes membranosos intracelular. Fibras extracelulares (por sus aminoácidos básicos ionizados) Color: rosado 3.0 - Microscopio El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños como para ser vistos por la vista del ser humano. El térmi- no microscopio es la conjunción de dos conceptos, por un lado “micro” que es equivalente a “pequeño” y “scopio” que significa “observar”, en suma, se refiere a la observación pequeña, o en menor grado. El microscopio es un instrumento óptico que aumenta la capacidad de observación a niveles de acercamiento tal que hasta hace posible el análisis de partículas. La imagen que se obtiene es realmente una investigación sobre la composición de los objetos. Al estudio y análisis de los objetos pequeños se lo deno- mina “microscopia”. Existen varios tipos de microscopios: .Microscopio de campo claro (óptico) .Microscopio de contraste de fases (de interferencias) .Microscopio de campo oscuro .Microscopio de fluorescencia .Microscopio ultravioleta .Microscopio de barrido .Microscopio de polarización .Microscopio electrónico de trasmisión (MET) .Microscopio electrónico de barrido (MEB) .Microscopio electrónico de trasmisión-barrido (METB) .Microscopia de fuerza atómica .Microscopia virtual De las cuales el Microscopio óptico de campo claro es el que más utilizamos, por su sencillez de uti- lización y además por contar con él en la Universidad. UNIDAD 1 6 A continuación un diseño con las partes del microscopio óptico de campo claro: Funciones de cada tornillo: 1.Ocular: se cuenta con 2 lentes ocu- lares las cuales se utilizan para observar la muestra. 2.Cámara tu- bular: en algunos mi- croscopios encontramos entrada USB para la pro- yección de la imagen en un ordenador. 3.Tubo: órgano en forma tubular la cual proyecta la imagen obte- nida del objetivo, a am- bos oculares. 4.Objetivo: Son compuestos cilíndricos utili- zados para aumentar las imágenes de forma creciente. En este microscopio contamos con 4 objetivos, cada uno con medidas y colores para distinción, de menor a mayor; objetivo rojo (menor aumento) siempre ini- ciando por éste la observación para tener una dimen- sión de toda la muestra, luego objetivo amarillo, luego el azul, y por último el blanco (mayor aumento) éste observa con más exactitud a las células y sus estructu- ras, el objetivo blanco es también aquel que utiliza un óleo para observar las estructuras con mayor nitidez, llamado óleo de inmersión. 5.Lente condensador auxiliar: estructura en forma de lente que sirve para aumento de las estruc- turas. 6.Platina: sirve de apoyo para sostener la lá- mina, cuenta con tornillo de ajuste de forma cilíndrica giratoria, que sirve para la movimentación lateral de la lámina y movimientos para frente y para atrás. 7.Condensador: pieza utilizada para emitir la luz a la lente del condensador auxiliar. 8.Diafragma de campo: pieza circular fijada a la base que sirve para emitir luz al condensador. 9.Fuente luminosa: lugar de donde se origina la luz a fin de clarear y observar las tinciones, cuenta con un regulador de luz para máximo y mínimo se- gún necesidad. 10. Ajuste de foco: pieza giratoria que sir- ve para focalizar y buscar nitidez de las estructuras, cuenta con 2 tornillos; macrométrico y micrométrico. Figura 1.0 - Microscopio UNIDAD 1 7 4.0 - Citoplasma y núcleo celular. Componentes. Estructura. Funciones. La célula es la unidad básica, estructural y fun- cional de todo ser vivo, la cual está formada por núcleo (el centro de control celular) y citoplasma (sustancia liquida con componentes nutrientes y organelas). A partir de la célula el organismo está for- mado como individuo organizado. Existe niveles de organización que inician formados por átomo, ma- cromolécula, macromolécula, célula (a partir de aquí obtenemos vida) tejidos, órganos y sistemas hasta lle- gar a formar el individuo, en nuestro caso estudiamos al ser humano. El tejido es un conjunto de células que se unen para formarlo y tener una determinada función. ESTRUCTURA - CARACTERÍSTICAS DE LAS CÉLULAS Es la menor unidad estructural y funcional de TODO ser vivo. (CONCEPTO) La ciencia que la estudia se llama CITOLO- GÍA La FORMA de las células varían mucho de acuerdo a su función, con el medio en el cual se en- cuentran, y algunas no presentan una forma constan- te, sino que la modifican con frecuencia, por ejemplo, algunos de los leucocitos. Los componentes de una célula varían de nú- mero y de especialización, teniendo en cuenta que son de nombres y funciones específicas. El TAMAÑO de las distintas células es muy variable, el promedio de la mayoría, varía entre 10-60 un. La mayor de ellas es el ovocito u oocito (célula germinal femenina que da lugar al ovulo), el cual po- see diámetro de un punto final (.) Las demás células son invisibles a ojo desnudo. Figura 1.1 - Estructura de la célula EN EL CITOPLASMA PODEMOS ENCONTRAR COMPONENTES QUE SE CLASIFICAN EN: Inorgánicos (agua y sales) Orgánicos (proteínas, hidratos de carbono, lí- pidos y ácidos nucleicos) Compuesta por agua (70 – 80%), mientras que casi la totalidad del resto está formada por compues- tos orgánicos. FUNCIONES DE LAS CÉLULAS 1. Absorción: la capacidad celular de captar sustan- cias del medio circundante. 2. Secreción: ciertas células están capacitadas para transformar las moléculas absorbidas en un produc- to específico, que luego es eliminado bajo la forma de secreción. 3. Excreción: pueden descartar los productos de dese- cho formados por sus procesos metabólicos. 4. Respiración: producen energía mediante la utiliza- ción del oxígeno absorbido en la oxidación de los nu- trientes. Esta degradación de los alimentos que consu- me oxígeno, se denomina respiración celular. 5. Irritabilidad: es la capacidad de la célula de reac- cionar ante un estímulo, por ejemplo, la luz, o una ac- ción mecánica o química. Todas las células son irrita- bles, pero esta propiedad está más exacerbada en las células nerviosas. 6. Conductividad: es la capacidad de transmitir un impulso, y son las principales propiedades fisiológicas de las células nerviosas. 7. Contractilidad: es la capacidad de la célula de UNIDAD 1 8 acortarse en una dirección determinada, como reac- ción ante un estímulo. Característica especial de las células musculares. 8. Reproducción: las células poseen la capacidad de renovarse por crecimiento y división, y así se repro- ducen. NÚCLEO CELULAR El núcleo celular es una estructura membra- nosa el cual se encuentra normalmente en el centro de las células eucariotas. Contiene la mayor parte del ma- terial genético celular, organizado en varias moléculas extraordinariamente largas y lineales de ADN, con una gran variedad de proteínas, como las histonas, lo cual conforma lo que llamamos cromosomas. El con- junto de genes de esos cromosomas se denomina ge- noma nuclear. La función del núcleo es mantener la integridad de esos genes y controlar las actividades ce- lulares regulando la expresión génica. Por ello se dice que el núcleo es el centro de control de la célula. 5.0 - Tipos fundamentales de tejidos en el humano. Histogénesis El ser humano está formado por varios tipos de tejidos las cuales conforman sus órganos. Los tipos fundamentales o básicos de tejidos son: Tejido Epitelial: Es un tejido compuesto por células adyacentes relacionadas entre sí de distintas maneras, que forman barreras entre el organismo y sus super- ficies externas e internas. Es a vascular y ricamente inervado, su nutrición es indirecta que proviene de tejido conectivo. Tejido Conectivo o conjuntivo: Es un tejido rica- mente vascularizado, compuesta por células, fibras y sustancia amorfa rico en nutrientes. Siempre acompa- ñaal tejido epitelial para su nutrición. Tejido Muscular: Es un tejido característico de los Figura 1.2 - Tejido Epitelial Figura 1.3 - Tejido Conectivo Figura 1.4 - Tejido Muscular Figura 1.4 - Tejido Nervioso músculos del cuerpo, contiene células diferenciadas y una función que le hace ser un tejido único, que es la contracción muscular. Tejido Nervioso: Es el tejido que forma al sistema nervioso, compuesta por células propias llamadas neuronas que cumplen la función de transmisión de impulso nervioso entre una y otra desde la periferia para llegar al centro y dar una respuesta generalmente motora, esto ocurre de forma unidireccional. UNIDAD 1 9 HISTOGÉNESIS Durante el desarrollo del embrión se van for- mando las capas germinales que darán lugar, con el tiempo y tras la diferenciación celular de miles o mi- llones de células a diferentes tejidos que formarán ór- ganos. Este proceso mediante el cual las células indife- renciadas dan lugar a tejidos específicos se denomina histogénesis. El primer paso de la histogénesis es la formación de las 3 capas germinales, de las que hemos hablado de forma extensa en 3 artículos dedicados: ectodermo, endodermo y mesodermo. Cada una de estas capas dará lugar a diferentes tejidos, algunos de ellos mantendrán su posición rela- tiva dentro del individuo y otros migrarán durante su diferenciación hasta colocarse en su órgano de desti- no. En general el ectodermo, la capa más exte- rior del embrión dará lugar a los epitelios, no solo al epitelio exterior sino también a los epitelios que re- cubren los órganos internos como el epitelio estoma- cal o intestinal (aunque teóricamente esos espacios se encuentran fuera del cuerpo), así como las glándulas de estos órganos, como las glándulas sudoríparas o el páncreas. Además, a partir del ectodermo se formarán las capas regiones cerebrales más primitivas, como el rombencefalo o el mesencéfalo. El ectodermo inter- viene en la formación del sistema nervioso gracias a que forma un surco en su superficie que después será invaginado para formar parte del notocordio. El mesodermo dará lugar a la musculatura, el sistema circulatorio y a la sangre, los tejidos que con- sumen y transportan oxígeno. Además, el mesodermo formara algunas de las vísceras, los huesos, el aparato reproductor y el urinario. Finalmente, a partir del endodermo se gene- rarán todo el sistema nervioso periférico, el sistema gastrointestinal y el respiratorio. UNIDAD 1 10 IDENTIFICACIÓN DE LOS TEJIDOS Estos, presentan a la inspección macroscópica una apariencia sólida, de consistencia variable, en la que resalta la asociación entre el Tejido epitelial (Pa- rénquima) y el Tejido Conectivo (Estroma). Definién- dose el primero como la parte esencial o específica y funcional del órgano, y al segundo como la trama o armazón de tejido conjuntivo, que sirve para soste- ner, entre sus mallas los elementos celulares. Con los conocimientos actuales ya es evidente que los com- ponentes estomáticos pueden también tener algunas funciones parenquimatosas específicas de cada tipo de órgano. Antes de observar una lámina histológica de- ben llevar en cuenta algunos puntos. Reconocer que tipo de tejido es. Saber las clasificaciones de cada tipo de tejido. Observar la imagen como UN TODO. UNIDAD 1
Compartir