1 Unidad I - Introduccion de la HIstologia Tecnicas pptx

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Unidad
Tema
 II y CT.
1°
A, B, C, D, E. 
Dra. Solanche Molinas.
Histologia I.
I.
TÉCNICAS 
HISTOLÓGICA.
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● Es el estudio científico de las estructuras 
microscópicas de los tejidos y órganos del 
cuerpo.
“El estudio del tejido” y se refiere al análisis 
de la composición microscópica y la respectiva 
función del material biológico.
¿Qué es la Histología?
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● El tejido se forma por la agrupación de células con la 
misma función.
● Los órganos son unidades funcionales mayores, 
compuestas por distintos tipos de tejidos, por ejemplo el 
hígado.
● Los sistemas de órganos comprenden varios órganos con 
funciones relacionadas, por ejemplo, el aparato 
respiratorio, formado por la nariz, laringe, la tráquea.
● Los sistemas difusos definen grupos celulares con 
funciones relacionadas, localizadas en varios órganos 
distintos, por ejemplo el sistema inmune.
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Si bien por su etimología la palabra histología significa 
el estudio de los tejidos; la asignatura histología 
incluye, además, la estructura de las células y de los 
órganos, es decir, el estudio de las células o citología, el 
estudio de los tejidos o histología propiamente dicha y 
el estudio de la estructura de los órganos o histología 
especializada.
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Técnicas histológicas.
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Llamamos técnica histológica al proceso que se le puede 
dar a una muestra de un órgano, obtenida por biopsia o 
necropsia; a ser visualizado en el microscopio.
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Las muestras de biopsias suelen 
obtenerse en consultorio o durante 
una intervención quirúrgica.
Las muestras son mandadas al 
laboratorio, y las personas 
responsables de procesar el tejido y 
colocarlos en portaobjetos son los 
“histotecnólogos”. 
Estas muestras deben estar bien 
etiquetas con los datos del paciente 
y especificando a qué porción y qué 
órgano corresponde.
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Preparación de 
tejidos.
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Existen tres 
pasos a la hora 
de preparar una 
muestra:
Primer paso: 
Formalina.
Segundo 
paso: inclusión 
de parafina y 
corte.
Tercer paso: 
tinción.
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Primer paso.
La preparación de una 
muestra de tejido u órgano es 
la fijación para poder 
conservar la estructura.
La fijación conserva de forma 
permanente la estructura del 
tejido para tratamientos 
posteriores.
Las muestras deben 
sumergirse en el fijador 
inmediatamente después de 
extraerse del organismo.
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La fijación se utiliza para:
-Abolir el metabolismo celular.
-Impedir la degradación enzimática 
de las células y tejidos por la 
autolisis (autodigestión)
-Destruir microorganismos 
patógenos tales como bacterias y 
hongos o virus.
-Endurecer el tejido como resultado 
de la formación de enlaces 
cruzados o de la desnaturalización 
de moléculas proteicas.
formalina.Solución acuosa de 
formaldehido al 
37%.
El más común.
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Después de la fijación se lava y 
se deshidrata en una serie de 
soluciones alcohólicas. 
Segundo paso.
Seguidamente se hace el aclarado 
con xileno o tolueno para extraer 
el alcohol antes de filtrar a la 
parafina.
Cuando la parafina se enfría y se 
endurece, se empareja para 
formar un bloque de tamaño 
adecuado.
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El bloque se coloca 
en una máquina 
cortadora especial; 
microtomo, que lo 
corta en rebanadas 
finas con cuchillas de 
acero.
Segundo paso.
Los cortes obtenidos 
se montan sobre los 
portaobjetos de 
vidrio utilizando un 
medio de montaje 
(resinas de acrílico) 
como adhesivo.
Dra. Solanche Molinas.Dra. Solanche Molinas.
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Las muestras se tiñen para permitir 
su examen ya que los cortes en 
parafina son incoloros.
Tercer paso.
Para colorear los cortes histológico, 
la parafina debe disolverse y 
extraerse, una vez más xileno y los 
tejido deben rehidratarse mediante 
el uso de unas soluciones de 
alcohol.
El tejido sobre el portaobjetos se tiñe 
con hematoxilina. (soluble en 
agua)
El colorante en contraste, la 
eosina.(soluble en alcohol)
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Son cortes del páncreas. Se muestra resultado de tinciones, en el A solo con hematoxilina. El en B solo con 
eosina y en el C Hematoxilina y eosina. (H&E)
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El procedimiento no permite ver de forma adecuada ciertos 
componentes estructurales de los cortes histológicos tales como 
elastina, fibras reticulares, membranas basales y lípidos.
Cuando se desea estudiar estos componentes, se pueden utilizar 
otros procedimientos de tinción, en su mayoría selectivos.
Estos procedimientos incluyen el uso de orceína y fucsina- 
resorcina para el material elástico y la impregnación argéntica 
para fibras reticulares y las membranas basales. 
Tener en cuenta...
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Tinción o Coloración.
● Luego de realizado el corte, se procede a la 
rehidratación para permitir su coloración.
● Colorantes: reciben esta denominación las sustancias 
que pueden conferir color a otros cuerpos.
● Coloración: es el proceso mediante el cual un cuerpo 
es teñido por una sustancia colorante, sin perder el 
color cuando es lavado con el disolvente utilizado al 
preparar la solución colorante.
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Clasificación de los 
colorantes:
Según su origen se clasifican en:
COLORANTES NATURALES:
- Animales (carmin).
- Vegetales (hematoxilina, orceína, 
azafrán)
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COLORANTES ARTIFICIALES O 
SINTÉTICOS (COLORES DE ANILINA):
- Ácidos: sales cuyas base es incolora 
y su ácido es coloreado (eosina o 
eosinato de sodio). Son colorantes 
citoplasmáticos.
- Básicos: sales cuya base es 
coloreada y el ácido es incoloro (azul 
de metileno o clorhidrato de azul de 
metilena). Son colorante nucleares.
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- Neutros: sales en las que 
tanto el ácido como la base 
son coloreados. Tiñen el 
núcleo de un color y el 
citoplasma de otro.
- Indiferentes: no forman 
sales. Tiñe aquellos 
sustancias que tienen un 
poder disolvente superior al 
del líquido que ha servido 
para preparar la solución 
colorante. (Sudán III, rojo 
escarlata)
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Por otro lado, las coloraciones 
pueden ser:
- Ortocromáticas: los 
tejidos adquieren un 
color igual al de la 
solución colorante 
empleada. Ej: azul de 
toluidina, tejido 
nervioso.
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- Metacromáticas: una 
sustancia o un 
componente celular se 
tiñe con un color 
diferente al del 
colorante empleado. 
Ej: azul de toluidina en 
cartílago, células 
cebadas.
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Microscopia.
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● Microscopía óptica.
● Microscopía electrónica. (microscopio 
electrónico de transmisión y microscopio 
electrónico de barrido).
● Microscopía de Fuerza Atómica.
● Microscopía Virtual.
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Microscopio 
Óptico.
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Microscopio 
Óptica.
● Ya sea simple o compuesto; es un instrumento que 
amplifica una imagen y permite ver más detalles de lo que 
es posible a simple vista.
● La función de un microscopio es la de ampliar una imagen a 
un nivel en el que la retina pueda resolver información, que 
estaría por debajo de la resolución.
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Los componentes del microscopio de campo claro son los 
siguientes:
● Fuente luminosa; para la iluminación de la muestra.
● Lente condensador para enfocar el haz de luz a la altura de 
la muestra.
● Platina sobre la que se coloca el portaobjetos.
● Lente objetivo para recoger la luz que ha atravesado la 
muestra.
● Lente ocular a través de la cual se puede examinar 
directamente la imagen formada por la lente de objetivo.
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Ocular
Lente 
condensadorFuente 
Luminosa
Objetivo
Platina
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Además del MO campo claro, hay otros sistemas ópticos como:
1- Microscopio de contraste de fase; se utilizan para aumentar el 
contraste sin teñir.
2- Microscopio de fluorescencia y confocales; diseñados para 
visualizar estructuras mediante el uso de técnicas específicas. Como 
la inmunofluorescencia.
Otros Sistemas 
Ópticos.
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MICROSCOPIO 
ELECTRÓNICO.
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Hay dos tipos de microscopios electrónicos que 
proporcionan datos morfológicos y analíticos en las 
células y tejidos;
- El microscopio electrónico de transmisión (MET)
- El microscopio electrónico de barrido (MEB)
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La óptica del microscopio electrónico es similar a la del 
microscopio óptico, excepto que el de MET utiliza un haz de 
electrones en lugar de un haz de luz.
● Una fuente de electrones (cátodo, cañón de electrones).
● Los electrones son atraídos hacia un ánodo.
● Hay una diferencia eléctrica entre el cátodo y el ánodo 
que imparte a los electrones un voltaje de aceleración 
entre 20.000 y 200.000 voltios, generando el haz de 
electrones.
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No siempre 
estarás motivado, 
por eso, tienes 
que aprender a 
ser disciplinado. PREGUNTAS?
drasolanchemolinas@gmail.com
@drasolanchemolinas
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