Clase 2-Enfermedades toxoinfecciosas

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Enfermedades toxoinfecciosas
Introducción:
Incluye un conjunto de bacterias G+ productoras de potentes toxinas que producen enfermedades por toxoinfecciones febriles, gangrenosas o septicémicas de curso sobreagudo/agudo.
Algunas son flora intestinal y tienen la capacidad de formar esporas en el medio ambiente.
Las toxinas producidas son proteicas, antigénicas, alguans termolábiles y algunas protoxinas. En general se dividen en toxinas mayores (letales: necrosante-edematosa-hemorragicas) y menores (no letales)
La prevención se realiza mediante vacunación.
1- Bacillus anthracis carbunclo
2- Clostridiosis
a) Clostridios neurotóxicos
C. tetani tétanos
C. botulinum botulismo
b) Clostridios histotóxicos
C. perfringens
C. novyi (A-C)
C. septicum Gangrena gaseosa/ pierna negra 
C. chauvei
C. sordelli
C. haemolyticum (ex C. novyi tipo D) hemoglobinuria bacilar
C. novyi tipo B hepatitis infecciosa necrosante
c) Clostridios enterotóxicos y enteropatógenos
C. perfringens
C. septicum
C. spiriforme
C. sordelli
Carbunclo bacteridiano
Definición
Enfermedad infecciosa aguda, septicémica y telúrica. Zoonótica. Afecta principalmente herbívoros y al hombre. Causada por bacillus anthracis, se caracteriza clínicamente por los síntomas de infección general y anatomopatologicamente por una esplenomegalia, incoagulabibildad sanguínea y edema SC serohemorrágico.
Etiología
Bacillus anthracis.
Bacilo G+ de 3-6um de longitud, tiene extremos romos y son inmóviles. Presentan cápsula (in vivo, in vitro hay que suplementarlo con suero (albumina), CO2 y HCO3-).
Pueden formar esporas elipsoidales de ubicación central, no deformantes (la misma se desarrolla en presencia de O2)
Metabolismo aerobio/anaerobio facultativo. No exigente para crecer en medios de cultivo. 
Las esporas pueden ser destruídas por: peróxido de hidrógeno 3%, formol 10%, glutaraldheído 4% (pH 8-8,5)
Patogenicidad:
1- cápsula
2- toxinas
· Antígeno protector (PA)
· Factor edema (FA)
· Factor letal (FL)
· 
Cápsula
Evade las defensas del huésped (evita que sea fagocitado por Mo) y lo ayuda a dispersarse. Formado por un homopolímero de D-acido glutámico. Es de baja inmunogenicidad.
Es de origen plasmídico pXO2
La síntesis de la cápsula se debe a 3 enzimas producto de los genes capA-capB-capC. El tamaño de la cápsula codifacado por el gen dep.
Toxinas
Formados por PA-FA-FL. PA se llama así porque levanta una rta. inmune (inmunogénico). Individualmente ninguna de las toxinas es letal, para ello se tienen que combinar para ejercer su acción. 
PA+FL PA actúa uniéndose al receptor de la célula blanco permitiendo la entrada de FL. Esta lo que hace es producir la lisis de los macrófagos.
PA+FE FE al igual que el anterior entra gracias a PA, su función es aumentar el AMPc, esto lleva a un desbalance la homeostasis del agua dentro de la célula.
Las toxinas son producida en el plasmido pXO1 (genes: paga, lef y cya).
Epidemiología
La letalidad para los herbívoros es de 90-100%, en cambio los carnívoros son bastante resistentes (estos últimos lo pueden diseminar).
Las esporas que se generan cuando la bacteria contacta con el oxígeno del ambiente son extremadamente resistentes. 
Las pasturas y aguas contaminadas por esporas son ingeridas por los animales siendo la principal forma de infección. Otra forma de ingreso menos común: inhalación y abrasiones en la piel.
Los suelos arcillosos (alcalinos) no absorben agua, por lo que las lluvias arrastran las esporas diseminándolas.
Las aves de rapiña son resistentes a la infección y contribuyen con la diseminación. Artrópodos hematófagos pueden actuar como vectores pasivos.
Materias primas de alimentos (harina de carne, hueso y sangre), lana y cueros son vehículos de la enfermedad en lugares donde nunca existió.
 Patogenia
Ingestión de esporas germinación en ID (el ácido gástrico no lo afecta) penetración de la mucosa multiplicación en los macrófagos que lo transportan a ganglios regionales Bacteriemia y septicemiamultiplicación en el bazo muerte por anoxia generada por los Ba que obstruyen los vasos y las toxinas que afectan el SNC, riñones y endotelio.
Signos clínicos
PI: 2-10 días
Bovinos:
· Sobreagudo cae muerto repentinamente.
· Agudocasos donde mata en 24 hs.: aumento de temperatura (>41°C), taquipnea, apatía, pulso acelerado, anorexia, hematuria, hemorragia por orificios naturales.
Casos donde mata en 5 días o más: edemas en región faríngea, pecho, flanco y vientre, disnea, ollares dilatados. Las hembras en lactancia secas, las preñadas abortan. Convulsión y muerte.
Ovinos:
· Sobreagudo inquietud, temblores y disnea. Mucosa cianótica, hemorragias.
Equinos:
· Carbunclo interno sobreagudo/agudo muerte rápida, sangre oscura, difícil coagulación, edemas en diferentes partes del cuerpo.
· Carbunclo externo cutáneo necrosis local, edema, caliente y dolor.
Cerdos:
· Faríngea crónica, edema y exudado serofibrinoso o necrótico en la zona de la amígdala. Los LFN retrofaríngeos hemorrágicos. Es la más frecuente, muere en 5 días.
· Entérica ulceras hemorrágicas y edematizadas en ID. LFN mesentéricos edematizados y hemorrágicos
· Septicémica muerte fulminante
Lesiones
Bazo esplenomegalia, friable lleno de sangre oscura. Consistencia pastosa (multiplicación de la bacteria) barro esplénico.
Sangre incoagulable-oscura.
Tejido SC y cavidades serosas edema y liquido gelatinoso amarillento hemorrágico.
Corazón miocardio fláccido.
Intestino lesiones locales, enteritis hemorrágica.
Otros órganos congestión y degeneración.
Diagnóstico
1- Diagnóstico clínico
Forma aguda muerte súbita.
Bovinos hemorragia por aberturas naturales, hematuria, edemas, fiebre.
Equinos edema por heridas de arneses.
Cerdos edema faríngeo y cuello.
NO HACER NECROPSIA ya que diseminamos el agente.
2- Diagnóstico anatomopatológico
Ya muerto asciende su temperatura a 44-45°C por uso del glucógeno.
Rigidez cadavérica.
Miembro estirado, abalonamiento de abdomen, pezuñas divergentes, marcas de pedaleo en la tierra por convulsiones.
Salida de sangre por orificios naturales no coagulada.
3- Diagnóstico etiológico.
Muestras:
Muestras en cadáveres encontradas a campo.
A-Hisopado de secreciones
Puede ser medio de transporte Stuart o hacer una impronta con el hisopo en PO.
B- Hueso largo (metatarso)
Es una buena muestra que lo contiene, nutre y lo mantiene viable en su interior.
C- trozo de oreja
Se coloca en bolsa plástica para la pruebe de Ascoli-Valente
Muestras en caso que sea en ratones de laboratorio (donde se inoculo para aislarlo en pureza)
A- Frotis de sangre
B- Impronta de bazo secadas y acondicionadas
C- bazo y LFN
Bacteriologia
1- coloracion Gram
Muestra: Se observan bacilos G+ dispuestos en pares. Hay tinciones epeciales para visualizar capsula como M´Fadyean reaction donde visualizamos las capsulas teñidas de rosa y las bacterias de azul
Cultivo 1 (ver abajo): si se tiñe el crecimiento obtenido en el laboratorio en TSA se observan bacilos en cadenas con esporas centrales en forma de ¨caña de bambu¨.
2- Movilidad
En medios semisólidos, al ser inmóvil no hay turbidez
3- Aislamiento en cultivos
A-Aislamiento en medio solido (cultivo1)
 Medios básicosTSA 37°C/24hs en aerobiosis
Morfología: colonias grandes de borde irregular, elevadas, granular, blancas-grisaceas, borde irregular (¨cabellera de medusa¨)(cepa R)
B- repique del aislamiento anterior (cultivo 2)
Repico cultivo 1 en medio nuevo (TSA), la morfología de las colonias es distinta colonias chicas redonda (cepas S- sin capsula)
C- Repique del Cultivo 1 en TSA con CO2- Bicarbonato y suero
Desarrollan capsula (Cepa M). colonias de aspecto mucoide
D- Aislamiento en medio liquido
¨humo de cigarrillo¨. Capa esponjosa en la superficie que ppta dejando el medio límpido, cuando se agita asciende como humo.
4-Pruebas bioquímicas
A- Pd de catalasa +
B- Fermentacion de azucares +
C- Test de sensibilización a la penicilina
Transformación del bacillus, ¨collar de perlas¨
D- Tubo de gelatina
¨pino invertido¨
E- sensibilidad al fago gamma
5- Biologia molecular
PCR: con primer dirigidas a pXO1-2 plasmidicas ocontra secuencias genómicas
Rn Ascoli Valente
Rn de termoprecipitacion. Se busca el ag presente en tejidos. El antogeno es somatico (polisacárido)
Tratamiento del material: 1- triturar el órgano.2- hervir en agua esteril.3- filtrar. 4- el filtrado se enfrenta con suero con Ac anti Ag somatico.
Resultado: es positivo cuando se forma una interfase blanca de la rn ag-ac
Hay rns falsas positivas por reacción cruzadas con otros bacillus que poseen el mismo ag.
Diagnóstico experimental
Material remitido contaminado, se puede inocularlo para obtenerlo en pureza en:
A- Medio PLET
B- Raton, mediante escarificación en ventral de la cola
Material remitido NO contaminado:
Inoculacion intraperitoneal en ratones o SC en cobayos.
En ambos mueren en 24-72hs con hemorragias, edemas, septicemia. Bazo agrandado de tamaño, edema gelatinoso SC serohemorragico realizar impronata de bazo para OD al microscopio 
	Bovinos
Tristeza: hay hemoglobinuria y esplenomegalia pero sin alteración del parénquima. Hay buena coagulación sanguínea. Protozoo en frotis
Intoxicaciones: veneno de serpiente, edema local, pastos toxicos
Hemoglobinuria bacilar
Enterotoxemias
Leptospirosis
	Equinos
Piroplasmosis
Mal de caderas-tripanosomiasis
AIE: hay ictericia, edemas, anemia
Tratamiento
Penicilina y oxitetraciclina solo en estados muy tempranos.
Profilaxis
1) Higienicas
· No tener animales no vacunados en áreas endémicas.
· Animales muertos infectados deben ser incinerados, o enterrados con cal viva lejos de napas de agua.
· Materias primas con posibilidad de estar contaminadas (harina de hueso, sangre, carne) deben ser sometidas a131°C 2 hs. Piensos esterilizados por vapor
· No permitir el ingreso de animales carroñeros. Control de artrópodos hematófagos.
· Personal debe vestir ropa adecuada, con botas de goma. Debe haber recipiente para lavarse loas botas cuando se ingresa a una granja afectada con liquido con esporicida.
· Lugares que estuvieron contaminados fumigar con esporicida (formol 5%), dejar actuar 10 hs y luego lavado final 
2) Medica
· Inmunizacion activa a partir de los 3 meses de edad. Revacunación anual cuando comienza la primavera via SC.
Cepa Sterne esporovacuna. Es avirulenta y acapsulada (bacillus antrhacis cultivada con altas concentración de CO2). 
Cepa Pasteur vacuna viva atenuada (cultivada a 42°C) pero hay posibilidad de reversión.
Salud publica
En humano es enfermedad de oficio
Tiene 4 presentaciones:
· Cutánea: rural, portuaria y laboratorista
· Pulmonar: industrial
· Intestinal: alimentaria
· Meningea o nerviosa
En ARGENTINA es endémica. Obligatoria su denuncia (SENASA).
Menejos en brotes: antibióticos y vacunación a los animales suceptibles y la inmovilización de los animales de la zona 15 dias después del ultimo caso y 15 dias después de que todo el ganado haya sido vacunado.
Clostridiosis
Enfermedades toxoinfecciosas, febriles, gangrenosas o septicémicas de curso agudo-sobreagudo causado por Clostridium
Etiologia
Clostridium spp
Bacilos G+ que producen esporas (generalmente subterminales) deformantes o no deformantes.
La gran mayoría móviles menos perfrigens por flagelos peritricos.
Producen toxinas y enzimas que generan las lesiones
Según su acción se puede clasificar en 
A- Invasivas: ejercen su acción por sus Tx (Cl. Tetani y botulinum)
B- No invasiva: se desarrolla su patogenia po efecto directo de los mo y sus toxinas (resto de Clostridium).
	Especie
	Morfologia
	Entrada
	Sitio de Pd de Toxina
	Sitio de acción de Toxina
	Cl. Botulinum
	Móvil- ESTD
	Oral
	Fuera del huésped
	SN
	Cl. Tetani
	Móvil- ETD
	Herida
	Herida
	SN
	Cl. Chauvei
	Móvil- ESTND
	Oral/herida
	Masa muscular prof.
	Musculo
	Cl. Perfringens
	No móvil. ESTND
	Oral/herida
	Intestino/musculo
	ID/musculo
	Cl. Septicum
	Móvil. ESTD
	Herida
	Herida
	Musculo
	Cl. Haemolyticum
	Movil. ESTND
	Oral
	Riñon
	Riñon/SN
	Cl. Novyi
	Movil. ESTND
	Herida
	SC/musculo
	SC/musculo
	Cl. Sordelli
	Movil. ESTND
	Oral/herida
	Intestino/tejidos
	ID/tj
ESTD: espora subterminal deformante
ESTND: espora subterminal no deformane
ETD: espora terminal deformante
	Invasivas
	Clostridiosis histotoxicas
	Carbunclo sintomático
	Rumiantes
	Cl. Chauvei
	
	
	Gangrenas
	Rumiantes
	Cl. Septicum/chauvei/ perfrigens tipo A/ hystolitycum/ sordelli/ novyi A
	
	
	Hemoglobinuria bacilar
	Bovinos
	Cl. Novyi D
	
	
	Hepatitis infecciosa necrosante
	Ovinos
	Cl. Novyi B
	
	Cl. Enterotoxicas
	Enterotoxemias
	Todas
	Cl. Perfringens
	No invasivas
	Cl. neurotoxicas
	Botulismo
	Todas
	Cl. Botulinum
	
	
	Tetanos
	todas
	Cl. tetani
Clostridiosis histotoxicas
1- carbunclo sintomático (Mancha o pierna negra)
Etiología
Cl. Cauvei
Residente habitual del TGI de los herbívoros (rumiantes). Fermenta los hidratos de carbono con producion de gas y acidos
Toxinas:
1- Toxina α fosfolipasa. oxigeno estable hemolisina, necrotizante 
2- Toxina β ADNasa
3- Toxina Ύ Hialuronidasa
4- Toxina δ Hemolisina oxigeno-débil (en agar sangre leve halo de hemolisis)
Patogenia
Ingestión de esporas (la mayoría se elimina en las heces) penetracionde la mucosa transporte de las esporas por fagocitos al musculo donde acantonan herida en musculo disminuye el potencial redox (anaerobiosis) germinación y producción de toxinas que generan las lesiones.
Signos clínicos
PI: 1-3 dias
Los animales están afiebrados, anoréxicos, apáticos. Presentan claudicaciones.
Tumefaccion deformante en el lugar donde germinaron y pd las Txs, se encuentra caliente, dolorosa y crepitante. Luego se torna fría e indolora. La piel seca, ganglio regional infartado. A los 2-4 dias dificultad respiratoria con taquipnea, pulso débil. Finalmente disminuye la temperatura y muere.
Lesiones
SC edema gelatinoso
Musculos oscuros, sin brillo, fibras separadas y exudado sanguinolento espumoso, separación de las fibras, olor butírico rancio.
Corazon petequias en endocardio y epicardio. Derrame serosanguinoliento en pericardio
Hígado y riñon lesiones necróticas
Cavidad pleural y peritoneal infiltración serohemorragica, pleuritis.
Diagnostico
Diagnóstico clínico
· Edad del animal 2 meses a 2 años
· Fiebre
· Tumoración grande en masas musculares
· Claudicación
Diagnostico etiológico
Muestra:
· Trozo de músculo afectado en frio. Impronta o mtra directa en bolsa
· Edema gelatinoso hemorrágico. Tomado con hisopo en medio de transporte
· Hígado y riñón con puntos de necrosis en frio
1- Observacion directa
Tinción gram bacilos G+ en cadenas cortas. Tamaño de 8 µm. muestra: impronta por ejemplo
2- cultivos
Medios solidos: 
Agar sangre o chocolate en condiciones anaerobias 37°C-24hs. Se observan colonias de 1-1,5mm, redondas crateriformes gris mate.
Medios liquidos: 
A- Caldo Tarozzi: caldo con trozos de carne que generan anaerobiosis y aporta nutrientes.
B- Caldo tiogliconato: crecimiento en el fondo del tubo
3- Pruebas bioquímicas
A partir de los cultivos. Los mas utilizados: ureasa, fermentación de azucares, siembra en agar yema de huevo (detecta lecitinasas), catalasa (negativo- diferencia con Ba)
4- IFD
Método rápido usando improntas.
Diagnostico experimental
Se usa ratones blancos de 30 grs o cobayos línea albina 300 grs.
Protocolo: triturar la muestra con sc de cloruro de calcio10% inocular 0,1ml de la suspensión IM muerte 18-36 hs
Necropsia: edema subcutáneo, musculo rojo oscuro, infiltración serohemorragica, ganglio satélite infartado, lesión en pericardio.
Diagnostico toxicológico
A- Seroneutralizacion
Muestra + antisueros antitoxinas en tubo de ensayo inoculación en animales
Si hay muerte es otro clostridium u otro agente. Si no muere podemos estimar que el antisuero bloqueo las toxinas por lo que no muere.
Revelado: animales o cultivos celulares
B- Seroproteccion
1ro se inocula en animal antisuero antitoxinas. 2do se inocula la muestra sospechosa. Si no muere era el agente que sospechábamos ya que los ac bloquearon las txs.
Diagnóstico diferencial
· Absceso no dan signos generales
· Edema maligno y gangrena gaseosa: afecta animales de cualquier edad y el tejido mas afectado es el SC
Tratamiento
1- general: 
· Suero anti toxinasCl. Chauvei. SC
· Penicilina benzantinica. IM
2- local: abrir la herida para que se oxigene y desinfectar
Profilaxis
Vacuna multivalente inactivada: contiene el antígeno bacteriano y sus toxinas. Se vacuna a partir de los 3 meses de edad. 2 dosis con intervalo de 21 dias. Revacunación anual.
Gangrena maligna o edema maligno
Etiología
Lesiones producidas por Cl. Septicum asociada con otros clostridiums
Cl. Septicum
1- Toxina α fosfolipasa. oxigeno estable hemolisina, necrotizante 
2- Toxina β ADNasa
3- Toxina Ύ Hialuronidasa
4- Toxina δ Hemolisina oxigeno-débil
Asociacion con: Cl. Novyi tipo A- Cl. Perfrigens tipo A- Cl. Sordelli- Cl. Histolyticum- Cl. Chauvei.
Epidemiologia
Son residentes del TGI y además son telúricos en su forma de resistencia las esporas.
Puerta de entrada: heridas en la piel (mordidas, esquila, ordeñe, parto) o en la mucosa digestiva o genital
Suelen estar acompañadas con contaminación con otras bacterias aerobias como E. coli que facilitan también el consumo de oxigeno en la herida.
Gangrena maligna o edema maligno: producto de la combinación de septicum con otros clostridiums
Braxy: es una abomasitis en ovejas producida solo por Cl. Septicum. Se produce tras la ingestión de tuberculos congelados que producen una lesión en el abomaso con la consiguiente germinación de las esporas y pd de toxinas que lesionan la mucosa. La muerte es inminente. No se da en la Argentina.
Patogenia
Herida en piel o mucosa + implantación de las esporas se genera condiciones de anaerobiosis, germinación y pd de toxinas lesión SC y luego de los musculos.
La toxina destruye los leucocitos. Una vez establecida la infección se proyecta longitudinalmente por la fascia muscular desarmando las fibras con ayuda del gas producido (fermentación) 
Signos clínicos
Edemas calientes y dolorosos, luego frias e indoloras.
Decaimiento, fiebre, anorexia.
Taquipnea y cianosis muerte.
Lesiones
Subcutaneo: edema gelatinosos hemorrágico
Musculo: color rojo oscuro, olor pútrido
Utero: edemas, masa pastosa oscura, es muy rara su aparición.
LFN: infartados
Sangre: oscura cuagulada, color debido a destrucción de eritrocitos.
Abomaso: necrótico edematoso en Braxy.
Diagnostico
Diagnostico clínico
Animales con heridas expuestas y los signos nombrados antes.
Diagnostico etiológico
Muestra
Edema serohemorragico en frio
Ganglios regionales en frio
Trozo de tejidos con lesiones en frio
1- observación directa:
Tinción gram: bacilos G+
2- cultivos
En medios solidos
· Cl. Septicum: colonias de 4-8 mm gris, parte central elevada y ramificaciones periféricas
· Cl. Novyi: colonias de 3-8mm redondas o elipsoidal borde irregular, gris azulada.
· Cl. Perfringens: colonias 2-3 mm redondas globosas borde entero y brillante
Diagnostico experimental y toxicológico
Igual que en mancha
 Tratamiento
Ídem mancha
Profilaxis
Vacunación a partir de los 3 meses. 2 dosis con intervalo de 21 dias. Revacunación anual. Vacuna inactivada multivalente contra muchos tipos de clostridiums
Limpieza de heridas, uso de materiales esteriles o desinfectados. Antisepsia de heridas.
Enfermedades causadas por clostridium novyi
	Especie
	enfermedad
	Toxina α
	Toxina β
	Cl novyi tipo A
	Cabeza grande
	+
	+
	Cl. Novyi tipo B
	Hepatitis infecciosa necrosante
	+
	-
	Cl novyi tipo C
	Osteomielitis del bufalo
	-
	-
	Cl novyi tipo D (Cl haemolyticum)
	Haemoglobinuria bacilar
	-
	+++
Toxina alfa: citotoxina, necrotizante y letal
Toxina beta: necrotizante, hemolítica, letal, hemolisina
Cabeza grande
Se produce en ovinos jóvenes machos durante la época de celo, los machos suelen topetearse provocando heridas.
Lesiones: infiltración gelatinosa, no gaseosa del tejido de la cabeza, cuello y pecho.
Hepatitis necrozante infecciosa o enfermedad negra
Epidemiologia
Especies afectadas: primordialmente ovino, rara en bovinos
Via de transmisión son los pastos y aguas contaminadas
Puerta de entrada: oral
En zonas endémicas suelen ser habitantes del TGI.
Patogenia:
Ingestión de esporas ID transporte por Mo a diferentes órganos migración de la fasciola hepática produce anaerobiosis y la germinación de las esporas pd de toxinas.
Anaerobiosis en hígado también es debido a: enfermedades metabólicas, degeneración hepática por cebamiento.
Signos clínicos
Inespecíficos, trastornos de movimiento, decaimiento, anorexia, rechinar de dientes, respiración dificultosa, muerte.
Lesiones
SC: en cuello, abdomen e inguinal se ve oscuro. Edema gelatinoso negruzco sanguinolento
Hígado: focos necróticos blanquecinos.
Diagnostico
Ídem enfermedades antes vistas.
Diagnostico diferencial
· Necrobacilosis de los ovinos o hepatitis nodular infecciosa fusobacterium necrophorum. Bacilo G- 
· Hepatitis piemica de los ovinos yersinia pseudotuberculosis. Bacilo G-
Tratamiento y profilaxis.
Dado el curso sobreagudo de la enfermedad no se puede instaurar ningún tratamiento
Vacunación con bacterinas.
Desparacitaciones frecuentes.
Hemoglobinuria bacilar
Epidemiologia/ patogenia
Enfermedad de curso agudo que afecta mas a los bovinos.
Patogenia es igual al anterior
Signos y síntomas
· Fiebre e inapetencia
· Respiración brusca y dolorosa
· Posición antialgica
· Heces sanguinolentas
· Hemoglobinuria (orina marron)
· Anemia e ictericia
· Hipoxia y muerte
Lesiones
Hígado: necrosis centrolobulillar por isquemia (trombos y embolos)
Sangre: anemia, petequias en serosa, derrames sanguinolentas en cavidades, sangre hemolisada en cavidades, ictericia, hemosiderosis
Riñon: oscuro por hemoglobinuria
Diagnostico
Diagnostico clínico/necropsia
Principalmente la orina con sangre. Los animales muertos otorgan importante información.
Diagnostico etiológico
Muestra
· Hígado: trozo de la porción necrótica
· Sangre: en frio para hemocultivo
Aislamiento en agar sangre produce beta hemolisis, también mismos ensayos antes nombrados. IFD también es útil.
Diagnostico experimental.
Inoculación en conejos en vena marginal de la oreja muerte sobreaguda, presenta cistitis y hemoglobinuria
Diagnostico diferencial
	1- hepatitis infecciosa necrotizante: por síntomas
2- intoxicación alimentara: anamnesis- cultivo negativo
3- carbunclo bacteridiano: hay hematuria NO hemoglobinuria. No hay ictericia ni anemia
4- cistitis: no anemia ni ictericia
	5- Leptospirosis: positivo serología
6- anaplasmosis: se ve parasito en frotis
7- pielonefritis crónica en bovinos: corynebacterium bovis, hematuria, entrada por via ascendente.
Tratamiento y profilaxis
Ídem enfermedad negra
Clostridiosis enterotoxicas
Enterotoxemias
Enfermedad toxoinfecciosa de curso agudo/sobreagudo causado por Cl. Perfringens.
Generan signos digestivos y nerviosos.
Son habitantes normales del TGI que debido a la aparición de una cepa toxigenica junto a la multiplicación excesiva del mismo determina la aparición de la enfermedad.
Etiología/epidemiologia/patogenia
	Especie
	Enfermedad
	Cl perfringens tipo A
	Enterotoxemia en vacas postparto
Gangrena infecciosa en ovino y bovino (ya visto)
Enteritis necrótica en pollos
	Cl perfringens tipo B
	Disentería de los corderitos
Enterotoxemia en potrillos
	Cl perfringens tipo C
	Struck
Enterotoxemia de corderos y terneros (EEUU)
Enteritis necrosante de los lechones lactantes
	Cl perfringens tipo D
	Enterotoxemias en Rumiantes y hombre
Enfermedad del riñon pulposo
Disenteria de los corderitos
No esta presente en el país (africa y europa). Afecta a los animales recién nacidos que son muy sensibles a la toxina beta que en general es sensible a la tripsina, pero en ausencia de ella (debida que el calostro tiene un inhibidor de tripsina para la absorción de macromoléculas de Inmunoglobulinas en ID) en los animales recién nacidos genera el cuadro, sumado a que no esta establecida la flora normal del ID. El cuadro es sobreagudo/agudo mortal, con diarrea fétida, amarillenta y con estrías de sangre.
Struck
No esta presente en nuestro país. Ocurre en ovinos adultos. Es aguda y mortal. Clínicamente el animal esta apático, con cólicos agudos, malestar, se cocean el vientre y hay diarrea hemorrágica. Lesiones: enteritis y peritonitis hemorrágicay necrótica. La toxina beta esta involucrada
Enteritis necrosante en lechones lactantes
Distribución mundial. Mortalidad del 80%. Curso sobreagudo. La toxina beta involucrada en las lesiones endoteliales. Signos de animales con diarrea hemorrágica. Las porciones afectadas son las distales del TGI. Enterocolitis necrotizante, fluido serosanguinolento en pleura y peritoneo
Enteritis necróticas en pollos
Enfermedad causada por cl perfringens tipo A y C. afecta primordialmente pollos parrilleros de 12 semanas de edad. Se produce por cambios bruscos de la dieta o por coinfeccion con eimeria spp produciendo hipotonía intestinal (ID) con proliferación de la bacteria y su producción de toxinas. Las aves están decaídas, no comen bajan los índices de conversión, heces oscuras con sangre. Lesiones: enteritis necrótica con placas diftéricas, lesiones hepáticas con focos necróticos en la superficie.
Enfermedad del riñon pulposo
Afecta a ovinos principalmente y bovinos. Distribución mundial, la mas frecuente en nuestro pais. Morbilidad del 15% y mortalidad del 95%. La enfermedad se produce por sobrecarga alimenticia o por cambio brusco en la dieta rica en proteínas e hidratos de carbono, esto genera una disbacteriosis con disminución de fermentos digestivos, se acumulan los hidratos y proteínas sin digerir produciendo hipotonía del canal digestivo, alcalosis, favoreciendo la multiplicación del clostridium y la producción de sus toxinas particularmente la épsilon. Estas modifican la permeabilidad de la mucosa y se absorben produciendo toxemia.
La enfermedad se produce principalmente en primavera donde los pastos son mas tiernos jugosos y lujuriosos (sustancias del pasto disminuían la motilidad intestinal), pero el factor limitante es la presencia de almidon en el intestino, sustrato necesario para la proliferación de la bacteria llegando a concentraciones de 109 germenes /gramo 
Los signos y diagnosticos lo basaremos en esta enfermedad.
Signos clínicos
Animales muesrtos que fallecen durante la noche, generalmente los mejores alimentados. Mayormente en otoño-invierno.
Hay dos formas clínicas:
	Comatosa
Decaimiento
Anorexia
Diarrea
Hipotermia
Glucosuria
Espuma por fosas nasales
Bioquímica sanguínea: anhidremia, aumenta concentración de Hb, glucosa hemática, aumento de NNP y cloruro en plasma
	Convulsiva
Salivación
Opistotono
Incordinacion de los movimientos
Envisten objetos firmes
Dan vuelta en círculos
Convulsiones
Diarrea, fiebre, temblores, rechina dientes, mov de cola, patas (bovinos)
Lesiones
Intestinos edematizacion hemorrágica, inflamación catarral hemorrágica con presencia de gas
Riñones zona cortical blanda color castaño, la ovina es rojiza de aspecto turbio.
LFN mesentérico infartado hemorrágico
Corazon petequias, en endo y epicardio
SNC en la forma nerviosa encefalomalacia
En aberturas naturales se observa liquido espumoso viscoso mal oliente.
Diagnostico
Primero una buena anamnesis, observación clínica y necropsia
Muestra
· Contenido intestinal 10ml+ cloroformo I gota
· Contenido intestinal a pH6 refrigerado
· Trozo de intestino con contenido atado por los extremos
· Trozo de riñon en formol 10% para histopatología
· Orina en frio para detectar glucosa
· LFN mesentérico
Toxinas de Cl perfringens
	Agente
	Toxina α
	Toxina β
	Toxina ε
	Toxina I
	Cl. P tipo A
	+
	
	
	
	Cl. P tipo B
	+
	+
	+
	
	Cl.P tipo C
	+
	+
	
	
	Cl. P tipo D
	+
	
	+
	
	Cl. P tipo E
	+
	
	
	+
Toxina alfa fosfolipasa, hemolítica, necrotizante, digiere la lecitina
Toxina beta letal necrotizante
Toxina épsilon aumenta la permeabilidad intestinal y capilar, letal. Es una protoxina que requiere activarse por enzimas proteolíticas.
Toxina iota dermonecrotica, letal
Protocolo
1- muestra de intestino, pesar un gramo de muestra con 1oo ml de agua esteril homogeinizar
Tomar muestra para:
Observacion directa tinción gram
Cultivo en agar sangre, se observa los halos de hemolisis que produce
Conteo en placa se realiza diluciones en base 10 y se plaquea cada dilución concentraciones > 106 UFC/ml es indicativo de que la causa es clostridiosis, si es menor es dudoso recordemos que es un habitante de la mucosa intestinal también.
2- se filtra por membrana la suspensión separando las porciones groseras. La fase liquida se usa para diagnostico experimental y toxicológico
 Se preparan 5 tubos con un cierto volumen de muestra incognita, a cada uno se agrega antisuero antitoxinas, se dejan interactuar por una hora y luego se inocula en
Ratones EV (coccígea)
Cobayo test dermonecrotico, intradérmica en flanco ver si hay necrosis
Ejemplo
Tubo1- mtra + antisuero anti toxina alfa
Tubo 2- mtra + antisuero anti toxina beta
Tubo3- mtra+ antisuero anti toxina épsilon
Tubo 4- mtra+ antisuero anti iota
Luego de la inoculación todos murieron menos el del tubo 3 podemos decir que el antisuero bloqueo a la toxina por lo que confirmamos clostridium tipo D
Diagnóstico diferencial
1- otras enterotoxemias: identificación de tx
2- toxemia de oveja mellicera: degeneración hepática. Acetonemia o cetosis de preñez
3- carbunclo bacteridiano: incoagulabilidad sanguínea. No glucosuria
4- intoxicación alimenticea: no hay toxinas
5- listeriosis: cocobacilo G+ no hay toxinas y el riñon esta normal.
Profilaxis
· No hacer cambios bruscos en la alimentación
· Vacunación con toxoides 15 dias antes de movilizaros. Revacunación anual.
· Desparasitaciones las tenias pueden colaborar con la patología
Tratamiento
No se realiza gralmente por el curso de la enfermedad, si se detecta, terapia con antisuero y antibióticos.
Clostridiosis neurotóxicas
Tetanos
Definicion
Enfermedad toxoinfecciosa de curso agudo, telúrica, producto de la contaminación de heridas con clostridium tetani y se caracteriza con la contracción tónica de los musculos estriados y hemoglobinuria sin perdida de conocimiento.
Etiología
Clostridium tetani
Bacilo G+ móvil, forma espora terminal ¨palillo de tambor¨. Si bien es telúrico también es habitante del TGI de animales.
Difícil destrucción. La tintura de yodo lo destruye en 10 minutos.
Epidemiologia
Especies afectadas: equino>ovino>porcino>bovino>caninos. Aves resistentes.
Es una enfermedad frecuente en el noroeste de Bs As
Equinos: ocurre por heridas en pie (clavos) o cirugías sin asepsia.
Bovinos: partos distócicos
Caninos y felinos: agujas mal esterilizadas, época de irrupción dentaria
La gravedad es inversamente proporcional al PI 
El periodo de evolución es variable: 2-3 dias en casos graves, 15 dias en los que se curan gralmente
Patogenia
Herida e implantación de la bacteria en capas profundas condiciones anaerobias producto de la necrosis y desarrollo de bacterias facultativas que consumen el oxigeno permite la geminación del clostridium producción de sus toxinas:
A- Toxina hemolítica o tetanolisina
Hemolisina, fugaz y labil. Leucotoxica y antifagocitica. Genera anemia, hemoglobinuria y leucopenia.
B- toxina tetánica o tetanopasmina
Proteasa. Neurotóxica. Termolábil. Actua sobre las células nerviosas del SNC, ME y SNP en uniones mioneurales. La muerte se produce por la paralisis espástica afectando la función respiratoria (paralisis de musculos y centro respiratorio).
La tetanopasmina es una proteína binaria unidas entre si por puente disulfuro, la cadenaliviana es la toxina y la cadena pesada es de unión a receptor gangliosidos de las neuronas permitiendo la endocitosis de la toxina. Esta viaja por flujo axonal retrogado. Dentro de la vesicula endocitica, la reducción de pH genera un cambio conformacional de la cadena liviana activando su acción endopeptidasa todo esto dentro de las neuronas inhibitorias inhibiendo la transmisión presinaptica por hidrolisis de las sinaptobrevinas (proteína de las vesículas que tienen los neurotransmisores inhibitorios). Al no poder la neurona inhibitoria regular a la neurona excitadora de las neuronas motoras se produce la contracción tetánica por liberación continua de neurotransmisores que estimulan la contracción.
Signos clínicos
	Hiperextensión del miembro lastimado (tétano local)
Tetanos general
Hiperreflexia
xifosisExpone el 3er parpado
Ollar dilatado, orejas erectas
Contracción del musculo risorio ¨risa sardomica¨
(fascie tetánica)
	Envaramiento (extremidades rigidas extendidas)
Contracción del m abdominal, cuello (cuello de cisne), cola ergida. ¨postura de caballo de madera¨
Taquipnea, no come, no puede beber agua, constipación, no orina
Sudoración, cianosis de mucosa
Queda en decúbito lateral y muere por para cardiorespiratorio
Lesiones
Casi no hay. Musculatura oscura/marron rojiza. Sangre oscura, espesa. SNC con edema y congestion.
Diagnostico
Diagnóstico clínico
Herida+ síntomas. (a veces la herida es interna OJO)
Diagnostico etiológico
No hace falta por que los signos son evidentes, pero de hacerse se puede hacer tinción gram de la herida viendo la forma particular de este clostridium y cultivo en agar sangre se veria la hemolisis que genera.
Diagnóstico diferencial
· Eclampsia: hipocalcemia durante la preñez o la lactancia. Común en perras de raza chica, que amamantan muchos cachorros. Es de aparición brusca se ve tambaleo, temblores, contracción muscular, jadeo y salivación. En bovinos y ovinos suele ocurrir también.
· Epilepsia: por parasitosis en cachorros, o forma nerviosa de la enfermedad de carre. Convulsión de todo el cuerpo, salivación, eliminación involuntaria de orina y materia fecal, perdida de conciencia, dura minutos y se recupera normalmente.
· Intoxicación con estricnina: en caninos. Tónico nervioso.
Pronostico: reservado a grave
Tratamiento
Primero se instaura un tratamiento medico local y luego uno general
1- tratamiento local
Ubicar la herida, toilette de la misma, eliminar tejido necrótico, reavivar la herida. Producir aerobiosis agregando agua oxigenada o KMnO4 
2- Tratamiento general
· Especifico: suero antitetánico eq: 100-200 a 500000 UI, lanares: 20-50000 UI caninos: 10-20000 UI
· Etiológico: Penicilina, ampicilina
· Sintomatico: colocar en box oscuro, tranquilo, sin estimulos externos, sobre cama mullida. Alimentar por sonda, Administrar soluciones glucosadas y bicarbonatadas por via venosa por la acidosis. Evacuación manual de heces, sondaje para eliminar orina o cistocentesis. Uso de tranquilizantes o depresores del SNC como hidrato de cloral.
Profilaxis
Vacuna antitetánica toxoide (toxina inactivada por calor)
Equino: 1ra dosis: 6 meses 2da dosis: 15 dias 3ra dosis: 2 meses revacunación anual
Ante una herida: administrar antisuero y vacuna
Botulismo
Causada por la toxina preformada de clostridium botulinum que se encuentra en la ingesta de los alimentos. Afecta bovinos, equinos, caninos, aves y ovinos, y se caracteriza por una paralisis muscular flácida progresiva, incordinacion, terminando en muerte por paro respiratorio.
Etiologia
Clostridium botulinum 
Bacilo G+ espora deformante subterminal.
Existen varios serotipos (A-B-C-D-E-F-G)
Humanos: A-B-E-F-G (en argentina)
Bovinos-ovinos: C-D
Equinos: C-D-A-B
Aves: A-B-C
Epidemiologia
Es endémica de la mesopotamia(Mal de aguapey)debido a la deficiencia de fosforo y la ingesta y lamido de restos oseos por los rumiantes (pica) donde desarrollan la toxina.
Es telúrica esta en el suelo, fondos de lagos y ríos. También en intestinos de mamíferos, aves y peces
La transmisión es por alimentos contaminados por lo que la via digestiva es la entrada.
Patogenia
La ingesta de la toxina es activada por las proteasas que luego es absorbida a nivel intestinal presentando tropismo nervioso. La forma de acción esta mediada primero por ingresar a la neurona motora presinaptica de la placa motora por via endocitica, el bajo pH activa su forma activa destruyendo las sinaptobrevinas y las proteínas llamadas SNARE impidiendo la liberación de acetilcolina, ergo no hay contracción muscular.
Signos clínicos
Va con el curso de los días
Incordinacion tren posterior
Animal en decúbito esternal, no come ni bebe.
Indiferencia al medio, perdida de reflejos. Muerte (paralisis de musculos respiratorios).
Diagnostico
· Historia clínica del lugar
· Demostración de la presencia de la bacteria o toxina en órganos o intestino mediante inoculación en ratones. 
· Toxinotipia mediante PCR o ELISA
· Estudios epidemiológicos: evaluación en alimentos y tipificación de clostridium botulinum.
Tratamiento
Inespecífico de sostén. Suministrar agua y alimentos en casos leves.
Suero antibotulinico para el que todavía no se unio a la placa neuromotora.
Profilaxis
Vacunación toxoides inactivados
Eliminación de cadáveres para evitar la pica
Suplementar con fosforo
Otros clostridios no comunes
Cl difficile reportados en perros causante de diarrea crónica y en potrillos que genera una enterocolitis hemorrágica. Produce dos toxinas alfa (enterotoxina) y beta (citotóxica). La patogenia no es clara aun.
Cl. Colinum afecta muchas aves entre ella pollos causando ulceras en el intestino delgado y necrosis hepática. Mortalidad de 100%. Los ATB en el agua disminuyen la incidencia.
Enteritis necrótica: causada por clostridium colinum, afecta a aves de todas las edades. Dentro de los síntomas las aves están inquietas con las plumas desorganizadas y diarrea liquida blanquecina, adopta una postura encogida. Esta muy asociada a una coinfeccion con coccidios agravando el cuadro (en estos casos puede haber diarrea hemorrágica). Transmisión por medios de excretas de aves enfermas o portadoras a aves sanas. Drogas utilizadas: bacitracina o penicilina