2 Diagnostico serologico de Brucelosis Bovina

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Diagnóstico 
serológico de 
Brucelosis Bovina. 
Vet. Alejandro N. Etchecopaz 
 Cátedra de Enfermedades Infecciosas de la UBA 
 ISSN 2469-2123
Figura tomada del “Manual de Brucelosis SENASA 2009” 
PRUEBA DE SCREENING CON ANTIGENO 
TAMPONADO EN PLACA (BPA) 
MATERIALES: 
●Micropipeta 10-100 µl 
●Tips 
●Aglutinoscopio 
●Mezcladores de alambre o plástico 
●Antígeno BPA 
►Suero control + 
►Suero control – 
►Sueros problema 
 
PROCEDIMIENTO: 
1- Colocar 80 µl de suero problema sobre la placa de vidrio. 
2- Colocar 30 µl de antígeno BPA cerca de la gota de suero. 
3- Mezclar ambas 
gotas con movimientos 
circulares de 
3cm de diámetro 
aproximado. 
4- Una vez mezclados 
todos los sueros se 
agita suavemente la 
placa con movimientos 
ondeantes. 
5-Esperar 4 minutos. 
6-Volver a agitar la placa. 
7-Esperar 4 minutos. 
SUERO POSITIVO SUERO NEGATIVO 
8- Realizar lectura. 
PRUEBAS CONFIRMATORIAS DE 
SEROAGLUTINACIÓN 
LENTA EN TUBO (SAT Y 2-ME) 
MATERIALES: 
● Micropipetas 10-100 µl 
● Gradillas 
● Tubos de serología (8 por suero) 
● Caja de lectura o aglutinoscopio 
● Antígeno Wright 
● Solucion 2 ME 
● Solucion Salina Fenolada (SSF) 
►Jeringa o pipeta de 1ml 
►Suero + a BPA 
►Suero control + 
►Suero control - 
SSF 
PROCEDIMIENTO: 
1.Colocar en una gradilla 
dos filas de 4 tubos para 
cada suero en estudio. 
2.Rotular la primer fila con 
“SAT”. 
3.Rotular la segunda fila 
con “2ME”. 
SAT 
SAT 
SAT 
2ME 
2ME 
2ME 
4- Para la fila SAT: 
 Colocar 80 µl 
de suero en el tubo 1. 
 40 ul en el tubo 2. 
 20 ul en el tubo 3. 
 10 ul en el tubo 4. 
 
80 µl 20 µl 40 µl 10 µl 
SAT SAT SAT SAT 
5- Repetir el punto 4 en los 
tubos de la fila 2ME. 
 2ME 2ME 2ME 2ME 
80 µl 20 µl 40 µl 10 µl 
6- Agregar 1 ml de SSF a los 4 tubos de la fila SAT. 
1ml 1ml 1ml 1ml 
SAT SAT SAT SAT 
Suero problema 
SSF 
7- Agregar 1 ml de solución de 2-Mercaptoetanol 
a los 4 tubos de la fila 2ME 
1ml 1ml 1ml 1ml 
2ME 2ME 2ME 2ME 
Suero problema 
2-ME 
8- Mezclar bien agitando la gradilla y dejar 
reposar 60 minutos a temperatura ambiente. 
9- Agregar 1 ml de antígeno de Wrigth diluido al 2% 
(en solución salina fisiológica), en TODOS los tubos de 
ambas filas. 
1ml 1ml 1ml 1ml 
SAT SAT SAT SAT 
Suero problema 
SSF 
1ml 1ml 1ml 1ml 
 2ME 2ME 2ME 2ME 
Suero problema 
2-ME 
10- Mezclar bien agitando la gradilla. 
11- Incubar a 37 °C por 48 horas. 
12- Realizar la lectura. 
NEGATIVO 
AGLUTINACIÓN 
INCOMPLETA 
AGLUTINACIÓN 
COMPLETA 
13- Interpretación de resultados. 
Resumen conceptual 
Bases Fundamentales 
Figura tomada de curso presencial dictado por SENASA 
•Vacunación obligatoria solo al 100% de las terneras de 3 a 8 meses de edad, con una 
sola dosis de Vacuna atenuada Brucella abortus Cepa 19. 
•Sangrado y realización de las pruebas serológicas a hembras a partir de los 18 meses 
de edad y machos a partir de los 6 meses de edad. 
Bibliografía: 
• Manual de diagnóstico serológico de la 
Brucelosis Bovina 2009. SENASA 
• www.senasa.gov.ar 
• http://www.senasa.gov.ar/contenido.php?t
o=n&in=857&io=20833 
 
http://www.senasa.gov.ar/
http://www.senasa.gov.ar/contenido.php?to=n&in=857&io=20833
http://www.senasa.gov.ar/contenido.php?to=n&in=857&io=20833