Diagnostico de clostridiosis

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Diagnóstico de 
Clostridium spp
ISSN 2469-2123
C. tetani
C. botulinum
No invasores, infecciones específicas
Diagnóstico clínico
C. difficile
C. perfringens
Productores de diarrea
Gangrena
C. perfringens
C. Chauvoei
otros clostridios
Descriptas alrededor de 150 especies
Clostrium spp.
Carbunclo sintomático 
(Mancha)
Bovinos
Ovinos
Cl. chauvoei
Gangrenas Bovinos
Ovinos
Cl. septicum
Cl. chauvoei
Cl. perfringes A
Cl. histolyticum
Cl. sordelli
Cl. novyi A
Hemoglobinuria bacilar Bovinos Cl. novyi D
Hepatitis infecciosa 
necrosante
Ovinos Cl. novyi B
DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES 
CLOSTRIDIALES 
Observación
directa
Cultivo
Coloración
Bioseguridad
RUTA BACTERIOLOGICA
Protocolo
Aislamiento
Identificación
IFD
Coloración
Muestra
•Pruebas bioquímicas, kits comerciales, 
•Técnicas moleculares, 
•Inoculación de animales de experimentación
Identificación de 
toxinotipo
•SERONEUTRALIZACIÓN
•ELISA 
•Técnicas moleculares, 
MUESTRA
Músculo, tejido subcutáneo, hígado
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OBSERVACION DIRECTA
Bacilos Gram positivos, presencia de esporas
• IFD
• Tinción de Gram
Los medios de cultivo deben prepararse en el 
momento para evitar la oxigenación por el 
almacenamiento
CULTIVO
Agar sangre
Caldo Tarozzi, Tioglicolato
Agar sangre
Caldo Tarozzi
Jarra de anaerobiosis
CULTIVO
Bacilos Gram positivos. Microscopio óptico 100X
PCR
IDENTIFICACIÓN
Pruebas bioquímicas
Kits comerciales
Inoculación en animales de experimentacion
ELISA
Métodos moleculares
SERONEUTRALIZACION (en cultivo celular o 
animal de experimentación) 
Toxinotipos de Clostridium perfringens
IDENTIFICACIÓN DE TOXINOTIPO
Diagnóstico de Clostridios
productores de diarrea
C. perfringens
C. difficile
Muestra
Observación
directa
Cultivo
Coloración
Bioseguridad
RUTA BACTERIOLOGICA
Protocolo
Aislamiento
Identificación
Detección de toxinas: test 
de ELISA/ cromatográficos
•SERONEUTRALIZACIÓN
•ELISA 
•Técnicas moleculares, 
•Pruebas bioquímicas, kits comerciales, 
•Técnicas moleculares, 
•Inoculación de animales de experimentación
Identificación de 
toxinotipo
MUESTRA
Tejido intestinal, contenido intestinal, materia fecal
OBSERVACION DIRECTA
Bacilos Gram positivos, presencia de esporas
Tener en cuenta que C perfringens es habitante normal
Los medios de cultivo deben prepararse en el momento para evitar la oxigenación por 
el almacenamiento
CULTIVO
Agar sangre
Caldo Tarozzi, Tioglicolato
Medios selectivos
agar cicloserina cefoxitina fructosa (CCFA)
(agar selectivo para C. difficile )
Sospecha de C difficile
Tratamiento de la muestra previo al cultivo: Shock térmico o etanólico para 
evitar el crecimiento de otros agentes y seleccionar las esporas de C difficile
Agar sangre
Caldo Tarozzi
Sospecha de C perfringens
Realizar diluciones para hacer recuento de bacterias
 Jarra de Anaerobiosis
 72 horas a 37 grados
CULTIVO
CULTIVO
C Prefringens: doble hemólisis
CULTIVO
C difficile: no hemolítico
Agar cicloserina cefoxitina fructosa (CCFA): amarillas (se agrega al agar
rojo neutro como indicador de ph para evidenciar la ruptura de peptonas que produce un 
incremento en el ph tornando el medio de rosa a amarillo)
CULTIVO
Bacilos Gram positivos
Tener en cuenta que C perfringens es habitante norma del intestino.
RECUENTO ≥ 10 6 BACTERIAS POR GRAMO DE MATERIA FACAL SE CONSIDERA 
SOSPECHOSO
PCR
IDENTIFICACIÓN
Pruebas bioquímicas
Kits comerciales
Inoculacion en animales de experimentacion
IDENTIFICACIÓN DE TOXINOTIPO
ELISA
Métodos moleculares
SERONEUTRALIZACION (en cultivo celular o 
animal de experimentación) 
Toxinotipos de Clostridium perfringens