Método de sanger - Dariel Isai Soria Cordova

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SANGER
Metodo
de
Carla Estrada Estrada
 
 
 
 
¿QUÉ ES
SECUENCIAR?
Conocer la secuencia concreta de los nucleótidos que
componen cualquier ácido nucleico
La secuencia exacta de tanto ADN como ARN
Método por terminación
de cadena 
Este método de secuenciación fue
desarrollado por el bioquímico británico
Fred Sanger y sus colegas en 1977.
Actualmente es un método que se utiliza
para la secuenciación de piezas
individuales de ADN, 
PRIMER METODO
 
La primera versión del método de Sanger se publicó
inicialmente en 1975 y fue completado en 1977 con el uso de
didesoxinuclueótidos terminadores
En que consiste.. 
Un método de secuenciación por síntesis
Basado en la replicación de una molécula de ADN por la
ADN polimerasa. 
M A T E R I A L E S
Una enzima ADN
polimerasa
 
Un cebador
Nucleótidos ADN
(dATP, dTTP, dCTP,
dGTP
Molde de DNA
DIDESOXIDONUCLEOTIDOS
 
Terminadores de cadena 
Carecen del hidroxilo del
carbono 3
 
Se aísla y se clona el DNA que se quiere
secuenciar
Procedimiento
 
Se enfría para que el
cebador pueda unirse al
molde de cadena sencilla
 
Desnaturalización del
molde de DNA
 
Se preparan 4 tubos de reacción
REPLICACION 
DNA
CEBADOR
DIDESOXI
POLIMERASA
4 nucleotidos trifosfato
 
DNA polimerasa insertara nucleótidos de
manera aleatoria hasta agregar un
nucleocido
Electroforesis con gel de
acrilamida 
 
Ordenan las hebras
incompletas de
ADN por longitud y
así se conoce la
secuencia de
nucleótidos
DESVENTAJA
Las pruebas se debían de realizar
manualmente 
Se realizaban 4 reacciones
NUEVO METODO
Usar diferentes tintas para marcar los
didesoxinucleotidos
BIBLIOGRAFIA
José, P., Valderrama Martín, M., Ortigosa, F., & Cañas,
R. (n.d.) . Métodos de secuenciación de ácidos
nucleicos: Primera generación.
http://www.encuentros.uma.es/assets/journals/13/1
73singles/173.7_secuenciacion.pdf
 Khan Academy. (2022). Khanacademy.org.
https://es.khanacademy.org/science/ap-
biology/gene-expression-and-
regulation/biotechnology/a/dna-sequencing
 Sanger: Estrategia de secuenciación de Primera
Generación - Genotipia. (2017, May 12). Genotipia.
https://genotipia.com/sanger/#:~:text=El%20m%C3%
A9todo%20de%20Sanger%20se,cuatro%20dideoxinucl
e%C3%B3tidos%20(ddATP%2C%20ddGTP%2C
NUEVO
METODO
En que consiste.. 
Consiste en hacer muchas copias de una región blanco de
ADN.
Sus ingredientes son similares a los necesarios para la
replicación del ADN en un organismo 
M A T E R I A L E S
Una enzima ADN
polimerasa
 
Un cebador
Nucleótidos ADN
(dATP, dTTP, dCTP,
dGTP
Molde de DNA
https://es.khanacademy.org/science/biology/dna-as-the-genetic-material/dna-replication/a/molecular-mechanism-of-dna-replication
LIMITACIÓN