BCM- 2do regu teoricos parte 2 - ariadna franco

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Compartimientos Intracelulares I
Célula procarionte es poco compleja esta rodeada por una membrana plasmática que a su vez esta recubierta por una pared celular, no tenemos en el interior organela, el adn esta suelto, se encuentran algunos ribosomas encargados de la síntesis proteica. Tanto el adn como los ribosomas van a estar asociados a la membrana plasmática, todas las reacciones bioquímicas necesarias para mantener las funciones vitales de la célula van a ser realizadas muy cerquitas de la membrana plasmática. Esto produce dos cosas que el tamaño de la célula tenga que ser pequeño para que todos los procesos vitales puedan alcanzar la superficie celular en poco tiempo y esto le impone a lacelula una limitación funcional porque no pueden aumentar su tamaño. El adn de una célula procarionte tiene la caracteristica de ser circular y también estas células son individuos únicos.
Las células eucarionte han desarrollado un sistema de endomembranas (membranas internas) que les permite a las células tener distintos compartimientos dentro de la célula que son estructural y funcionalmente distintos, las características diferenciales a cada compartimiento se las dan las proteínas que son características de cada compartimiento. A la célula le sirve tener distintos compartimiento porque: se aumenta el área donde ocurren las reacciones bioquímicas vitales para la célula además estos compartimientos van a ser cerrados y separados del citosol, van a necesitar la presencia de proteínas tansportadoras, también van a necesitar mecanismos de importación y exportación de proteínas que van a ser características para dicho orgánulo, estas organelas o copartimientos ocupan posiciones características en el citosol.
En una célula eucarionte animal encontramos:
· Encontramos una membrana plasmática que rodea la célula. 
· El citoplasma es el citosola mas los orgánulos contenidos en el. 
· El citosol va a ser el espacio que hay entre la membrana plasmática y la membrana de cada una de las organelas
· Encontramos el núcleo que posee los ácidos nucleicos.
· Un retículo endoplasmático rugoso (asociado a ribosomas y encargado de la síntesis proteica) y uno liso (no asociado a ribsomas involucrado en la síntesis de lípidos)
· Complejo de Glgi encargado de realizar las modificaciones postraduccionales de las proteínas sintetizadas en el retículo
· Luego tenemos otras organelas como mitocondrias (respiración celular y generación de ATP) lisosomas (compuestos de hidrolasas acidas que se encargan de la dijestion, por ejemplo de proteínas), peroxisomas (que tienen enzimas como catalaza que se encarga de la catábolismo de algunos lípidos y aas, y de la generación de peróxido de hidrogeno).
En las vegetles debemos agregar pared celular y cloroplastos.
Todas las células eucariontes tiene la misma dotación de orgánulos (mismo tipos de orgánulos) se diferencian unas de otras en la cantidad de cada uno de estos orgánulos, y esta diferencia se las va a otorgar la función para la que ue desarrollada esa célula. 
Los distintos tipos de proteínas presentes en cada orgánulo le otorga a las propiedades estructurales y funcionales propias de cada uno. 
Por el desarrollo del sistema de endomembranas en la célula eucarionte le aporta una mayor eficiencia metabólica (comparada con la procarionte) y por lo tanto le da también una mayor complejidad
Origen evolutivo del núcleo y del retículo: en la célula procariota ancestral el núcleo y los ribosomas estaban asociados con la membrana plasmática, por causa de una ininvaginacion de la membrana el ADN es arrastrado hacia el centro de la célula y a su vez es envuelto por una membrana formando el núcleo celular, consecuentmente los ribosomas son arrastrados junto con este adn y se ubican de forma contigua formando una célula eucariota primitiva. Podemos decir que topologicamente el núcleo es equivalente al citosol, el lumen del retículo es continuo con las membranas nucleares internas y externas y es topológicamente equivalente al espacio extracelular
Origen evolutivo de la mitocondria: tenemos una célula preucarionte anaeróbica que puede endocitar otras células que es procarionte pero aetobica, al endocitarla esta otra célula queda recubierta por otra membrana plasmática, que es la membrana de la célula preucarionte, entonces esta célula esta recubierta por su propia membrana y luego por otra membrana de la célula que la endocito posee doble membrana. Este proceso se conoce como proceso de endocitosis y simbiosis. La célula que endocito a la mitocondri tiene su propio genoma diferente al genoma de la mitocondria.
¿Cómo se determina el destino de una proteína?. Las roteinas se tienen que poder desplazar entre los distintos compartimientos y para eso van a tener distintas maneras de desplazamiento. Para este desplazamiento la proteína va a tener una señal cundo se sintetiza que se la conoce como señal de clasificación, esa señal le va a indicar a la proteína a que compartimiento se debe dirigir o si se debe quedar en el citosol y a demás en ese comparimiento al cual la proteína tiene que dirigirse se van a encontrar receptores de clasificación que son receptores que van a poder leer que esa proteína pertenece a ese compartimiento. 
Exiten tres tipos de transporte para que se muevan las proteínas:
· Transporte regulado que son las proteínas que van del núcleo al citosol o viceversa que van a través del poro nuclear, es el único tipo de transporte que hay de importación o de exportación de proteínas. El citosol y el núcleo tenían origen topológicamente equivalentes
El núcleo es el compartimiento donde estancontenidos los ácidos nucleicos, ese núcleo esta rodeado por una membrana nuclear que es una oble membrana (membrana nuclear interna y externa) a continuación de la memebrana nuclear tenemos al retículo, esa membrana nuclear presenta poros nucleares que atraviesan toda esa envoltura nuclear. Esos poros son importantes porque a través de ellos se importsn y exportan proteínas y ARNm al citosol. En el interior del núcleo vamos a encontrar una lamina nuclear que es un entramado de filamentos intermedios, que es como si fuera el citoesqueleto de ese núcleo. 
Los poros nucleares son estructuras macromoleculares complejas, están formados por mas de 30 nucleoporinas, del lado citosólico contienen fibrillas citosólicas que son importantes para los procesos de importación y exportación del núcleo. Posee subunidad anulares, subunidad luminal, la subunidad en columna que son las que atraviesan la envoltura nuclear, sub unidades en anillos y hacia el interior del núcleo hay fibrillas nucleares que van a formar la canastilla nuclear que tienen una función muy importanteen la importaion y exportación de proteínas al núcleo.
Ingreso de las moléculas al núcleo a trves del poro nuclear: las moléculas pequeñas e hidrofílicas van a entrar por una difusión libre, mientras que aquellas moléculas mas grandes va a necesitar un proceso en el cual necesiten un gasto energético (trnsporte activo9. Las proteínas que van a ingresar al núcleo tienen la característica de que pueden ingresar plegadas.
Las proteínas tienen una señal de localización nuclear que esta en la secuencia peptidica de la proteína y que le indica a la proteína que es una proteína nuclear, esa señal de clasificación nuclear va a ser reconocida por unos receptores que van a hacer que esa proteína al ser reconocida pueda ingresar al núcleo, en el caso del núcleo no se necesita una peptidasa señal. 
La señal de clasificación es una secuencia rica en aminoacidos de carga positiva y esa secuencia se puede localizar en cualquier parte de la secuencia primaria de la proteína.
Determinar si una secuencia es un señal de clasificación que le indica a la proteína qe es una proteína nuclear y debe ingresar al núcleo:
· se puede hacer un experimento donde uno pueda cambiar un amioacido de la secuencia de localización y marcar la proteína con un fluorocromo, entonces podemos ver cual es el camino de la proteína en celulas donde no se cambio la secuencia de señalizacion yluego de cambiar la secuencia de señalización vamos a ver que donde la secuencia de la señalización de la proteína quedo intacta esa secuencia que esta marcada por un fluorocromo va a ingresar al núcleo (se ven núcleos fluorescente), en cambio si la secuencia de señalización fue cambada esa secuencia de señalización no va a ser reconocida por el receptor de clasificación y por lo tanto la proteína no ingresa al núcleo y queda el citoplsma fluorescente.
IMPORTACION del nucleo: Receptor de la señal de localización el cual es un receptor de importación al núcleo, nuestra proteína que tiene una señal de localización va a ser reconocida por nel receptor de importación al núcleo, estos receptores son proteínas citosólicas solubles que se las conoce con el nombre de importinas, estas proteínas están codificadas por una familias de genes que están relacionadas entre si. Entonces la secuencia de señalización que tiene esta proteína va a ser reconocida por una importina, va a formar un complejo y va interaccionar con las fibrillas citosólicas del complejo del polo nuclear e interaccionar con la fenialanina y la glicina que están presentes en estas fibrillas y esto hace que el complejo importina-proteina ingrese al núcleo. 
El complejo de proteína-importina se puede formar por la importina que reconozca las distintas señalizaciones de localizacionn al núcleo, o también podemos tener la proteína a transportar con la señal de localización una proteína adaptadora que reconozca esa secuencia de señalización y esa proteína adaptadora a su vez tenga una secuencia de loclizacion nuclear que sea reconocida por una importina (complejo de 3 proteinas).
EXPORTACION del núcleo: funciona igual pero a la inversa que la importación. la secuencia de señalización va aser una secuencia de exportación se necesitan receptores de exportación los cuales van a estar dentro del núcleo y van a reconocer la secuencia de exportación, estos receptores van a ser proteínas solubles nucleares que se ls llama exportinas. 
Este proceso va a estar mediado por un gasto energético y la direccionalidad de si una proteína ingresa o egresa del núcleo va a estar determinada por un gradiente de GDP/GTP, en el citosol vamos a tener un alto contenido de GDP, mientras que en núcleo vamos a tener un altocontenido de GTP, este gradiente es el que va a permitir que una proteína ingrese al núcleo o salga del núcleo. Este gradiente se mantiene en el citosol por una proteína ubicada que se llama Ran-GAP que es la que va producir la hidrolisis del GTP en GDP, mientras que en núcleo vamos a tener un fractor nuclear de intercambiador de guanina que es la proteína GEF que va a intercambiar Ran-GDP por Ran-GTP y de esta manera vamos a mantener el gradiente GDP/GTP. 
IMPORTACION: Del lado citosólico vamos a tener a la importina que es el receptor soluble citosólico de importación al núcleo, y también vamos a tener la proteína que tiene que ser importada al núcleo que expresa la secuencia de localización nuclear que va a ser reconocida por la importina la cual reconoce esa secuencia y forma un complejo con la proteína que tiene que transportar. A su vez en l citosol el ran GTP se hidroliza formandose Ran-GDP, haciendo que el contenido de GDP del citosol sea mayor al que hay en el núcleo, el gradiente hace que el Ran-GDP pueda ingresar al núcleo, este transporte a favor de gradiente va a arrastrar a la proteína unida a la importina, este complejo a su vez se va a unir a su vez a repticiones de fenilalanina y glicina que están en las fribillas del complejo del poro nuclear del lado citosólico, va a ir saltando de un lado al otro y va a llegar al interior del núcleo. En el interior del núcleo el Ran-GEF va a intercambiar GDP por GTP de la poteina Ran y esto hace que el ran-gtp tenga mayor afinidad por la importina, se produzca la disociación del complejo de proteína-importina y el Ran-GTP se va a unir a la importina, el gradiente GTP que es mayor en el citosol lo que va a permitir es l salida del Ran-GTP unido a la importina hacia el lado citosólico. Una vez afuera la importina Ran-GTP se disocia de la importina porque vuelve a ser hidrolizado a GDP, la importina puede volver a identificar otra proteína para transportar.
EXPORTACION: en el núcleo vamos a tener al receptor soluble de exportación nuclear que es la exportina y a la proteína que tiene que ser transportada hacia el citosol, que tiene la secuencia de señallizacion de exportación, la exportina se va a unir a la proteína con la secuencia de señalización y a demás la exportina tiene un sitio de unión para la proteina Ran-GTP. Nuevamente como la concentración de GTP es mayor en el interior del núcleo que en el exterior este gradiente favorable hace que la Ran-GTP pueda salir del núcleo arastrando el complejo exportina-proteina, una vez en el citosol el GTP va a ser hidrolizado permitiendo la disociación del complejo, entonces queda en el lado citosólico la proteína que tenia que ser transportada y la exportina, pero la exportina tiene que volver al núcleo asieu nuevamente valiéndonos del gradiente de GDP que es mayor en el citosol que en el núcleo, el gradiente de GDP va a permitir el ingreso de esta exportina al núcleo para que vuelva a cumplirse el ciclo. 
Importancia del ingreso de proteínas al núcleo: existen muchas proteínas que tienen que ingresar al núcleo porque forman parte constitutiva del núcleo y otras proteínas que son los factores de transcripción que necesitan ingresar al núcleo para poder activar la transcripción génica.
Control de la importación nuclear durante la activación de células T: NF-AT (factor nuclear de células T activadas), es una factor de transcripción que produce la activcion de las células T, los linfocitos pueden se CD4 que ayudan a la respuesta inmunológica o los CD8 que están involucrados a la respuesta del covid atacan al agente que esta agrediendo el organismo para destruirlo. La activación de los linfocitos T se realiza por el factor de transcripción mencionado esta fosforilado y tiene un sitio de unión a una proteína que se llama calcineurina, que es una proteína fosfatasa, cuando aumenta la concentración de calcio dentro de la célula T lo que va a ocurrir es que se va a activar esta fosfataza que va a producir la desfosforilación del factor de transciprion, la calcineurina se une al FT lo desfosforila y deja libre una señalización de importación nuclear, esta señal va as er reconocida por una importina y por el mecanismo ya visto va a ingresar al núcleo. Cuando el FT ingresa al núcleo va a unirse a sitios en el ADN para activar la transcripción génica. Cuando la concentración de calcio en la célula T disminuye esta calcineurina cambia su configuración y se desprende del FT y lo que ocurre entonces por una quinasa se fosforila el FT y deja expuesta una señal de exportación con la cul se puede unir a una exportina y salirdel núcleo. Si le agrego a la célula una sustancia que se llama ciclosporina va a impedir que se active la calcineurina y a su vez que se desfosforile el FT por lo tanto nunca va a dejar libre el sitio de señalización de importación nuclear y por lo tanto no va a poder ingresar al núcleo. La trnscripcion de genes no va a estar activadas y no se activaran las células T.
Tambien es muy importante la exportación del núcleo del ARNm, una ve que este esta maduro se va a unir a unas proteínas importantes que son de reconocimiento de exones y van a proteger al ARNm, este complejo de ribonucleoproteinas va a necesitar salir del núcleo para que en citosol peda ocurrir la traducción del ARNm a proteína, este ARNm unido al complejo proteico es muy grande y por lo tanto va a necesitar un transporte regulado para poder salir al citosol, con aporte energético sucederá. La mayoría de los ARNm se exportan por un proceso independiente del Ran, exiten dos proteínas en el núcleo que son la F1XN y la T1XN que son proteínas que facilitan la exportación del ARNm fuera del núcleo, estas proteínas se ensamblan sobre el ARNm ya prcesado y todo este complejo va a interaccionarcon el complejo del poro nuclear y va a salir del nucelo. Paa que salga del núcleo es necesaria la presencia de una helicasa la cual se llama Dbp5 es una helicasa dependiente de ATP y lo que hace es un remoldelamiento del complejo de ARNm y las proteínas nucleares, es un remodelamiento irreversible (esto marca la unidireccionalidad de este proceso), en ese remodelamiento lo que ocurre es el desensamblaje de las proteínas nucleares, estas proteínas luego tienen que ingresar al núcleo por el poceso visto antes dependiente de Ran. 
Resumen: tenemos una secuencia de señalización tanto para la exportación como para la importación que marca si la proteína tiene que ingresar o salir del nicleo. Tenemos receptores solubles (importina soluble citoplasmático, exportina soluble nuclear). No tenemos canal de translocación pero si tenemos el complejo de poro nuclear que es por donde ingresan o salen las proteínas unidas a sus receptores. La proteína entra en forma plehada, no vamos a tener una peptidasa señal ni de importación ni de exportación. Y la fuente de energía es el gradiente GDP/GTP o direcciona si la proteína va a ingresar o salir del núcleo 
· Transporte transmembrana: es cuando vamos del citosol a un compartimiento topológicamente distinto y para ello vamos a necesitar traslocadores proteicos transmembrana, este transporte tienen un único sentido.
Trannsporte de proteínas al interior de mitcondrias: la mitocondria es una organela que surge en la célula eucarionte por medio de un proceso de endocitosis y simbiosis, estas mitocondrias se van a encargar de la síntesis de ATP y el transporte electrónico y fosforilación oxidativa, se encargan de la respiración celular. Vamos a tener en cuenta que podemos definir en la mitocondria un membrana interna una externa, un espacio intermembrana y tambien lo que vamos a llamar espacio de la matriz mitocondrial (lo que esta adentro). Esta mitocondria tiene dna propio y ribosoma propio, estos ultimops se van a encargar de la síntesis de proteína que van a formar parte de esta mitocondria y el dna tiene la característica que es un genoma diferente al de la célula que contiene la célula, la mayoría de las proteínas que constituyen a la mitocondria no están sintetizadas en la mitocondria sino que son codificadas en el núcleo, el ARNm va a ser exportado desde el núcleo al citosol y en el citosol va a ser tradcido a proteínas, esas proteínas son las que van a necesitar ingresar a la mitocondria para cosnttuir las proteínas mitocondriales. tenemos dos compartimientos muy importantes el espacio intermembran y otra es la matriz celular, y que las proteínas van a necesitar una señal de direccionamiento no solo hacia la mitocondria sino hacia que lugar de la mitocondria es el que le corresponde, entonces vamos a tener proteínas dirigidas al espacio intermembrana o a la matiz celular. 
Cuando una proteína sintetizada en el citosol tiene que ingresar a una organela ese ingreso puede ocurrir de dos formas, puede ser translocación cotraduccional que mientras se sintetiza la proteína va ingresando a la organela. Y el otro proceso es una translocación postraduccional, la proteína se sintetisa completamente en el citosol y esa proteína luego va a ser transportada y reconocida por un receptor de localización de esa proteína y de esa manera va a ingresar a la organela. 
En el caso a la mitocondria la proteína va a ingresar por proceso postraduccional, la proteína se sintetisa en el sitosol y luego esa proteína como tiene una señal de localización mitocondrial va a ser reconocida por un receptor mitocondrial y va a permitírsele a esa proteína que inrese a la mitocondria
Para que el proceso ocurra vamos a necesitar ya señal de clasificación en esta proteína de direccionamiento a cualquiera de los espacios mitocondriales, vamos a necesitar receptores de clasificación que reconscan esta secuencia de clasificación y en este caso como la secuencia de señalización esta en el amino terminal vamos a necesitar una peptidasa señal que cuando finalice el proceso de traslocación de esta proteína hacia el interior mitocondrial, esa peptidasa sea capaz de cortar esa señal de clasificación a la mitocondria. Es importante tener en cuenta en el caso de la señal de clasificación de la mitocondria tiene que ser dirigida no solo a la mitocondria sino al compartimiento dentro de la mitocondria del cual va a formar parte. 
En el caso del direccionamiento de la proteína hacia la matriz mitocondrial vamos a ver que esa señal de direccionamiento esta formada por una cadena alfa-helice que es anfifilica que esta ubicada en el aminoterminal de la secuencia primaria de la proteína, esta secuencia tiene residuos polares que se agrupan en una cara y residuos no polares que se van a agrupar en la cara opuesta.
La proteína tiene que ser reconocida por el receptor de la membrana, en la membrana externa vamos a tener un receptor que esta acoplado a un canal de traslocación que va a permitir el ingreso de la proteína hacia el interior de la mitocondria, este complejo es el complejo TOM (ubicado en membrana externa). Exite otro complejo que se encuentra en la membrana interna TIM23 que permite que la proteína que ingresar a traves del complejo TOM pueda ingresar a la matriz mitocontrial a traves de el. Además de estos dos traslocadores que encontramos en las membranas exiten otros como el complejo TIM22 que permite la inserción de proteínas de múltiples pasos las proteínas que poseen múltiples dominios transmembrana que se pueden insertar entonces en la membrana mitocondial, después tenemos el complejo SAM que interviene en proteínas que tiene plegamiento beta y que van a ser ancladas a la membrana externa, el complejo OXA que esta en la membrana interna de la mitocondria y es capaz de insertar proteínas que fueron codificadas por el genoma mitocondrial y fueron traducidas en la matriz mitocondrial (proteínas sintetizadas en la mitocondria) y esas proteínas pueden a traes de este complejo insertarse en la mmebrana interna de la mitocondria. 
Proceso de importación de proteínas a la mitocondria: tenemos una proteína que fue sintetizada en el retículo endoplásmico rugoso, esa proteína tiene una señal de direccionamiento a la mitocondria en su amino terminal la cual va a ser reconocida por el complejo TOM (por el receptor que esta acoplado y forma el complejo tom) que esta en la membrana externa de la mitocondria, la proteína va a ingresar por el complejo y como es una proteína que va hacia la matriz mitocondrial tiene que atravesar tambien la membrana interna que para eso tenemos el complejo TIM23 por donde pasa hasta llegar a la matriz. 
Una vz que llego a la matriz mitocondrial va haber una peptidasa señal en esa matriz que va a cortar es señal de direccionamiento hacia la mitocondria que esta en el amino terminal y vamos a tener de esa manera la proteína mitocondrial madura. Las proteínas mitocondriales siempre tienen que ser importadas del citosol a la mitocondria de forma desplegada y para que esta proteínas lleguen desplegadas vamos a necesitar a proteínas chaperonas que mantengan a esas proteínas desplgadas y tambien se necesita para ello gasto energético. 
La hidrolisis de ATP y el potencial de membrana van a ser los que dirigen la importación de proteínas al espacio de la matiz mitocondrial.
Por un lado tenemos la proteína que tiene que ingresar a la mitocondria que se va unir a la secuencia de señalización al receptor que esta en el complejo TOM y comiensa a translocar hacia el interior del espacio transmembrana, para que esto ocurra la proteína tiene que estar desplegada y para que la proteína este desplegada vamos a necestar de chaperonas citosólicas que son las hsp70 que se van a unir a los sitios hidrofóbicos de la proteína evitando que se plieguen y a medida que va ingresando la proteína por el translocador TOM se desprenden las chaperonas y para esto vamos a necesitar la hidrolisis del ATP. Uuna vez que la proteína esta en el espacio intermembrana la proteína va a ser reconocida por el complejoTIM 23 que esta en la membrana interna de la mitocondria permitiendo que la proteína trasloque hacia la matriz mitocondrial y para que esto ocurra vamos a necesitar del potencial de membrana. Hay un bombeo de protones hacia el espacio intermembrana el cual hace que se genere una diferencia de potencial entre el lado de la matriz mitocondrial y la cara del espacio intermembrana, siendo la cara que da al espacio intermembrana que esta cargada positivamente por el flujo de proteones y hacia el interior de la matriz mitocondrial tenemos carga negativa, esta diferencia de potencial es el que va a impulsar a la proteína para que pueda ingresar a la matriz mitocondrial, para evitar el plegamiento de la proteína van a actuar unas chaperonas mitocondriales que son hsp70 que la que van a tapar los sitios hidrofobicos del lado de la matriz mitocondrial a la proteína que esta ingresando, impiediendo que se pliegue antes que ingrese completamente a la matriz mitocondrial. Cuando las proteias hayan ingresado por completo a la mitocondria se va a necesitar denuevo de la hidrolisis de ATP para que se desprendan las chaperonas y al ocurrir esto lo que va a pasar es que la proteína se va a plegar hacia su conformación mas estable dentro de la matriz mitocondrial.
Hay proteínas dirigidas hacia otros compatimientos de la mitocondria por ejemplo una proteína cuando entra a traves del complejo TOM y luego pasa por el complejo TIM23 en este ultimo se detiene la translocación cuando este ultimo complejo reconoce una secuencia hidrofóbica presente en la secuencia de la proteína, pero esta proteína ingresa por completo por el complejo TOM y luego por esa parte hidrofóbica queda enganchada en la membrana interna. La proteína puede quedar anclada a la membrana o puede quedar en el espacio intermembrana dependiendo de que proteína sea. 
Tambien pueden haber proteínas que lleguen hasta la matriz se le corte la secuencia de señalización direccionada a la mitocondria pero que posea otra secuencia de señalización dirigida a otro compartimiento, esta secuencia es reconocido por el complejo OXA el cual va a direccionar la proteína hacia el otro lugar de la mitocondria (puede ser que quede anclada a la membrana interna o que venga una proteasa y corte el sitio de anclaje a la membrana interna y la proteína quede soluble en el espacio intermembrana, otra posibilidad es que tengams una proteína que se sintetizo en la mitocondria la cual tenga un sitio de reconocimiento que es reconocido por el complejo OXA. 
El complejo TIM22 esta especialiado en las proteínas de múltiples pasos que tienen vaio s sitios de inserccion en la membrana plasmática interna, el complejo tiene un mecanismo especial 
RESUMEN: vamos a necesitar una secuencia de señalización que esta en el amino terminal. Un receptor que va a estar en el complejo TOM, un canal de translocación que es el complejo TOM. Y si es una proteína que va hacia la matriz mitocondrial necesitamos un complejo de la membrana interna que es el canal TIM23. La proteína siempre ingresa desplegada (necesitamos gasto energético y chaperonas) vamos a necesitar una peptidasa señal porque esa secuencia de señalización tiene que ser cortada, y la fuente de energía o lo que impulsa el direccionamiento de proteínas hacia la matrizmitocondrial para pasar va a ser la hidrolisis de ATP (mantener proteína desplegada) y por otro lado la diferencia de potencial de membrana que hay en la mitocondria. 
· Otro tipo de transporte transmembrana es el transporte de proteínas al perozisoma (desde el citosol al peroxisoma) tamben necesitamos trnaslocadores proteicos transmembrana. Los peroxisomas son organelas rodeadas por una simple membrana, no presentan adn ni ribosomas y por lo tanto las proteínas están todas codificadaas en el núcleo por lo tanto van a ser sintetizadas fuera del núcleo y van a tener que ser transportadas hacia el peroxisomas por un mecanismo en el cual tenermos que usar translocadores. El peroxisoma es el principa lugar donde se utiliza el oxigeno ya que su principal función intervenir el catabolismo de algunos aminoacidos y de los lípidos, en su interior vamos a tener enzimas oxidativas como catalasas o peroxidasas tambien oxidasas y es uno de los principales lugares donde se forma peróxido de hidrogeno. 
Los peroxisomas se cree que se originan a partir del retículo endoplásmico ocurre un proceso de formación de una vesícula precursora de peroxisoma que se desprende del retículo. Esa vesícula comienza a incorporar proteínas del peroxisomaque son proteínas especificas sintetisadas en el citosol, esta vesícula donde incorpora proteínas tanto de la membrana como de la matriz del peroxisoma empieza a crecer y por un proceso de fision vamos a obtener dos peroxisomas hijos. 
La traslocación al peroxisoma solo va a necesitar una señalización de clasificación y un receptor de clasificación. la translocación de la proteína al peroxisoma tambien es un proceso postraduccional.
Tenemos una secuencia de clasificación en direccionamiento al peroxisoma la cual se conoce como secuencia SKL (serina.lisina-leucina) es una secuencia corta ubicada en el extremo carboxilo terminal tambien se la conoce como secuencia de direccionamiento peroxisomico PTS1. En el caso de las proteínas que ingresan al peroxisomas ingresan de forma plegada.
Para que las proteínas ingresen al peroxisoma vamos a necesitar hidrolisis del ATP, nuestra proteína plegda con la secuencia de direccionamiento va a ser reconocida por un receptor soluble que se conoce como Pex5 una vez formado el complejo de receptor y proteína, este complejo va a interaccionar con un translocador que esta en la membrana del peroxisoma que es el Pex14 atraves del traslocador ingresa todo el complejo al peroxisoma, en el interior del peroxisoma se disocioa el complejo y la proteína que esta dentro del peroxisoma tiene el complejo PTS1 porque no hay peptidasa señal. El receptor soluble que ingreso tiene que volver al citosol y para ello hay un complejo formado por 3 proteinas Pex10, Pex12 y Pex2 que están en la membrana y es un translocador que permite el paso del Pex5 hacia el citosol para que realice el ciclo denuevo. 
RESUMEN: tenemos una secuencia de señalización PTS1, tenemos un receptor el Pex5 que es un receptor soluble que esta en el citosol, tenemos un canal de translocación que permite la translocación del complejo. La proteína entra plegada (no se sabe cuando se genera la hidrolisis de ATP), no se necesita peptidasa señal. La fuente de energía es el atp
· Transporte vesicular es en donde una proteína va desde un compartimiento a otro que son topológicamente equivalentes mediante un intermediario de transporte rodeados por una membrana, este transporte también es bidireccional. 
El compartimiento dador de la proteína realiza un proceso de gemación donde produce una vesícula cuyo contenido va a se transportado y esa vesícula va a vijar por el citosol hasta llegar al compartimiento diana o aceptor, cuando llega la vesícula se fusiona con la membrana de ese compartimiento y el interior de la vesícula es volcado al interior del compartimiento diana
Las proteínas para poder ir de un compartimiento a otro van a necesitar una señal de clasificación que les diga hacia que compartimiento ir, necesitan un receptor de clasificación que reconozca la señal y también va a necesitar aveces una péptido señal lo que hace es cortar la señal de clasificación una vez que la prteina llego a su destino.
Compartimientos intracelulares II
Transporte transmembrana:
Transporte del citosol al retículo endoplasmático: el retículo endoplasmático es un sitio topológicamente distinto al del citosol, ya que el origen del retículo endoplsmatico era que la membrana plasmática se invaginaba y el lumen del retículo era topológicamente similar al espacio extracelular.
El retículo endoplasmático es estructural y funcionamente diverso, las funciones del retículo son la biosíntesis celular donde se va a encargar de la síntesis de proteínas de exportación, proteínas transmembrana y lípidos, tambienes un deposito de calcio, secuestra calcio del citosol gracias a la bomba de calcio (Ca+2) y presentan proteínas de unión al calcio en el lumen del retículo y de esa manera ayuda al secuestro de clacio. Al retículo lo podemos dividir en el retículo rugoso y en el liso, y cada uno de ellos se va a ocupar a una función especifica. El retículo rugoso esta asociado a ribosomas por lo tanto su función será la de biosíntesis de proteínas, el retículo liso no esta asociado a ribosomas y tiene como función principal la síntesis de lípidos. 
En el caso del retículo la traslocación de proteínas es un proceso cotraduccional eso significa que a medida que la proteína se va traduciendo va translocando al lumen del retículo. 
Para esto vamos a necesitar una señal o secuencia de clasificación, un receptor de clasificación que reconozca la señan y una peptidasa señal que corte la señal de clasificación.
En el caso de las proteínas dirigidas al retículo la señal de clasificación esta en el amino terminal, es una secuencia larga con una parte hidrofóbica, esta secuencia va a ser cortada por la peptidasa señal una vez que haya translocado la proteína. 
En el caso de la translocación de la proteínas al retculo por se un proceso cotraduccional vamos a necesitar varias moléculas o partículas que puedan reconocer e interactuar con esa señal que tiene la proteína para translocar al reiculo. Una de esas partículas es la particula de reconocimiento de señal (SRP) esta particula es una ribonucleoproteina unida a cadena polipeptídicas, en este caso son cadenas polipeptídicas que se unen a una molécula de RNA y esta particula que tiene una forma particular va a tener distintos dominios que son importantes para el reconocimiento de la secuencia señal presente en la proteína que va a translocar al retículo, vamos a tener un bolsillo de unión a la secuencia señal que es un bolsillo hidrofóbico (porque la secuencia señal es una secuencia larga hidrofóbica) en ese bolsillo se va a unir por complementariedad molecular a la secuencia de la proteína. Luego hay una secuencia bisagra y tambien tenemos un domino de pausa de la traducción. La particula de reconocimiento de la señal que es un receptor soluble citosólico es capaz de unirse por su dominio hidrofóbico recubiertos de metionina a la secuencia de señalización presente en el amino terminal de la cadena polipeptídica naciente. Cuando se une la particula de reconocimiento de la señal a la secuencia de señalización de direccionamiento al retículo esta proteína gracias a su dominio bisagra puede abrazar al ribosoma y bloquear el sitio de unión de los factores de elongación, lo bloquea uniendo su sitio de pausa de la traducción a ese sitio donde se tienen que unir los factores de elongación, lo que produce una pausa en la traducción, es necesaria porque si la proteína se siguiera sintetizando fuera del retículo la proteína no podría ingresar al retículo porque la translocación de proteínas al retículo es un proceso cotraduccional. Todo el complejo de proteína SRP, ribosoma y proteína naciente se va a tener que unir a un receptos que esta en la membrana del retículo endoplásmico para translocar y continuar la traducción de la proteína, entonces la pausa de la traducción le da tiempo a este complejo para unirse a ese receptor de memebrana, además si el proceso continuara fuera del retículo y las proteínas son de tipo hidrolasas, lipasas o proteasas estarían fuera del lugar donde tendrían que estar retenidas, no serian proteínas de retículo, estarían en el citosol, por su acción enimatica podrían producirles efectos graves con consecuencias negativas importantes a la células, entonces el proceso tambien es por un sistema de seguridad. 
Proceso de translocación: la SRP que es el receptor soluble citosólico es capaz de reconocer a la secuencia de señalización de la proteína naciente que esta siendo sintetizada en un ribosoma. Una vez que reconoce la señal la particula abraza al ribosoma forma un complejo y se produce la pausa en la trduccion, todo el complejo es direccionado por la particula SRP hacia un receptor (es un receptor de la particula SRP) que esta en la memebrana del retículo rugoso, se produce la interacción de todo el complejo con el receptor luego se produce la translocación del complejo hacia un translocador de membrana que se llama SEC61 que tambien esta en la membrana del retículo y al producirse esta translocación la particula SRP se disocia del ribosoma, al disociarse la secuencia de señalización interactua con el trnaslocador de membrana, comienza entonces la traducción de la proteína y la translocación de la proteína en forma simultanea. Se cree que para este proceso en el que ocurre la trnaslocacion de la proteína requiere gasto energético y se cree que el gasto energético proviene de la hidrolisis del GTP.
Exiten dos poblaciónes de ribosomas los que están libres en el citosol y los que están asociados al retículo endoplásmico, estos últimos son los que van a interaccionar con la particula SRP y con su receptor que esta en la memebrana del retículo y con el trnaslocado SEC61 y van a estar implicados en la translocación de la proteína hacia la luz del retículo. En cambio los ribosomas que están libres en el citosol posiblemente intervengan en la producción de proteínas que van a ser direccionados hacia otras organelas como peroxisomas o mitocondrias.
Las dos poblaciones de ribosomas pueden formar lo poliribosamas que son aquellos ribosomas que están traduciendo simultáneamente a un mismo mensajero. Una vez producida la traducción del ARNm esos ribosomas se van a disociar y esas subunidades van a formar parte de un pul común que pueden tanto pasar a formar parte de los ribsomas libres como de ribosomas asociads al retículo endoplásmico.
El complejo SEC1 es un poro acuoso que tiene la característica de que es una estructura cerrada dinamiacamente, y solo se abre de manera trnasitoria cuando la cadena polipeptídica atraviesa la membrana. Este poro tiene que permanecer cerrado porque como es un poro acuoso podría permitir la salida de calcio y si sale calcio hacia el citosol puede disparar un montón de vias de señalización que la célula no requiere. 
La estructura del poro: esta fromado por cuatro subunidades alfa, gamma, beta y una pequeña subunidad que va a formar el taponn del poro. Cuando el péptido señal interacciono con el poro y la proteína esta translocando el poro puede tener una apertura lateral que permita la salida de esa proteína hacia el interior del retículo. 
La trnaslocacion de una proteína al retículo va a depender del destino de esa proteína, si esa proteína puede ir a la luz del retículo por lo tanto va a ser una proteína soluble del retículo o puede quedar inserta en la memrana del retículo, puede ser que tenga un solo paso de insersion o múltiples pasos, en cada caso vamos a necesitar secuencias de direccionamiento especifico para indicarle a la proteína cual es su destino final en el retículo.
El caso mas sencillo es de las proteínas solubles que son aquellas que van hacia la luz del retículo, la proteína que tiene que ser traducida interacciona con el receptor SEC61 esa interacción se da gracias al péptido señal lo que permite que la proteína comience a sintetizarse y a translocar simultáneamente hacia la luz del retículo, una vez que la proteína trnasloco completamente exite una peptidasa señal que corta el péptido de direccionamiento, permite que el translocaor se corra lateralmente y deja en libertad a la proteína en la luz del retículo y el péptido señal queda inserto en la membrana que luego puede ser degradado por otras proteasas. Esta proteína que llego a la luz del retículo va a sufrir un proceso de plegamiento para dar lugar a la proteína madura, esta proteína es soluble del retículo.
Podemos tener tambien proteínas ue tengan un sitio de insersion en la membrana del retículo, que no sean solubles de la luz del retículo sino que estén insertas en la membrana del retículo y son las peroteinas integrales de membrana. Esas proteínas ademásde la secuenciade direccionmiento al retículo tienen que tener otra secuencia que les indique que tienen que quedar insertas en la membrana del retículo, esa secuencia es una secuencia conocida como secuencia de paro es tambien una secuencia hidroobica y vamos a ver que cuando la translocación detecte esta secuencia se va a detener y va a quedar inserta la proteína en la memebrana del retículo. Se produce la interacción de la señal de direccionamiento con el SEC61 comienza la síntesis y translocación de esa proteína y cuando llega la secuencia del paro es reconocida por el SEC61 y allli se detiene la translocación pero no la síntesis, la proteína continua la traducción del lado citosólico. Cuando termina la traducción una proteasa del retículo corta el péptido de direccionamiento al retículo, el SECC61 se desplaza lateralmente y la proteína queda enganchada en la membrana del retículo por la secuencia de paro, esta proteína es una integral de membrana que tiene un solo paso. 
Las proteínas de doble paso en general tienen dos secuencias de señalización y la secuencia de direccionamiento al retículo no la tienen en el amino termina sin que la tienen dentro de la secuencia polipeptdica. Entonces esta proteína comienza su traducción en el citosol hasta llegar a la secuencia de direccionamiento, una vez que llega a esa secuencia, esa secuencia de direccionamiento interactua con el SEC61 y continua la trnaslocacion de la proteína hacia el lumen del retículo hasta que se encuentre con la secuencia de paro y se detenga la translocación, pero la traducción continua del lado citosólico. Una vez que esto ocurrió el SEC61 se deplaza lateralmente y en eta proteína no hay una peptidasa señal ya que la secuencia señal esta en el medio de la proteína y cortarla implicaría cortar una parte de la proteína, entonce la proteína queda enganchada por dos pasos.
Tambien podemos tener proteínas de múltiples pasos y lo que tienen es distintas secuencias de señalización y secuencias de paro que van a quedar enganchadas en la membrana del retículo. 
RESUMEN: tiene una secuencia de señalización en la proteína que es larga e hidrofóbica y a demás si la proteína no es una proteína soluble vamos a tener tambien secuencias de paro que indican que la proteína va a tener pasos transmembrana. Tenemos un receptor que es soluble citoolico que es la proteína SRP que se va a unir a la secuencia de señalización y tenemos un receptor de la proteína SRP ubicado en la membrana del retículo y va a interaccionar con el complejo SRP-proteina naciente. Tenemos un canal de translocación SEC61 que va a translocar a la proteína a medida que se vaya traduciendo. Tenemos peptidasa señal que va a cortar la secuencia de señalización siempre en el caso que la proteína sea soluble o tenga un solo paso. La fuente de energía se cree que es la hidrolisis del GTP
Lo primero que tenemos que hacer para estudiar el trafico de una proteína tenemo que elegir el sistema experimental, si queremos ver como se mueve una proteína de una organela a otra tenemos que elegir un sistema experimental en donde haya una activa síntesis proteica (higad,pancreas). Luego tenemos que elegir la aproximación que queremos estudiar, por ejemplo podemos elegir la aproximación por transfección, por ejemplo si queremos definir la secuencia señal hacia que orgánulo esta dirigida podemos hacer con la secuencia señal una proteína de fusión y la tranfectamos en una célula eucarionte (en una eucarionte porque necesitamos que la célula tenga organelas para evaluar hacia donde fue dirigida la proteína).
para evaluar hacia donde fue la proteína podemos hacer una centrifugación diferencial y podemos evaluar en que lugar de que fracción tenemos a la proteína. 
Otra técnica es realizar una técnica de inmunolocalizacion en donde podemos hacer una colocalizacion y evaluamos donde esta la proteína
Otro método es la aproximación genética podemos studiar la tranlocacion de proteínas por ejemplo en la célula de levadura salvaje que necesita histidina para sobrevivir, puede tomarla del medio o transformarla del histidinol por una enzima citosólica, si a la célula la coloco en un medio sin histidina vive y si la coloco en un medio sin histidina tambien vive. Pero si a la célula le modifico la enzima agreganndole una secuencia de direccionamiento al retículo, esta enzima queda en la luz del retículo y no va a estar en el citosol para transformar el histidinol en histidina, si la célula la coloco en un medio sin histidina muere. Por ingeniería genética yo puedo estudiar e interpretar el mecanismo de translocación de proteínas.
Otra manera de estudiar el mecanismo de trnaslocacion de proteínas es haciendo una aproximación bioquímica, es decir utilizando un sistema libre de células, hace un homogenato del tejido luego una centrifugación diferencial seguido por una centrifugación en gradiente para separar lo orgánulos, en cada una de las fracciones puede determinar si se encuentra o no la proteína de interés por medio de fluorescencia, marcadores radiactivos o tambien por un westrn bloot. 
· Con dicho sistema podríamos estudiar si la secuencia de direccionamiento que tiene una proteína la dirige por ejemplo hacia mitocondrias. Para realizar el experimento tenemos la proteína con la secuencia de direccionamientos (supeniedo que dirige a mitocondrias) y la incubamos con mitocondrias luego le aregamos tripsina. Aparte hacemos lo mismo pero solo agregándole a la proteína tripsina.
Luego realizamos un western bloot y si la proteína tenia la secuencia de direccionamiento a la mitocondria esa proteína puede inressar a la mitocondria y cuando le agregamos tripsina no puede digeriri a esa proteína, en donde solo le agregamos a la proteína tripsina sin incubar con mitocondria esta trispsina digiere a la proteína. Entonces cuando hagamos el western bloot y la proteína pudo ingresar a la mitocondria vaos a observar una banda y si no pudo no va haber ninguna banda. 
De esta manera determinamos si la secuencia de la proteína es dirigida a mitocondrias
· Tambien lo que podríamos hacer es una purificacion de microsomas rugosos y microsomas lisos (los rugosos asociados a ribosomas son mas pesados que lo lisos), en esa fracción microsomal (sistema libre de célula) tenemos la proteína de interés, lo que podemos hacer es tratarlo con detergente donde se van a romper la membrana y luego si tratamos con proteasas estas van a poder degradar a las proteínas (si no lo tratamos con detergente la proteasa no puede llegar a la proteína y degradarla). Entonces tenemos un sistema donde agregamos detergente rompiendo la membrana y agregamos proteasa para degradar las proteínas y otro sistema en donde por la memebrana que no esta degradad las proteasas no pueden degradar a las proteínas, realizando un western bloot podemos saber si la proteína esta o no esta en nuestra fracción microsomal.
· Tambien lo que podemos hacer utilizando un sistema libre de células es realizar una traducción de proteínas invitro, con una secuencia de direccionamiento que puede ser a retículo incubams la proteína con microsoma y vamos a ver que es aproteina no ingreso, si hacemos lo mismo con un sistema en el cual tengamos ribosomas acoplado a microsomas lo que vamos a ver es que la proteína se sintetiza ingresa en el microsoma y por la pepetidasa señal se corta la secuencia de direccionamiento. Entonces evaluo las proteínas sintetizada de forma invitro y las sintetizadas en los ribosomas del microsoma, lo que voy a obtener en un western bloot son dos bandas una banda que es una proteína d emayor tamaño que esta incluyendo a la secuencia de direccionamiento y na banda ubicada mas debajo de la proteína de menr tamaño que ingreso al microsoma porque la secuencia de direccionamiento fue degrada por peptidasa señal. 
Hay unas proteínas que se las conoce como proteínas residentes en el retículo que se sintetizan en el retículo endoplásmico rugoso pero tienen que salir del retículo hacia el Golgi para sufrir modificación postransduccionales pero luego tienen quevolver al retículo porque es allí donde cumplen su uncion. Estas proteínas tienen una secuencia de retorno al retículo, es una secuencia corta de 4 aa que se encuentra en el carboxilo terminal por ejemplo chaperonas (plegamiento de proteínas), etc.
Una de las modificaciónes postraduccionales que ocurre en el retículo es la N-glicosidacion que consiste en el agregado de 14 azucares a un grupo amino de una asparagina (2 nacetilglucosamina, 9 manosas y 3 glucosas). Ocurre: el grupo de oligosacárido es unido a un dolicol por dos grupos fosfatos que es un lipido insertado en la membrana, y por una enzima que es la oligosacaril transferasa se transfiere estos 14 azucares al grupo amino de la asparagina, de esa manera la asparagina queda con el resto de los 14 azucares insertados en el grupo amino
La n-glicosiacion es importante porque marca el estado de plegamieno de las proteínas es importante entonces para el plegamiento de las proteínas. Teniendo la proteína resien sintetizada que esta desplegada con el resto de n-oligosacaridos donde los tres ultimo azucares son glucosa, esta proteína así marcada va a sufrir una eliminación de estas dos ultimas glucosas por una enzima, entonces nos va a quedar una proteína con un resto de hidratos de carbono con una glucosa terminal, esta glucosa va a ser reconocida por una chaperona que esta en lamemebrana del retículo hacia el lado del lumen del retículo (pueden ser calnexina o calreticulina) y esta proteína va a ayudar a la proteína recién sintetizada a llegar a su correcto plegmiento, una enzima que es una glucosidasa va a cortar la glucosa terminal y va a eliminar a la proteína de la unión caldexina, la proteína libe va a plegarse en forma correcta y por lo tanto puede salir del retículo con el resto de hidratos de carbono. En cambio si la proteína no se pliega correctamente entra en un ciclo que por medio de una glucosil transferasa se le agrega al oligosacárido unido a la asparagina una glucosa y esa glucosa vuelve a marcar a la proteína papra que vuelva a ingresar al ciclo e interactue con la calnexina. 
El ciclo se realiza hasta cierto punto porque en ese resto de n-oligosacaridos la proteína tiene un temporizados que es la manosa, exite una hidrolisis en una manosa que es muy lenta causada por una enzima llamada manozidasa, cuando la manosa se hidroliza la proteína no puede volver al ciclo para plegarse correctamente, entonces la proteína mal plegada por un translocador sale del RER y llega al citosol que por una n-glucanasa pierde el resto de oligosacáridos, la proteína va a ser ubiquitinada 4 veces y esa marcación la va a dirigir hacia el proteosoma en donde la proteína va a ser degradada. 
Cuando las proteínas están mal plegadas se activa en el retículo lo que se conoce como respuesta a las proteínas desplegadas o mal plegadas. Estas proteínas mal plegadas van a inducir cambios conformacionales en 3 proteinas en la IRE 1, PERK y ATF6. En la IRE1 la va a fosforilar y dimerizar y eso va a producir la maduración controlada de un mRNA que va a inducir la traducción de una endoribonucleasa, esta proteína va a trnaslocar al núcleo y va regular genes que va a activar la ranscripcion de proteínas chaperonas para ayudar al plegamiento de las proteínas, por otro lado la PERK se va a fosforilar y se va a activar y esto es un factor de inicio de traducción que va a regular genes que va a activar la transcripción de proteínas chaperonas, ATF6 la proteína es clivada en el Golgi es una proteína que va a ctivar genes para la transcripción de chaperonas.
Lo que pasa con la IRE1: DIAPO ultima
Trafico vesicular secreción y endocitosis 
Parte 1
El transporte tanto de proteínas solubles como de proteínas asociadas a membranas o lípidos asociados a membranas, desde el retículo endoplasmático hacia la superficie celular va a ser mediado a través del tranporte en determinadas vesículas. Lo mismo va a ocurrir desde la superficie celular hacia el retículo plasmatico de las sustancias que la célula capture en la superficie y la lleve a distintos compartimientos de la ruta endocitica. Este transporte de proteínas solubles, proteínas y lípidos e hidratos de carbono va a ser meiado por vesículas. Estas vesículas van a constituir los medios de transporte de estas suntacias y estos transportes vn a seguir rutas que se encuentran bien especificados genéticamente en la via celular. 
RUTAS DIAPO
Las vesículas van a gemar desde un compartimiento dador y se van a dirigir hacia el compartimiento de destino o hacia la membrana plasmática donde van a sufrir un proceso de fusión, gracias a ese proceso van a liberar el contenido que llevaban en su lumen en el lumen del compartimiento de destinoo si van hacia la membrana plasmática lo liberan hacia el espacio extracelular. 
Estas vesículas no andan flotando sino que están perfectamente dirigidas desde el compartimiento dador hacia el compartimiento de destino ya que ellas se desplazan gracias a proteínas que se conocen como proteínas motoras sobre calzadas especificas. Entonces esta vesiculas van a ser transportadas en forma especifica a través de calzadas que van a estar consituidas por los elementos del citoesqueleto, en generar las vesículas se transporta sobre los microtúbulos gracias a proteínas motoras que se conocen como dineínas o quinesinas.
Cuando las vesículas se encuentran mas cerca de la membrana plasmática pueden transportarse o caminar sobre filamentos de actina. 
Mecanismos moleculares de formación y fusión de vesículas
Para que la vesícula pueda gemar tiene que estar rcubierta.
En la vesícula podemos observar que tenemos unas proteínas tranmembrana, estas vesículas son proteínas transmembranas de carga que tienen que ser transportadas son proteínas de carga de membrana. Ósea se sintetizo una proteína de membrana y tiene que ser transportada desde su lugar de síntesis hacia otra membrana celular. Otras proteínas transmembranas se encuentran interaccionando con otras proteínas (rojo oscur) estas son proteínas son receptoras que van a reconocer en su domnio luminal aquellas proteínas solubles que fueron sntetizadas y translocadas completamente en el retículo endoplásmico y que tienen que ser transportadas desde el RE hacia un compartimiento de destino y para poder ser trancportadas tienen que interaccionar con estas proteínas receptras. Además de las proteína de carga en la memebrana tenemos unas moléculas llamadas PPI que son unos lípidos de membrana, otra cosa que tienen que tener son las proteínas de unión a GTP y además las proteínas V-SNARE. Obviamente una vesícula recubierta lo que tiene que tener proteínas de cubierta:
· Proteínas de cubierta: son 4 las proteínas que pueden estár recubiendo una vesícula, las proteínas que forman la cubierta de Clatrina, de COPI, de COPII y retromero.
La función de las proteínas de cubierta es por un lado es darle curvatura a la membrana, van a favorecer que la vesícula emerga y protuya hacia el citoplasma con forma de vesícula, ósea le van a dar la forma a la vesícula.
Por otro lado van a tener dominios que le van a permitir seleccionar y concentrar las proteínas de carga, es decir las proteínas que tienen que ser transportadas entre distintos compartimientos en la membrana. 
Las vesículas recubiertas por la clatrina son aquellas que van a emerger desde la membrana plasmática hacia el interior celular o desde la red del trans Golgi en dirección a la superficie celular pero dirigiéndose a los endosomas tardíos o al lisosoma.
Las vesículas recubiertas por COPII van a ser aquellas que están gemando desde el re y que se dirigen a la red del cis Golgi
Las vesículas que van a estar recubiertas por COPI son aquellas que emergen de la red del trans Golgi y que se dirigen a cisternas aneteriores del golgii o vesículas que emergen del Golgi medial o de la red del cis Golgi y se dirigen en un transporte retrogrado hacia el retículo endoplásmico.
Las vesículas que van a ener una recubierta de retromero son en general las que se forman a partir del endosoma tardío y son las que devuelven al aparatodel Golgi ciertas proteínas que son necesarias para el transporte de proteínas del lisosoma. 
Las vesículas tambien están asociadas a diferentes GTPasas (diapo)
Las GTPasas son proteínas en este caso monomeniras que son capaces de unir GTP, ósea proteínas de unión GTP, estas proteínas cuando se encuentran unidas a gtp se encuentan en forma activa y cuando ese gtp es hidrolizado por la propia actividad de gtpasa que tiene la proteína ese gtp se convierte en gdp y es inactivada, luego esta proteína inactivada gracias a un intercambiador de nucleótidos de guanina puede intercambiar GDP por GTP y vlverse a contituir en una proteína G activa, cuando la proteína esta activa interactua con proteínas y gracias a mecanismos de regulación alostérica las va a activar, las proteínas G monoméricas son las Arf (asociada a vesículas recubiertas por COPI y clatrina) y Sar1 (asociada a COPII) en ambos casos las gtpasas van a participar del reclutamiento de estas proteínas de recubierta. 
Otra proteína que participa en el transito vesicular es la Rab, es una proteína G pequeña que va a participar del direccionamiento y del anclaje de la vesícula en el compartimiento de destino, en todos los casos estas proteínas g pequeñas unidas a las membranas ya sea en le superficie del comparimiento que gema o en la membrana del compartimiento que se direcciona van a generar una nueva superficie de reconocimiento, permitiendo que la vesícula interaccione con la membrana de compartimiento de destino adecuado o que sobre la membrana que se esta gemando gracias a esa superficie de reconocimiento se forme la cubierta adecuada. 
· Polifosfoinocitidos PPIs: son lípidos derivados del fosfatidilinositol (glicero fosfolípido que contiene dos hacidos grasos y en el tercer carbono un fosfato unido al inositol), este fosfolípido se encentra distribuido asimétricamente y en general se encuentra en la hemicapa citosólica de las membranas celulares. El anillo del inositol puede ser fosforilado en distintas posiciones (mediante quinasas) todas las fosforilizaciones van a generar distintas ormas del anillo de inositol, esto va a generar en el espacio una región de reconocimiento para las proteinass que tengan el lugar exacto que encastre en estas formas de enositol fosforilado. Los distintos fosfatidilinositol en las hemicapas citosólicas de las membranas generan superficies de reconocimiento. Estos son característicos de los distintos compartimientos.
Función de los PPI generan superficies de reconocimiento y anclaje. DIAPO 
En la formación de la vesícula cubierta de clatrina la clatrina se ubica en forma de “cesta” por unión no covalente de subunidades de clatrina (triscleriones), en la formación de vesículas de clatrina tambien necesitamos prteinas adaptadoras de tipo 1, de tipo 2, de tipo 3 y de tipo CGA a parte de las GTPasas ARF.
Para que se forme y geme una vesícula recubierta de cleatrina necesitamos la proteína que necesita ser endocitada, esta proteína va a ser un receptor que va a favorecer la endocitosis de la molécula carga, al dominio citosólico se va a unir un dominio de la proteína adaptadora, y para que esta ultima se una va a interaccionar con un fosfatidilinositol (4,5) di fosfato que se encuentra en la membrana citosólica y en este caso de la membrana plasmática. Una vez que van interaccionando las proteínas adaptadoras con el dominio citosólico de la proteína que lleva la carga de la PPIs hay un cambio en la conformación de la proteína adaptadora que permite su interacción con las moléculas con los trisqueliones para que se vaya formando alrededor de la molécula que va gemando para formar la cesta forma particular de esta vesícula, en esta formación particia la GTPasa ARF y participa otra GTPasa que es la dinamina la cual va a favorecer el acercamiento de las membranas en el cuello de la vesícula y la fision de la misma completándose la cubierta de clatrina. Una vez que la vesícula emerge rápidamente tiene que ser desnudada ósea que pierde su recubrimiento de clatrina y para ello es necesario que se hidrolise ATP el cual va a ser hidrolisado por una hsp70 con actividad atpasa, esta hidrolisis de ATP va a brindar la energía para que se produzcan los cambios conformacionales necesarios para que se desprenda la cubierta de clatrina y las proteínas adaptadoras de la molécula carga, pero además de la hidrolisis de ATP para que se desprenda la proteína adaptadora de la superficie se necesita que desaparezca la PIP(4,5)2, para ello asociado a la proteína dinamina se encuentra una fosfatidiinositol fosfatasa que lo que va a ser es hidrolizar el fosfato del PIP(4,5)2 cmbiando entonces la especie de PI que se encuentra asociado a la membrana y favoreciendo el desprendimiento de la proteína adaptadora y de la dinamina. 
Vesícula recubierta de COPII: en la membrana del retículo endoplásmico se encuentra una proteína qe es Sar1-GEF (sec 12) es un factor intercambiador de guanina cercano a la membrana del retículo endoplásmico encontramos una proteína soluble que es la Sar1-GDP (cuando esta unida a gdp esta inactiva), esta prtoeina tienen una hélice anfipática escondida o replegada sobre su estructura mientras se encuentra unida a GDP, cuando la proteína se acerca al retículo endoplásmico la proteína sar1-GEF va a favorecer el intercambio de GDP por GTP que va inducir un cambio conformacional que va a permitir que la hélice anfipática que se encuentra replegada sobre el bolsillo hidrofóbica del la proteína Sar1-GDP pueda extenderse e insertarse en la hemicapa citosólica de la membrana del retículo endoplásmico. Cuando la proteína Sar1 se activa lo que genera sobre el retículo endoplásmico es una nueva superficie de reconocimiento.
Esta nueva superficie de reconocimiento va a ser reconocida por la proteína Sec24 que junto con la proteína Sec23 van a contribuir a la formación de la cubierta COPII. La proteína Sec23 va a reconocer que ahora la membrana del retículo tiene una proteína Ser1 inserta en el, esto va a favorecer la interacción entre el complejo proteico con la membrana, la protein Sec24 va a tener los sitios de reconocimiento para los dominios sitosolicos de las proteínas transmembrana de carga o de los receptores de carga que van a transportar moléculas solubles de carga.
Una vez que Sec23 y Sec24 reconocen a la proteína Sar1-GTP se induce el cambio conformacional de Sec24 para que pueda unirse al dominio citosolico de la proteína de carga, va a interaccionar con Sec23 y Sec24 las proteínas de Sec13 y Sec31 que van a terminar de formar la cubierta de tipo COPII que va a favorecer la gemación de la vesícula desde la membrana del retículo endoplásmico y que se va a dirigir a la red de cis Golgi. Una vez que la vesícula se va formando las membranas se fisionan de manera similar que la caltrinas y para que la membrana se desnude (se desprenda de su cubierta) se va a hidrolizar el GTP que se encuentra unida a la GTPasa, si se hidroliza pasa a ser GDP la proteína Sar unida a GDP va a replegar su cola hidrofóbica se desprende de la membrana y allí se desprende todo el complejo.
De manera similar que se forman ls COPII se orman las vesículas recubiertas por COPI.
COPI: En la membrana del Golgi voy a tener una proteína ArtGAP1 que va permitir que la proteína Art solluble que tiene unido un GDP intercambie GDP por GTP y se pueda insertar a través de una cola hidrofóbica en la hemicapa citosólica de la superficie del aparato de Golgi. Esta inserción de la proteína Art va a generar una nueva superficie de reconocimiento que va a permitir la interacción del complejo de COPI llamadas cada una de estas proteínas coatomeros (formada por 7 subunidades), van a interaccionar no solo con la superficie generada por Art-GTP sino que tambien van a interaccionar con el dominio citosólico de la proteína cargo. Se van a ir formando entonces alrededor de la vesícula gemandola cubierta de COPI una vez formado ocurre la fision y luego se produce una hisdrolisis de GTP a GDP que produce un cambio conformacional en la proteína Art-GTP la cual se vaa desprender de la vesícula junto con todo el complejo dejando la vesícula desnuda. En este caso además participan otras proteínas ayudando a la formación del cuello de la vesícula Bars las cuales tienen dominios de unión a lípidos, pero se unen en la zona de la memebrana donde hay una determinada curvatura, y para que se forme la curvatur se necesita la presencia del acido fosfatídico proviene de la hidrolisis de la fosfatidil colina, para que esto suceda necesitamos la participación de la proteína PLD2. Al fosfatídico se unen las proteínas Bars
Cubierta de retromero: se une a membranas de endosomas y participan en el transporte de proteínas que tienen que ser recuperadas desde el endosoma hacia el aparato de Golgi. Estas cubiertas están formadas por dos proteínas, una es la SNX1 que tiene un dominio BAR (dominios de unión a sons curvas de la membrana) y va a tener un dominio PX el cual va a interaccionar con PI3P. luego tenemos los complejos de proteínas VPS35, 29 y26 el cual tiene el dominio de unión al dominio citosólico de la proteína carga que se va a transportar desde los endosomas hacia su membrana de destino. 
La cubierta sabe que se tiene qu unir a determinados tipos de membrana porque esta codificado por señales de clasificación que son secuencia de aminoacidos presentes en las proteínas que se encuentran en el lumen del compartimiento o en los dominios citsolicos de las proteínas transmembrana que tienen que ser transportadas o de los receptores de las proteínas solubles que tienen que ser transportadas.
Para indicarle a la vesícula a que membrana se tiene que dirigir se encuentran las proteínas Rab, son proteínas G pequeñas se encuentran favoreciendendo el direccionamiento y el anclaje de las vesículas al compartimiento indicado, cada una de las membranas de los distintos compartimientos celulares poseen una proteína Rab característica. La proteínas Rab son reconocidas por proteinas en las membranas de destino ue se denominan efectores de las proteínas Rab, cuya interacción van a permitir el acercamiento de las membranas y la fusión de las mismas. 
Las proteínas Rab de la misma que las otras GTPasas se encuentran en el citoplasma, y tienen una colita hidrofbica que es un terpeno y unen GDP en el citoplasma, esto va a hacer que inteaccione con una proteína inhibitoria. Cuando la proteína Rab se acerque a la membrana indicada gracias a dos proteínas una que desplace a la proteína inhibidora y una proteína GEF que permite el intercambio de GDP por GTP cuando la Rab intercambia expone su colita de prenilo y se inserta en la membrana adecuada que va a permitir la interacción con el efector de Rab adecuado que se encuentra en la otra membrana o en donde la vesícula tenga que interaccionar.
Las proteínas SNARE: son proteínas que se encuentran o en la vesícula V-SNARE o en la membrana del compartimiento con el cual la vesícula se va a fusionar T-SNARE. Estas proteínas participan completamente del proceso de fusión y se caracterizan por tener secuencia repetidas de aminoacidos cargados y aminoacidos hidrófobos. En la región citosólica de las proteínas SNARE estos aminoacidos forman hélices y cuando estas hélices de las proteínas T-SNARE y V-SNARE se acercan se forman complejos trans snare que libean una gran cantidad de energía lo que favorece a una mayor interacción, y lo que hacen es acercar a las membranas de la vesícula con la membrana del compartimiento que se tiene que fusionar. En el proceso de acercamiento por la proteínas SNARE se va extruyendo el agua de manera de no tener agua y que se puedan fusionar primero las hemicapas citosólicas y luego las luminales de manera que las vesículas queden en contacto con el interior del compartimiento que se fusiono. 
Cuando se fusionan las membranas se fusionan se forma el complejo cis-SNARE y para separar la vsnare de la t-snare necesito hidrolizar atp que va a llevar a cabo la proteína NSF y proteínas accesorias que forman un complejo de hisrolisis de ATP y de recuperación de las proteínas SNARE.
MECANISMO DE TRANSPORTE desde el RE hacia y a través del complejo de Golgi:
El aparato de Golgi esta formado por un conjunto de cisternas que se encuentra en las proximidades del núcleo celular, tienen una región de entrada y una región de salida. La región de entrada que se encuentra próxima al RE se denomina cara cis del aparato del Golgi, mientras que la región de salida que es la que se encuentra enfrentando a la superficie celular se la denomina cara trans del aparato de Golgi. 
El aparato de Golgi en la región cis por una región que se denomina red del cis Golgi, que esta formada por vesículas o saculos que son túbulos vesiculares, después de dicha región tenemos la región de saculos o vesículas que forman cisternas cis, cisternas mediales y cisternas trans, estas tres tipos de cisternas forman en lo que se denomina en su conjunto un dictiosoma que es un apilamiento de tres tipos de cisternas distintas; luego direccionado hacia la superficie celular encontramos la red del trans Golgi a partir de la cual emergen las vesículas que van a ser direccionadas a distintos comparimientos. 
Cada una de las regiones del Golgi va a cumplir distintas funciones. En su paso por el aparato de Golgi las sustancias tanto los lípidos como las superficie que vienen desde el RE y se dirigen hacia la superficie celular van a sufrir modificación fundamentalmente en el agregado o en la modificación de los azucares que traen en el RE, 
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Al aparato de Golgi van a llegar las proteínas unidas a un oligosaarido que van a ser ricas en manosa, ese residuo glucosídico tienen que eliminar las glucosas qu tienen unidas las manosas por distintas glucosidasas tambien va a eliminar un residuo de manosa, esto forma parte del control de calidad del plegamiento de las proteínas. 
Tambien en el aparato de Golgi se pueden modificar o glucosilar proteínas en residuos de serinas o treoninas, la n-glicosilacion ocurre en el RE y eso es modificado en el AdG.
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Las vesículas que van a contener las proteínas que tienen que ser transportadas van a gemr desde el RE favorecida por la formcion de una cubierta de tipo COPII, gracias a esta cubierta las vesículas van a gemar del retículo se va a desnudar la vesícula y esas van a empezar a hacer fusiones de tipo homeotipica, ósea las mismas vesículas se van a fusionar formando túbulos vesiculares van a estar asociadas a proteínas motoras que van a permitir que las vesículas se desplacen y se dirijan desde la superficie del retículo hacia la red del cis Golgi de la cual van a pasar a formar parte. Por las proteínas SNARE se foman los túbulos vesiculares. Cuando las vesículas emergen del RE y van del retículo al aparato del Golgi puede ocurrir que algunas de las proteínas que son propias del RE se escapen del RE y se dirigan hacia las cisternas del Golgi y esto no tiene que pasar, para recuperar estas proteínas van a ser reclutadas por receptores adecuados que se encuentran en las membranas del AdG, esos receptores van a tener un dominio citosólico que van a ser reconocidos por las vesículas de COPI se van a formar vesículas recubiertas por COPI y van a gemar de los distintos lugares del aparato de Golgi para dirigirse en lo que se conoce como transpore retrogrado o via de recuperación hacia el RE. Esto ocurre gracias a que en la mediada que la vesícula se aleja del Re las vesículas se van acidificando en su interiroi y la disminución del Ph en las cistenas que forman el trans Golgi va a favorecer el cambio conformacional en la proteína residente del RE que se escapo, y ese cambio conformacional va a exponer por el péptido KDEL que es lo que va a ser reconocido por el receptor KADEL y que es lo que va a favorecer la formación de COPI para recuperar a las proteínas residentes del AdG. 
Avance de la proteína del cis Golgi al trans Golgi: 
· modelo de transporte vesicular estático: geman las vesículas desde el RE forman las estructuras tubulo vesiculares y una vez que llegan a la red de cis-golgi se quedan ahí y las proteína setransporta por vesículas de una cisterna a la otra. 
· Modelo dinámico: cuando el agregado tubulo vesicular llaga a la red del cis-golgi este agregado no se queda en el mismo lugar sino que va madurando y avanzando gracias al desplazamiento que pueda tener sobre los microtúbulos y además se va acidificando en su lumen, va cambiando la composicion en cuando a la composición proteia y lipídica y se dice que las vesículas van madurando de manera tal que las cisterna del agregado tubo vesicular que llega a la red cis-golgi madura pasa al dictiosoma y luego esa misma cisterna se convierte en la red del trans-golgi. 
Transporte vesicular, secreción y endocitosis 
Parte 2
Etapas tempranas del transporte vesicular: son las que ocurren entre el RE hasta la red del cis-golgi a través de las cisternas a la red del trnas Golgi.
Red del trans-Golgi y superficie celular: todos los productos que llegan al trans-golgi son clasificados para ser direccionados a su destino final, el cual puede ser los lisosomas o la superficie en una via que se conoce como secreción constitutiva o puede ser la superficie celular en una via que se conoce como secreción regulada que va a tener una estación intermedia antes de llegar a la superficie celular en vesículas de almacenamiento.
Cuando uno quiere visualizar lisosoma por microscopia de fluorescencia uno utiliza un anticuerpo anti-LAP1 que es una proteína asociada a la membrana de los lisosomas por lo tanto si yo hago una inmunofluorescencia indirecta y veo fluorescencia en estructura de tipo vesiculares puedo decir que estoy evidenciando en este caso por fluorscencia los lisosomas celulares.
Los lisosomas tienen distintos tamaños, son muy heterogéneos, tienen diferentes formas. Dentro de los lisosomas thay un conjunto de enzimas hidrolasas, van a dedicarse a degradar sustancias, generalmente hidrolizando enlaces covalentes (hay enzmas que van a trabajar sobre los fosfolípidos, proteínas, ácidos nucleicos, etc.) la características que tienen estas enzimas es que actúan a un Ph acido y este ph acido dentro del lisosoma se mantiene gracias a la bomba de protones que tiene la membrana de lisosomal, la bomba de protones va a bombear contantemente protones al interior del lisosoma de manera de mantener elevada la concentración de protones en el interior del lisosoma, para mantener la neutralizada necesito además de la bomba de protones un transportador ¿de que?.
Además de la bomba de contraion voy a tener que tener otro tipo de transportadores que van a permitir el transporte de las sustancias mas pequeñas (los monómeros obtenidos de la degradación de las sustancias que lleva el lisosoma), de esta manera al transportar estas sustancias desde el interior lisosomal hacia el citosol las sustancias van a ser aprovechadas por las células para construir sus moléculas y mantener así su estructura y su función.
Las enzimas lisosomales dentro del lisosoma para poder actuar tienen que fucionarse con un endosoma tardío (es un endosoma que trae sustancias desde la superficie celular). Cuando el lisosoma conteniendo las enzimas lisosomales se funciona on un endosoma tardío forma lo que se llama endelolisosoma, dentro de este ocurre la degradación de todas las moléculas que provienen desde la superficie celular y una vez que se han degradado todas las estructuras y volvemos a obtener un lisosoma constituido básicamente por enzimas, decimos que ha ocurrido la maduración de los lisosomas generados en la red del trans-golgi. En los lisosomas se degrada todo lo que proviene de la superficie celular, ya sean partículas pequeñas que ngresan a la célula que ingresan por pinocitosis, o bacterias y partículas mas grandes que entran a la célula por fagocitosis.
Tanto los fagosomas que se generan en la fagocitosis como los endosomas tardíos que provienen de los procesos de pinocitos se van a fusionar con las vesículas lisosomales para formar los endolisosomas y culminar la digestion de las sustancias. Tambien podrían fusionarse con los lisosomas las vesículas autofagicas (la autofagia es un proceso que se prodce dentro de la célula para degradar en general compartimientos u organelas celulares por vejez, daño o periodo de inanhicion)
Síntesis y transporte de enzimas lisosomales en el aparato de golgi:
Una vez que la proteína glicosilada pasa el control de calidad del RE es llevada por las vesículas hacia la red del cis-golgi donde va a sufrir la primera modificación y es el agregado de un resto de fosfo n-acetilglucosamina que es adicionado a uno de los residuos de manosa (esta conversión del resto glucosídico es catalizado por una enzima que se encuentra en la red del cis-golgi y es la n-acetilglucosaima fosfotransferasa). Sigue el camino hacia la cisterna del trans-goglgi dentro del dictiosoma donde va a sufrir la elimnacion del resto n-acetilglucosamina a través de la acción de una fosfo diasterasa que se encuentra presente en esta csterna, lo que queda adicionado al resto glucosídico de la enzima lisosomal va a ser nada mas que el resto de manosa 6 fsfato la cual va a ser la señal que va a ser reconocida por una proteína receptora que se encuentra en la red del trans-golgi. Cuando las proteínas transmembrana del trans-golgi reconocen el resto de manosa 6-P interaccionan con el lo que va a ser la señal para que gemen la vesícula recubierta de clatrina la cual luego sufre el denudamiento y es dirigida hacia el endosoma tardío. 
La vesícula tiene asciada a la membrana una proteína rab característica y además va a tener una V-SNARE la proteína Rab va a ser reconocida por el efector de rab sobre la membrana del endosoma lo que hae que se acerquen las membranas y se fusionen por las proteínas SNARE. El contenido dentro de la vesícula lisosomal de transporte va a ser vertido al lumen del endosoma tardío, la enzima lisosomal va a ser lierada de su interacción con el receptor porque dentro del endosoma tardío el ph es menor que el que se encontraba en el lumen de la red del trean-golgi. Esta diferencia de ph con la que tenia el trans-golgi va a permitir que hay un cambio conformacional en la estructura proteica y que pierda la interaccio con el receptor de la manosa 6-fosfato. 
La enzima entonces queda en el lumen del endosoma para comenzar su actividad, mientras que el receptor gracias a la acción de una cubierta de retromero que favorece la gemación y a la interacción con moléculas de cleatrina van a poder retornar a la red del transgolgi donde van a comenzar un nuevo ciclo de transporte de enzimas lisosomales. Este receptor puede volver a las cisternas del trans-golgi para volver a comenzar un ciclo o puede dirigirse hacia la membrana plasmática. 
El hecho de tener un receptor de manosa en la membrana plasmática porque muchas veces a través del trans-olgi se excapaban enzimas constitutivas hacia el medio extracelular, entonces los receptores tienen como función recuperar esas enzimas que se escapan a través de vesículas recubiertas de cleatrina a través de endcitosis, y una vez que son recuperadas esas enzimas van a terminar dentro del endosoma tardío. De este modo se aumenta la eficiencia de la producción de enzima lisosomales y de favorecer su llegada.
Estos receptres tambien servían en ese lugar para captar enzimas mandadas por el exterior y llevarlas dentro de la célula, sirve como terapia para pacientes que nacen con defectos en las enzimas lisosomales.
Transporte desde el trans-golgi al exterior celular: EXOCITOSIS
Tenemos dos vias principales, la de secreción constitutiva y la regulada
Via de secreción constitutiva: Es la que se denomina la via por defecto lo que quiere decir que son vesículas que geman desde el trans-golgi y esas vesículas pueden llevar secreciones basales que la célula secreta constantemente y las vsiculas que tambien transporte lo importante en la membrana, es decir vesículas que están transportando parte de lípidos para recambiar los lípidos en la membrana o proteínas que van a ser las que se encuentran y cumplen funciones en la membrana plasmática. Entonces son vesículas