informe de lab extracion de pigmentos - Adelfo Morales Gonzalez

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EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES (Pereskia guamacho)
OBJETIVO
· Obtener los pigmentos fotosintéticos extraídos por la sustancia derivada de la hoja Pereskia guamacho.
· Identificar la tonalidad del pigmento que poseen los cloroplastos de las hojas Pareskia guamacho por el método de cromatografía.
INTRODUCCION
El guamacho (Pereskia guamacho) es una especie de planta que pertenece a la familia de las cactáceas y es uno de los pocos cactus con hojas desarrolladas y con aspecto de árbol. Es un árbol de hasta 8 metros de altura, con el tronco marrón, copa redonda de hasta 3 metros de diámetro, hojas simples, alternas, suculentas.  Las flores son de antesis diurna de un color amarillo brillante, muy abundante durante la floración, frutos comestibles; posee crecimiento lento. Sus frutos son globosos, verde amarillentos al madurar y contienen numerosas semillas negras (nurvado, 2016). La hoja del Guamacho contienes una sustancia viscosa que al obtener su extracto se obtiene de esta propiedades de gran beneficios; La cataplasma de hojas y aceite se aplica en el pecho como expectorante; la misma cataplasma pero sin aceite, obra como anti – inflamatorio, en el caso de músculos adoloridos. Las hojas se secan y se queman y el polvo de estas sana las quemaduras (puerta, et al, 2013). Entre otras propiedades que ofrece tanto la hoja como su tallo; también son los responsable del proceso de fotosíntesis, son capases de captar la energía lumínica y depende de qué color se refleja en sus hojas por medios de los pigmentos. En el siguiente informe se describe la práctica de laboratorio donde se procedió a obtener por medio de trituración la sustancia de la hoja, luego cuya sustancia se filtró para extraes el pigmento fotosintético y así lograr identificar por medio de la cromatografía los pigmento por su color.
MARCO TEORICO
El Guamacho es una especie de planta que pertenece a la familia de las cactáceas y es uno de los pocos cactus con hojas desarrolladas y con aspecto de árbol, Es un árbol de hasta 8 metros de altura, con el tronco marrón, copa redonda de hasta 3 metros de diámetro, hojas simples, alternas, suculentas. Las flores son de antesis diurna de un color amarillo brillante, muy abundante durante la floración, frutos comestibles; posee crecimiento lento. Sus frutos son globosos, verde amarillentos al madurar y contienen numerosas semillas negras. (Erevistas.saber.ula.ve/index.php/pittieria/article/view/6699/6510).
Todas las sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso (papel de cromatografía o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico (etanol), ya que las más solubles se desplazaran a mayor velocidad, pues acompañaran fácilmente al disolvente a medida que este asciende. Las menos solubles avanzaran menos en la tira de papel de filtro. La separación de mezclas contempla diversas técnicas basadas en las propiedades que poseen los componentes de la mezcla y a su vez si se encuentran en diferentes estados de la materia, entre esos se encuentra la filtración. (Villas, 2007)
Esta técnica de separación de mezcla cualitativa se basa en el principio de retención selectiva, y una de las primeras y más efectiva es la cromatografía en papel filtro, esta técnica es efectiva debido a que la separación se produce al momento en el que una de las sustancias líquidas asciende por un papel poroso, a distintas velocidades por diferencia de solubilidad y velocidad de difusión, conteniendo dos fases representativas, la fase móvil y la fase estacionaria. Cuando se observa la naturaleza, el color es una de las características que se destaca por la gran diversidad que presenta. En la naturaleza, el color cumple funciones importantes, entre ellas la capacidad fotosintética de los vegetales, ya que la principal molécula involucrada en la absorción de energía lumínica es la clorofila, uno de los pigmentos predominantes en la naturaleza. 
El color de las plantas también influye sobre el potencial de una planta para reproducirse. En particular, el color de las flores atrae a los polinizadores que transportan el polen y facilitan la fecundación, mientras que la pigmentación de frutas y semillas atrae a los animales consumidores que luego dispersan las semillas y la especie hacia nuevos espacios.
Los cloroplastos son los orgánulos celulares que en los organismos eucariontes foto sintetizadores se ocupan de la fotosíntesis, estos están limitados por una envoltura formada por dos membranas concéntricas y contienen vesícula, los tilacoides donde se encuentran organizado los pigmentos. Los pigmentos se caracterizan por absorber luz y presentar color por el reflejo de ciertos espectros de luz; en los vegetales las hojas, los tallos y las raíces contienen diversos pigmentos entre ellos las quinonas o flavinas (colorante de las flores), pero a pesar de esto son los pigmentos fotosintéticos que absorben la luz solar, esos pigmentos son la clorofila y los carotenoides. (Gilbert & Martin, 2014). Estos pigmentos presentan un grado diferente de solubilidad, pero pueden extraerse con solventes orgánicos cuando las células que los contienen se rompen lo cual permite su separación cuando una solución de la misma asciende por capilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste va ascendiendo. Entre más polar sea un compuesto, más fuertemente se adsorbe en la fase estacionaria, por lo que su migración a lo largo de ella es menor, siendo eluído (arrastrado) más lentamente por la fase móvil, que los compuesto menos polares ( Miller, E.V. 1994).
MATERIALES
- Mortero completo				- Alcohol 96º
- Gradilla					- Agua destilada
- Tubos de ensayo				- Benzeno o tolueno (a gasolina)
- Tubos de recogida				- Papel de filtro
- Embudo de cristal				- Hojas verdes (Guamacho).
METODOLOGIA Y RESULTADOS
· En esta práctica de laboratorio fueron llevadas las hojas del Guamacho (Pereskia guamacho) 
· Posteriormente fueron colocadas en un mortero 
· Luego le adicionamos aproximadamente 100ml de alcohol etílico
· Trituramos las hojas con el alcohol ya vertido también en el mortero
· Se agregó 50ml alcohol etílico y se siguió triturando 
· Luego filtramos el pigmento con la ayuda del embudo y se depositó en un tubo de ensayo.
· Se tomó el tiempo de filtración del pigmento
· Luego el pigmento filtrado fue depositado en una caja Petri
· Para finalizar colocamos un papel filtro doblado formando un ángulo sobre la sustancia (el pigmento), y se dejó reposar.
Esta práctica se basó en la extracción de los pigmentos fotosintéticos y su disolución en el alcohol etílico. Este procedimiento de triturar y romper las células de la hoja guamacho (Pereskia guamacho), tardó al alrededor de 19 minutos, todo con el fin de obtener los pigmentos que se hallaban encerrados en los cloroplastos. 
Esta sustancia paso por dos procesos de filtración ya que su consistencia era gomosa. En la primera filtración se utilizó una tela y una caja de Petri para depositar la sustancia, este proceso tardo 11 minutos, luego esta, pasó por una segunda filtración, pero esta vez con el papel filtro y con la ayuda del embudo puesto en un tubo de ensayo para depositar los pigmentos donde este proceso aproximadamente 22 minutos 
Fig. #01. Trituracion de las hojas de guamacho (Pereskia guamacho)
Fig. #02. Las hojas de guamacho (Pereskia guamacho) ya trituradas con el alcohol.
Fig. #03 Filtración del pigmento de guamacho (Pereskia guamacho)
Fig. #04 Filtrando con la ayuda del embudo en el tubo de ensayo 
Fig. #05 Sustancia ya filtrada en el tubo de ensayo
Fig. #06 absorciones de los pigmentos en el papel filtro
Fig. #07 Pigmentos obtenidos de guamacho (Pereskia guamacho)
Al romper las células en el mortero, lospigmentos que se hallaban encerrados en los cloroplastos pasan al alcohol, en la disolución extraída del vegetal, se hallaron pigmentos se presentaron en la cromatografía formando zonas de colores.
Al observar detenidamente la cromatografía, pudimos observar 4 colores que corresponden a distintos tipos de pigmentos fotosintéticos en la hoja de guamacho (Pereskia guamacho). Donde el primer color observado fue el amarillo que representa a las xantofilas, el segundo color fue el verde azulado que representa a la clorofila a, el tercer color observado fue un verde amarillento que representa a la clorofila b, y el cuarto y último color observado fue el naranja que representa a los pigmentos fotosintéticos caroteno.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La extracción de pigmento de las hojas de la especie Pereskia guamacho presentaron dificultad en su extracción debido a los exudados (polímeros naturales), que son estructuras gomosas que tapaban los poros del papel filtro por lo que para el procedimiento se filtró la sustancia primeramente en una tela para separar las sustancia gomosa de los diferentes pigmentos presentes en la hojas de Pereskia guamacho. En el segundo paso para una filtración más precisa de elementos que podían afectar los experimentos se pasó al filtrado en papel filtro. (Abed. 2015).
Al observar la cromatografía aparecieron cuatro bandas de diferentes colores que se posicionaron en el espacio de papel filtro dependiendo de su densidad y afinidad con el alcohol y el grosor de esta banda de acuerdo a la abundancia de pigmento presente en la disolución
Las primeras clorofilas fueron las xantofilas de color amarrillo y tonos de color olivo estas se obtuvieron en pequeñas cantidades. Luego la clorofila “a”, se obtuvo en mayor cantidad esto se debe a que la clorofila “a” representa más o menos el 75% en las plantas verdes y es de color verde azulado seguida por la clorofila beta de color verde amarillento y por último los carotenos que son de color amarrillo más intenso, y obtuvieron el cuarto en proporción en cantidad de pigmento esto debido a que son menos afines al disolvente (alcohol).
CONCLUCION 
Se pudo observar los diferentes tipos de pigmento que le dan la coloración a las hojas de Pereskia guamacho y la importancia que estos cumplen en el proceso fotosintético de los vegetales, para obtener la metería y energía para cumplir sus funciones vitales, además de como las diferentes tipos de tonalidades de estos pigmentos se encuentra presenten en los cloroplasto de las hojas y le dan color al reflejar o transmitir la luz visible constituyendo el sustrato fisicoquímico de la fotosíntesis.
BIBLIOGRAFIA
· Dina Abed El Kader, W. V. (2015). Uso potencial del exudado gomoso de Pereskia guamacho como aditivo en las industrias alimentaría y farmacéutica. venezuela : boletin del centro de investigaciones biologicas.
· Erevistas.saber.ula.ve/index.php/pittieria/article/view/6699/6510
· http:// blafar.blogia.com/2017/040901-los-pigmentos-vegetales.php
· nurvado, e. (7 de mayo de 2016). flick. Obtenido de flickr: https://www.flickr.com/photos/134135265@N04/27242609802
· puerta, a., barros, e., gutierres, j., costa, l., jimenez, l., & daza, v. (16 de junio de 2013). uso de plantas medicinales uniguajira.blogspot.com. Obtenido de uso de plantas medicinales uniguajira.blogspot.com: http://usosdeplantasmedicinalesuniguajira.blogspot.com/2013/06/guamacho.html
· Sarmiento, M. 2011. separación de pigmentos vegetales.
 
 ciencias basicas y aplicadas programa de biologia