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LABORATORIO DE MICOLOGÍA PRÁCTICA #4: ESTUDIO DE MICROCULTIVOS DE HONGOS EQUIPO #1: THELMA PATRICIA ORTEGA LÓPEZ YESSICA CAROLINA PÉREZ YESCAS PROFESORA LUCIA CASTILLON JUEVES 13 DE OCTUBRE DEL 2022 Objetivo ● Aprender la técnica de microcultivo de hongos para estudiar su morfología microscópica. Introducción Es una técnica adecuada para demostrar los finos aspectos microscópicos necesarios para realizar la identificación definitiva de algunos hongos o para preparar montajes semipermeables que pueden usarse en la enseñanza. Material ● Varilla de vidrio doblada en V esterilizada ● Portaobjetos y cubreobjetos esterilizados por separado ● Pipeta de 10 ml estéril ● Caja de Petri esterilizada ● Alambre recto ● Navaja o espátula chica ● Pinza chica ● Mechero Bunsen ● Glicerol al 10% en solución acuosa esterilizada ● Vaso con alcohol etílico ● Azul de algodón de lactofenol. Procedimiento Resultados Alternaria sp. observado en microcultivo de Agar Saburaud Discusión de resultados Durante esta práctica se realizó el microcultivo con éxito, el cual nos permitió realizar una preparación con azul de algodón, logrando así, la identificación de Alternaria sp. El cual, hongo filamentoso, saprofito, perteneciente al filo Ascomycota y al grupo de los dematiáceos, caracterizados por presentar una coloración oscura. Microscópicamente se observan conidióforos simples, tabicados, de forma alargada u ovoide. Conclusión Al concluir esta practica se cumplieron con los objetivos, al lograr realizar con éxito el microcultivo de Alternaria sp. y de igual manera lograr ver con claridad su morfología microscópica. Investigación Escoger un hongo de los tres de la práctica 2 e investigar cómo se observaría el resultado del microcultivo en el cubreobjetos y en el medio de cultivo 1. Realice un dibujo del microcultivo y mencione sus partes 2. Anote las ventajas y desventajas de los microcultivos. Ventajas Desventajas Se observan las estructuras con facilidad sin distorsionarse o alterarse. Las estructuras de los hongos pueden romperse. Se ven las estructuras morfológicas permitiendo así identificar el agente. Se puede presentar dificultad al observar. Se logran identificar varios hongos. Mala determinación de los hongos. Se logran identificar varios hongos. 3. ¿Qué especies de hongos no pueden cultivarse con esta técnica? Este procedimiento permite la identificación e identificación solo de estructuras microscópicas de hongos filamentosos. 4. Investigue los aspectos macroscópicos y microscópicos de los siguientes hongos. Coloque fotos o esquemas de las estructuras microscópicas de: a) Absidia sp. Morfología Macroscópica: Tamaño ilimitado, tiende a llenar las cajas de cultivo; En un inicio es de color blanca (2 a 3 días), después tiende a volverse grisácea; Es vellosa-algodonosa y seca. Morfología Microscópica: Micelio macrosifonado, cenocítico, ramificado y hialino, puede llegar a presentar rizoides rudimentarios e internodulares, aunque son difíciles de observar; Al ser un zygomiceto, presenta gran cantidad de esporangios (10 a 70μm de diámetro), con esporangióforos largos y una columela característica, ya que es grande y en forma de pera. b) Circinella sp. Morfología Microscópica: se caracteriza por esporangios globosos habitualmente envueltos por esporangiosporas amarillo marrón, se originan en delgados esporangióforos que característicamente se curvan sobre sí mismos. c) Phoma sp. Morfología Macroscópica: Su textura puede ser polvorienta o aterciopelada. Tiene diferentes coloraciones como un color Olivia, gris o marrón. Morfología Microscópica: Poseen hifas septadas, picnidios, conidios y clamidosporas (algunas sp.). Las hifas son hialinas. Los picnidios son grandes y redondeados y los conidios son unicelulares de forma ovalada. d) Trichoderma sp. Morfología Macroscópica: Pústulas algodonosas de un color blanco, eventualmente se compactan y esporularan tomando un color verde de textura granular, con conidióforos ramificados visibles alrededor de la pústula. Morfología Microscópica: Los conidióforos muestran ramas laterales pareadas las mismas que forman un ángulo de 90◦ con respecto al eje de donde surgen. fiálides individuales o en grupos y conidias de forma ovoidal y a veces globosa, además de presentar un color verde claro y los bordes lisos. e) Ulocladium sp. Morfología Macroscópica: Las colonias son de crecimiento rápido, marrón oliváceo o gris-negro y aterciopelados. Morfología Microscópica: Conidios multicelulares que se forman a través de un poro en un conidióforo geniculado elongado simpodial. Los conidios son típicamente ovoides. f) Verticillium sp. Morfología Macroscópica: Las colonias son delgadas, algodonosas y con variedad de pigmentos; blancos, verdes, rojos o rosados. Morfología Microscópica: Tiene conidióforo recto, tabicado y ramificado cuya terminación es en fiálides, con ápices puntiagudos. Los ameroconidios se producen en bolsas (gloisporas) presentando características hialinas y agrupándose en el extremo de la fiálide. No presentan clamidosporas Bibliografía ● Rodriguez, B. (2016) Atlas de identificación micológica. URL: https://atlasdemicologia.wordpress.com/ https://atlasdemicologia.wordpress.com/
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