LABORATORIO DE MICOSIS SISTEMICAS Y OPORTUNISTAS

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DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO MICOSIS SISTÉMICAS (PARACOCCIDIOIDOMICOSIS, COCCIDIOIDOMICOSIS E HISTOPLASMOSIS) Y OPORTUNISTAS (CÁNDIDA, CRIPTOCOCOSIS, ASPERGILOSIS, ZIGOMICOSIS)
3. La prueba de intradermorreacción tiene poco valor dx por reacciones cruzadas en hongos dimorficos de micosis sistémicas (patógenos primarios). Solo tiene valor por primo contacto o de manera epidemiológica siempre y cuando tenga una inmunidad celular sana. Si es un paciente hipoérgico las pruebas darán negativa. 
Si hay sospecha de una micosis sistémica por hongos dimórficos y se usa la prueba de intradermorreacción y es negativa es de MAL PRONÓSTICO, pero no es de diagnóstico. 
4. La histopatología depende del hongo o la variante clínica.
5. Los estudios radiológicos y tomografía sirven para ver el nivel de daño en hongos con capacidad de diseminarse en huesos, osteolíticas, pulmones y evaluar el compromiso de órganos internos. Sirve en presentaciones pulmonares, en micosis sistémicas invasivas. 
6. En la microbiología se busca la forma patognomónica de los hongos. Aquí se hacen pruebas directas y ESTA ES LA QUE HACE EL DIAGNÓSTICO DEFINITIVO ya sea por visualización microbiológica o histológica.
7. Pruebas serológicas e inmunológicas: Se determina el nivel de antígeno, producción de anticuerpos IgG e IgM. Los estudios serológicos e inmunológicos tienen valor Dx, pronóstico y evalúan la eficacia del tto, pero no absoluto. Es útil para pronóstico y control de tratamiento.
 
IgM = Valor Dx en etapas tempranas. Hasta la 4ta o 6ta semana de las manifestaciones del paciente. De ahí adelante se usa IgG prueba de Ac fijadores del complemento, esa es la del punto 7 anterior, para el control y tto de enfermedad.
La inmunodifusión en gel da positiva incluso antes de las manifestaciones, es más simple, pero demora más que la prueba de fijadores del complemento.
PARACOCCIDIOIDOMICOSIS 
Su forma patognomónica es esa levadura multigemante que es la que se ve en el estudio microbiológico y de histopatología. Esas levaduras MULTIGEMANTES confirman el Dx de una paracoccidioidomicosis. Hay que especificar que es multigemante porque una levadura nada más puede ser otra cosa (cándida, criptococo, etc). 
En la imagen puede ver las coloraciones usadas para la parte microbiológica e histopatológica. En histopatología (frotis) se usa más la de Giemsia y Gomori-Grocott (tiñe las paredes celulares de negro), luego PAS y Wright. Exudado, esputo, lavado bronquial, LCR, punción de médula ósea y biopsias.
Recuerda que este hongo afecta al LCR parecido a una meningitis bacteriana, pero hay un predominio celular mononucleares, esa es la única diferencia.
En pacientes severamente debilitados inmunológicamente, además de las levaduras se ven hifas verdaderas o pseudohifas y eso es de muy mal pronóstico. Eso también pasa en la coccidioidomicosis, pero a su vez muy esporádicamente. 
Los estudios RX son para daños a nivel pulmonar o casos diseminados para buscar el órgano dañado, porque este puede diseminar mucho.
A nivel histopatológico en la dermis hay granulomas supurativos, lee la diapo.
HISTOPLASMOSIS
AQUÍ EL KOH CARECE DE VALOR por falta de reactividad y especificidad. Recuerda que este es un hongo con levaduras que se reproducen intracelularmente, entonces para el Dx se hace frotis histopatológicos con tinciones de
· Giemsa
· PAS
· Gomori-Grocott (se tiñen las paredes de negro, es la imagen verde)
· Papanicolao
El histoplasma genera la levadura más pequeña que existe e intracelular. En el estudio histopatológico se ve la respuesta celular del paciente. Se verá si está en fase aguda, crónica, etc. 
Presentaciones subagudas o crónicas: Se ve muy poca cantidad de levaduras intracelulares
Presentaciones aguda o forma grave (px con compromiso inmunológico): se ven muchas levaduras.
Las radiografías son importantes porque tiene afinidad por los huesos y el SNC sin ser osteolítico. 
El hemograma mostrará una pancitopenia. Habrá fosfatasa alcalina elevada al igual que la VSG.
La forma infectante es la micelial y en el cuerpo tendremos las esférulas que tienen endosporas. El Dx se confirma con la esférula, la cual puede que tenga o no endosporas, dependiendo de su grado de maduración. La imagen que más se ve en la histopatología es el granuloma supurativo.
En el histopatológico se verá la presencia de eosinófilos, esta es la prevalencia celular tanto en sangre como en el estudio histopatológico. A su vez está muy aumentada la IgE. Estos hongos sí son osteolíticos por lo tanto las radiografías y tomografías también son útiles. 
MICOSIS OPORTUNISTAS
Se usa el examen directo con KOH para el Dx, se verán levaduras unigemantes junto con la prueba de tubo germinal, que consiste en incubar la levadura en suero y si la levadura al cabo de 2 o 3 horas germina y produce ese tubo, será tubo germinal positivo que tiene valor dx para Cándida Albicans.
Con tinción de gram, Zihel Neelsen, Griemsa, PAS, Gromon y Grocott, todo eso sirve. 
Se hacen pruebas de antígenos mananos como método inmunológico ya que la cándida expresa mucho manano cuando la cándida se está dividiendo mucho. Cuando la cándida se reproduce normalmente en la microbiota, ahí el manano no se libera porque esto es muy lento, pero si es una candidiasis invasiva si se libera el manano. También se buscan Ac anti manano para evitar falsos positivos. 
SE HACE CULTIVO PARA VER LA ESPECIE y el antifungigrama
CRIPTOCOCOSIS: MICOSIS OPORTUNISTA
Es un tipo de micosis oportunista con levaduras parecido a la cándida, pero visualmente o microscópico tendrá una cápsula que la difiere, es la única levadura capsulada, por lo tanto el examen directo con KOH no sirve por ser un reactivo incoloro que no muestra la cápsula y nos confundirá con una candidiasis.
SIRVE ES LA TINCIÓN NEGATIVA CON TINTA CHINA, la cápsula parece que brillara en el fondo negro. En histopatología sirve la tinción de Gromot y Grocott, Giemsa, pero la tinción de mucicarmin (la de abajo a la izquierda) es la más utilizada para el DX.
Hay pruebas serológicas, específicamente la prueba de aglutinación en latex porque diferencia y detecta antígenos capsulares. Esto es muy rápido, sensible. También se debe hacer el cultivo para determinar la especie, al igual que en cándida. Es importante que se haga el antifungigrama para cualquiera de las dos micosis. 
Vamos a ver 2 resultados: de fase inicial o fase tardía.
En las primeras fases de la enfermedad se ve una imagen mucilaginosa por el poco de cápsulas.
En la fase tardía se ve una imagen granulomatosa con numerosos linfocitos, eosinófilos y células gigantes.
Ocasionada por hongos del género aspergillus siendo la especie fumigatu y la más asociada a micosis invasiva. Observar los aspergilos es importante y hay que hacer cultivo para determinar la especie porque no todas las especies causan la enfermedad y el tto se direcciona en la especie.
El examen directo o histopatológico tiene valor dx donde se ve una hifa hialina septada con ramificaciones dicotómicas (crecen en forma de Y) y eso es importante para el dx. 
En el caso de la zigomicosis, esta es causada por múltiples géneros, caracterizados por hifas anchas o macrosifonadas aseptadas. Algunas veces se dividen dicotómicamente. Se diferencia con la otra porque esta no tiene septos y es más ancha. Además, esta es causada por varios géneros, la aspergilosis es causada por el mismo género pero tiene diferentes especies.
El cultivo es importante para determinar el género.