MICOSIS CUTANEAS Y SUBCUTANEAS LABORATORIO

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LABORATORIO
MICOSIS CUTANEAS - SUBCUTANEAS
MICOLOGIA CLINICA V SEMESTRE
DOCENTE: GLORIA MUÑOZ DEL VALLE
Tiña inguinal
Toma de muestra: 
TIÑA CAPITIS 
https://www.youtube.com/watch?v=x6m9NU6LQ5E
Blanco de calcofluor
Tiñe los polisacáridos de la pared de los hongos, siendo más sensible que el KOH, pero exige el uso de un microscopio de fluorescencia
Escamas: examen directo con KOH
Escamas: examen directo con KOH
Informe de laboratorio:
Se observan hifas hialinas septadas, compatibles con dermatofitos
Microsporun canis – Microsporun gypseum
Trichophyton mentagrophites T. rubrum T. tonsurans
MICOSIS SUBCUTANEAS
APOYO DX POR LABORATORIO CLINICO
MICOLOGICO
1. Examen directo
Forma más sencilla de hacer el Dx. 
Toma de muestra: recolectando las escamas con puntos negros o hemorrágicos y fondo con eritema. 
 DIAGNOSTICO DE LABORATORIO MICROBIOLOGICO
Directo con KOH
 EXAMEN DIRECTO
Para evitar confusión con casos de feohifomicosis, se debe recalcar que en esta no existen células fumagoides. 
La sensibilidad de la observación no se aumenta con calcoflúor, esta sustancia carece de afinidad por melanina.
La observación de células fumagoides o muriformes es patognomónica.
Todas las especies asociadas presentan esta forma y cuando nada más se observan filamentos la enfermedad corresponde a una feohifomicosis
Histopatológico 
La eliminación transepidérmica de elementos fúngicos y células inflamatorias con extravasación de eritrocitos, explican los puntos oscuros. 
En casos crónicos y severos predomina la fibrosis del tejido.
El 80% de los reportes son de tipo granuloma
supurativo y en <% granuloma tuberculoide, que contienen células fumagoides (sin hifas).
Si no se encuentran las formas parasitarias, el Dx no puede ser confirmado. 
Examen directo KOH
Biopsia
2. Cultivo
Sólo es una prueba de apoyo, sobre todo si se observaron células fumagoides en el examen directo. 
El estudio al microscopio permite definir la especie mediante la identificación de los tipos de reproducción: Phialophora, Rhinocladiella y Cladosporium.
DIAGNOSTICO APOYADO EN PRUEBAS INMUNOLOGICAS
Tiene poca importancia debido a que la enfermedad es superficial y a la facilidad con que se observan las formas parasitarias.
Por serología se han detectado precipitinas y anticuerpos fijadores de complemento, pero pierden relevancia por cruces inmunológicos
En pruebas intradérmicas son muy variables, lo que le resta utilidad. 
Fonsecae pedrosoii
Cladophilophora carrioni
ESPOROTRICOSIS: Sporotrhrix schenckii complex
Imagen granulomatosa supurativa
Serología 
De valor Dx + la sintomatología.
1) Clásica o metabólica: 
Fase levaduriforme: mas sensible. Uso epidemiológico.
Fase micelial: uso epidemiológico y Dx.
2) Celular: epidemiológico.
3) Somática: investigación.
Aglutinación con látex: sensibles y especificas (100%)
 1:40 sospechoso; mayor, infección.
Western blot): Confirmación diagnóstica de formas diseminadas, sistémicas y extracutáneas y monitoreo del tto. 
IFI directa e indirecta: muy específicas en comparación con las tinciones tradicionales (88% a 100%). 
De valor Dx y pronóstico.
Títulos > 1:80
Lectura: 24 a 48 h
Positiva: induración >5 mm
Una respuesta inmediata (de 5 a 10´) de eritema y prurito, sólo indica liberación de la histamina, sin valor Dx. 
Intradermorreacción con esporotricina:
dilución 1:1000 (0.10ml)
Serológicas 
Inmunodifusión
APOYO DX POR LABORATORIO CLINICO
Examen directo y tinciones
Sólo entre 5% y 10% de los casos se observan las levaduras en forma de puro o de navecillas o cuerpos asteroides.
Las tinciones convencionales (Gram, Giemsa) no hacen visibles estas levaduras.
Frotis teñidos con PAS (ácido peryódico de Schiff) y Grocott. 
Pueden ser útiles los anticuerpos fluorescentes. Técnicas de inmunofluorescencia.
En los casos de formas anérgicas (diseminados, pulmonares), si se observan levaduras de formas elongadas.
Cultivos
Se consideran el estándar de oro. 
Muestra: material obtenido del exudado de las lesiones, escamas, fragmentos de tejido, o esputo. 
Debido a que el complejo S. schenckii incluye a hongos dimorfos, se debe demostrar la fase levaduriforme y la fase filamentosa.
Histopatología
En raras ocasiones aparecen levaduras y/o cuerpos asteroides. 
Se oueden observar con tinciones especiales (Grocott y PAS), pplm en pacientes grupo II.
La histopatología está formada por una combinación de imagen granulomatosa supurativa y reacción piógena, constituida por tres zonas: 
- la central o crónica, con microabscesos de PMN (es en esta zona donde se llegan a observar los cuerpos asteroides.
MICETOMA
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
Toma de muestra
Se realiza mediante la selección de una de las fístulas activas. Esto por lo regular es señalado por el paciente debido al prurito que le ocasiona. 
Si la fístula está cerrada, se debe abrir con la ayuda de una aguja; es también de gran utilidad tomar las muestras mediante aspirado con aguja fina. 
En casos de micetomas sin fístulas o poco activos, la muestra debe ser a partir de la biopsia. 
Si el padecimiento compromete los pulmones, es útil el esputo o lavado bronquial.
Examen directo
Con lugol, solución salina, hidróxido de potasio (KOH) al 10%, o blanco de calcoflúor (para microscopia de fluorescencia). 
Con la observación de los granos es suficiente para establecer el diagnóstico. 
Con la ayuda del microscopio, se puede orientar la etiología
Cultivos
DATOS HISTOPATOLÓGICOS
La imagen histológica es inespecífica, pero a veces orientadora. 
Son de suma importancia, sobre todo cuando no se encuentran los granos al examen directo. 
En casos de granos blandos, hay un absceso de polimorfonucleares, fibrosis y vasodilatación. 
En granos duros, quizá se forme un verdadero granuloma
tuberculoide; 
En minimicetomas, aparece una reacción celular con 
fibrosis intensa alrededor de los microabscesos. 
La importancia de la biopsia está en determinar las características tintoriales y forma de los granos, porque ayudan a la identificación y tipificación de los agentes causales (bacteria u hongo).
Lo más importante son las características de los granos en la tinción con hematoxilina y eosina
LOBOMICOSIS: 
Lacazia loboi
La imagen histopatológica por lo general es de granuloma no necrótico, con extensas áreas de fibrosis hialina. 
RINOSPORIDIOSIS: Rhinosporidium seeberi
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