PREPARACION Y ESTERILIZACION DE MEDIOS DE CULTIVO

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TALLER 2. PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
1)En qué consiste la prueba de esterilidad y efectividad?
R: la prueba de esterilidad consiste en tomar de 3 al 5% del preparado, en el caso del medio de bacterias, se incuban las cajas a 37°c por 12 a 24 horas. Se observa si presenta crecimiento. En los medios para hongos se incuba a 25°c de 3 a 5 días y se observa si hay crecimiento. se emplea para verificar la ausencia de contaminación por hongos y bacterias en muestras de productos o materiales esterilizados [1].
La prueba de efectividad consiste en exponer la caja al ambiente para exponerla a los microorganismos del ambiente. Si hay crecimiento fúngico o bacteriano presente, la prueba de efectividad es positiva [1]. 
2) Nutrientes en la naturaleza y en los medios de cultivo 
R: los nutrientes habituales en los medios de cultivo se encuentran en la naturaleza. El medio contiene extractos de carne, levadura, de malta, etc. Extraídos de tejidos vegetales y animales con agua y calor. También está compuesto por azucares como la lactosa, la sacarosa y glucosa, que proveen de carbono a los microorganismos. Se utilizan fluidos, como sangre, en los medios empleados para el cultivo de algunos microorganismos patógenos [2]. 
3) Qué efecto tiene el calor sobre los microorganismos.
R: provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos. Su efectividad como método de esterilización depende de la temperatura y tiempo de exposición [1].
4) Que efecto tiene el método de calor seco en la célula (microorganismos).
R: produce desecación, efectos tóxicos por niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusión de membranas [1]. 
5) Que efecto tiene la luz ultravioleta sobre la célula (microorganismos).
R: forman dímeros de pirimidinas adyacentes afectando a las moléculas de DNA de los microorganismos, lo cual induce a errores en la replicación y por lo tanto la perdida de la viabilidad de las células [1]. 
6)Defina desinfectante, antiséptico, bactericida.
- Desinfectante: agente que elimina la carga microbiana total en superficies inanimadas [1].
- Antiséptico: controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente patógenos sobre piel y mucosas. Aplicable solo externamente sobre seres vivos [1].
- Bactericida: produce la muerte a las bacterias. Provocado por alguna sustancia como el hipoclorito de sodio, el cual se debe al HClO y al Cl2 que se forman cuando el hipoclorito es diluido en agua. Actúan sobre proteínas y ácidos nucleicos, oxidan grupos –SH y atacan grupos aminos, índoles y al fenol de la tirosina en los microorganismos [1]. 
7)Haga un esquema del autoclave con sus partes y su función
-Manómetro: indicador de presión dentro de la cámara. 
-Tuerca de tapa: dispositivo del mecanismo de aseguramiento.
-Válvula de control: válvula de cierre y apertura de purga. Permite controlar la presión dentro del autoclave.
-Contenedor de aluminio: chasis del autoclave. 
-Asadera: asadera en la parte lateral usada para levantar el autoclave.
-Asadera completa: permite levantar la parte superior del equipo. 
Figura 1: partes del autoclave [3]. 
8)Mencione los dos tipos principales de esterilización y explique cada uno de ellos.
· Calor: los microorganismos son susceptibles, en diferente grado, a su acción. Provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y procesos oxidativos irreversibles. Su efectividad depende de la temperatura y tiempo de exposición. En el método de calor húmedo utiliza el autoclave y el calor seco la estufa de esterilización [1]. 
· Radiaciones: su acción depende del tipo de radiación, tiempo de exposición y dosis de radiación. En esta podemos encontrar radiaciones ionizantes, que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y lipídicas de los microorganismos. No es utilizada en medios de cultivo porque producen alteraciones de los componentes. La radiación ultravioleta afecta a las moléculas de DNA debido a que forman dímeros de primidinas adyacentes que inducen errores en la replicación. Son poco penetrantes y se usan en superficies [1]. 
Bibliografía 
[1]. Agentes antibacterianos esterilizantes y / o desinfectantes Esterilización. Agentes físicos Calor. (s/f). Recuperado de http://cib.csic.es/sites/default/files/inline-files/Documento web del servicio RECORTADO definitivo.pdf
[2]. Espacio Biomédico. Métodos para el control microbiano. Recuperado de https://profdavidemobili.wordpress.com/2015/07/21/metodos-para-el-control-microbiano/
[3]. Nutricion microbiana. Medios de cultivo. Recuperado de https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/11nutrientes.htm