Harold_Perez_Presentación evaluacion de reproductor

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2022
CURSO DE FORMACIÓN DE 
PROMOTORES DE ASISTENCIA 
TÉCNICA EN INSEMINACIÓN 
ARTIFICIAL EN GANADO BOVINO
- Contribuir a la formación de recursos humanos para aplicación de la inseminación
artificial en bovinos en el pais
- Promover el uso de la inseminación artificial como herramienta para el mejoramiento
genético de bovinos
Objetivos
Lugar
- Fundo San Isidro Labrador de la Universidad Nacional Agraria La Molina, ubicado en
Santo Domingo - CP Herbay - Alto San Vicente - Cañete - Lima.
2022
INTRODUCCION
1988
•Estudios 
sobre 
capacitación 
espermática
1992
•Reacción 
acrosomica
•Viabilidad del 
espermatozoi
de 
2000
•Inestabilidad 
de membrana
•Daño 
oxidativo
2000
•Estudio sobre 
técnicas 
moleculares
METODOS	DE	COLECCIÓN
BOVINO:		12	meses	de	edad	o	27	o	29	cm	diámetro	testicular.	
1.	Vagina	artificial	
Materiales
Maniquí
Armado	de	
la	vagina	
Artificial
Colección
Electroeyaculación Masaje Digital
Sarsaifi et al. (2015)
Recuperación 
Epididimal
MOTILIDAD	INDIVIDUAL
Nº de 
testículos
Tiempo de refrigeración a 5ºC
Oh 12h 24h
(n=6) (n=6) (n=6)
Antes* Después* Antes Después Antes Después
1 92 57.4257 78.9157 28.4404 52.4017 33.0435
2 80.3738 61.1429 68.6667 20.8531 83.4711 22.0126
3 90.1786 63.8743 62.1145 22.3684 83.815 24.8619
4 85.906 22.0641 86.9231 39.0698 59.8616 26.1538
5 64.4068 41.0448 64.5022 25.8065 59.5455 25.1309
6 67.5 50 85.4651 21.8935 82.3864 18.3267
TOTAL 480.3652 295.5518 446.5872 158.4316 421.4813 149.5294
± S.D. 80.06±11.68 49.26±15.68a 74.43±10.78 26.41±6.82b 70.25±14.47 24.92±4.89b
HOST
Nº de 
testículos
Tiempo de refrigeración a 5ºC
Oh
(n=6)
12h
(n=6)
24h
(n=6)
Antes* Después* Antes Después Antes Después
1 77.3109 56.3707 76.3636 32.5000 55.2239 34.5455
2 71.8182 48.5294 66.6667 29.8387 67.3171 24.7423
3 73.5043 60.8911 65.9091 27.3585 59.6154 23.5294
4 74.2188 56.3218 67.1533 42.8571 53.4653 32.7869
5 59.8870 46.4286 63.2479 36.0294 52.5000 24.2188
6 61.6071 50.7463 67.8899 23.3333 68.9655 25.0000
TOTAL 418.3463 319.2878 407.2305 191.9171 357.0872 164.8228
± S.D. 69.72±7.20 53.21±5.53a 67.87±4.46 31.99±6.87b 59.51±7.13 27.47±4.86b
EVALUACION
CARACTERISTICAS	MACROSCOPICAS	
Volumen(mL)						Color											pH
Toro											 5-6															BC	y	BL											6,5	a	7,0
Carnero			 0,5- 2,0								 BC	y	BL											6,5	a	7,0
Camélidos	 0,05-12	 BC	y	BL															6,5
CARACTERISTICAS	MICROSCOPICAS
1.	Concentración	(Hemocitometro)	x	mL(x	107)
TORO													 CARNERO CAMÉLIDOS
120	a	200 300	a	450 3	a	28
• Densimetro
• Espectrofotómetro
CARACTERISTICAS	MICROSCOPICAS
1.	Concentración	(Hemocitometro)	x	mL(x	107)
TORO													 CARNERO CAMÉLIDOS
120	a	200 300	a	450 3	a	28
Ò Densimetro
Ò Espectrofotómetro
Motilidad	
1. Motilidad	Masal (Herman	y	Sanson)
MOTILIDAD INDIVIDUAL
Se realiza una predilucion con el dilutor o suero fisiológico a 35 o 37°C y se coloca una gota de
semen puro y se examina a 10X y luego 400 X.
Motilidad se gradúa como sigue:
- Muy Buena: 80 a 100%
- Buena : 60 a 79 %
- Regular : 40 a 59 %
- Pobre : menos del 40%
Espermatozoides moviles x 100
Total de espermatozoides
MOTILIDAD PROGRESIVA
Solo se toma lamovilidad y velocidad
rectilínea de los espermatozoides.
MORFOLOGÍA
Estudio	de	la	anormalidades	de	los	espermatozoides	de	
origen	testicular	(primarios),	de	los	conductos	y	
manejo(secundarios).
Técnica:Williams,	Giemsa,	Eosina,	Eosina-Nigrosina,	etc.
Recomendación	para	la	crioconservación:	
•5	a	10%	anormalidades	primarias
•15	a	20%	anormalidades	secundarias
Vitalidad:	%	de	espermatozoides	vivos	y	muertos.
Recomendación:	Deben	ser	como	mínimo	70%	espermatozoides	normales	
Anormalidades de la cabeza
Anormalidades de la pieza intermedia
Gota citoplasmática
DILUTORES
CONCEPTO
Son soluciones salinas insustituibles
que fueron encontradas para preservar
las células espermáticas.
PROPIEDADES
1. Temperatura (Foote 1984)
• Colección de semen
• Consumo de O2 42 veces37°C
• Fase de equilibrio de semen
• Consumo de O2 -42 veces5°C
• Crioconservación de semen
• Consumo de O2 -305 veces-196°C
2.	PRESIÓN	OSMÓTICA
300	mosm similar	a	plasma	sanguíneo
275	a	325	(Salisbury	et	al.,	1978).
3.	BUFFER	Y	PH
pH	cercano	a	punto	neutral	6,80	a	6,5	(Salisbury	et	al.,	1978).
buffer	mantenga	el	balance	iónico	(Foote,1984).
4.	ENERGÍA
Glucosa	y	fructosa	(Man,	1981)
5. Efecto dilución
Conocer la tasa de dilución de un dilutor(Salisbury et al., 1978;
Foote, 1978; Graham, 1978).
6. Control de microorganismos
Bacterias(CSS, 2004)
5,5 mg de tilosina, 27,5 mg de gentamicina, 16,5 mg licomicina
33,0 mg de espectomicina en 100 ml de dilución final.
7. Exclusión de materiales tóxicos
Evitar metales pesados(Foote, 1978)
TIPOS DE DILUTORES
1. Dilutores indefinidos
Cuando el dilutor tiene dentro sus componentes
uno o más sustancias de origen biológico( Ej.
yema de huevo, leche, etc.).
2. Dilutores definidos
Cuando el dilutor solo contiene componentes 
de origen vegetal (lecitinas). 
Dilutores comerciales
Consiste en conservar, extender los espermatozoides y determinar
cuantas dosis se puede obtener de un eyaculado(30 a 37°C
inmediatamente a la colección).
Vacunos:	30	a	40	x	106 de	espermatozoides	móviles	en
semen	congelado	Vol 0,25	y	0,5	ml.	
Ovinos		:		Transcervical Vol 0,5	ml	de	100	a	200	x	106.
Laparascopia Vol 0,05	ml	de	40	a	80	x	106.
Camélidos:		15	a	20	x	106 Vol 0,25	o	0,5	ml.
DILUCION
ENFRIAMIENTO	DEL	SEMEN
Es mantener un rendimiento con alto % de motilidad
por la interacción de los lípidos y las lipoproteínas
del dilutor en particular con la membrana celular.
Enfriamiento hasta 5°C debe realizarse en 1 a 2 h
EQUILIBRACION	
Mantener	un	período	el	espermatozide con	el	glicerol	a		
esto	se	llama	¨Equilibración glicerol¨.	15	min	a	18	h	
Finalidad:
- Penetrar	el	glicerol	la	membrana	del	espermatozoide	para	
obtener	el	efecto	crioprotector.
- Acostumbramiento	del	espermatozoide	al	frío	antes	de	la	
congelación(	5°C)
CONGELACION
Al exponer los espermatozoides a la tasa de congelación respectiva
se inicia la formación de hielo extracelular y vitrificación de espacio
intracelular
Los protocolos de 
Criopreservación
Preparación de espermatozoides
Modificación de Dilutores
Identificación de marcadores de 
Congelabilidad
LA	CRIOCONSERVACIÓN	BUSCA	OPTIMIZAR:
“El suceso nace con el querer. Siempre que el hombre 
aplica la determinación y la persistencia para un 
objetivo el vencerá los obstáculos y si no llegará al 
objetivo, por lo menos hará cosas admirables”