Práctica 6 hidrólisis

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONALFecha: 17/10/17 Grupo: 2QM1 Eq. : 17 Nombre de los integrantes: -Contreras Barrera Adriana -Galicia León Ana María -Morales Lara Aldair 
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Laboratorio de Química Bioorganica Práctica No.6 “Hidrólisis de una proteína y ensayos para proteínas y aminoácidos”
INTRODUCCION: Las proteínas se encuentran en todos los organismos vivos, son muchos tipos diferentes y desempeñan muchas funciones biológicas distintas. La queratina en la piel y las uñas, la fibrina de la seda y las telarañas, y la estimulación de 50,000 enzimas más que catalizan las reacciones biológicas en nuestros cuerpos son todas proteínas. Independientemente de su función, todas las proteínas están constituidas de muchas unidades de aminoácidos unidos entre sí en una cadena larga.
Los aminoácidos, como su nombre lo implica, son bifuncionales, contienen un grupo amino básico y un grupo carboxilo ácido.
Su valor como bloques de constitución para formar proteínas se deriva del hecho de que los aminoácidos pueden asociarse entre sí en cadenas largas formando enlaces amida entre -NH2 de un aminoácido y el -CO2H de otro. 
Para propósitos de clasificación las cadenas con menos de 50 aminoácidos con frecuencia se llaman péptidos, mientras que el término proteína se utiliza para cadenas más grandes.
Un grupo carboxilo se desprotona y existe como el anión carboxilato a un pH fisiológico de 7.3, mientras que un grupo amino se protona y existe como el catión amonio. Por esta razón, los aminoácidos existen en disolución acuosa principalmente en la forma de un ion dipolar, o zwitterion (del alemán zwetter, que significa "hibrido").
 
Los zwitteriones de los aminoácidos son sales internas y, por lo tanto, tienen muchas de las propiedades físicas asociadas con las sales. Tienen momentos dipolares grandes, son relativamente solubles en agua pero insolubles en hidrocarburos y son sustancias cristalinas con puntos de fusión relativamente altos. Además, los aminoácidos son anfóteros, ya que pueden reaccionar como ácidos o como bases, dependiendo de las circunstancias. En disolución ácida acuosa, un zwitterion de aminoácido es una base que acepta un protón en su grupo -C O2 - para producir un catión. En la disolución básica acuosa, el zwitterion es un ácido que pierde un protón de su grupo –NH3 + para formar un anión.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
Reacción Xantoproteíca: Esta prueba identifica aminoácidos con anillos aromáticos en su estructura.
	Sustrato:
	Observaciones:
	Resultado:
	Solución "A"
	Efervescencia
	Negativo
	Solución "D"
	Viré a naranja
	Positivo
Discusión:
Reacción de precipitación: Esta prueba identifica puentes de disulfuro en proteínas terciarias.
	Sustrato:
	Observaciones:
	Resultado:
	Solución "A"
	Precipitado color blanco
	Negativo
	Solución "D"
	Precipitado color café
	Positivo
Discusion:
Reacción de Biuret: Esta prueba identifica la cantidad de enlaces peptídicos, relacionándose con la cantidad de Nitrógenos libres presentes en la molécula, produciendo colores característicos 
	Sustrato:
	Observaciones
	Resultados
	Agua destilada (testigo)
	Color azul ++
	----
	Solución "A"
	incoloro
	Negativo
	Solución "C"
	Color azul +++
	Positivo
	Solución "D"
	Formacion de 2 fases: azul y morado
	Positivo
Discusión: En la solución “C” y “D”, se comprobó la existencia de enlaces peptídicos en su estructura, dando un color azul, provocado por la presencia de nitrógenos libres, la intensidad del color dependerá de la cantidad de nitrógenos libres en la molecula,
Reacción con Ninhidrina: Esta prueba identifica las bandas de aminoácidos. El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina.
	Sustrato:
	Observaciones:
	Resultado:
	Agua destilada (testigo)
	Transparente que al calentar viró a azul
	Negativo
	Solución "A"
	Color café ++
	Positivo
	Solución "C"
	Color café +
	Positivo
	Solución "D"
	Color café ++++
	Positivo
	Solución aminoácido patrón
	Color café ++++++
	Positivo
Discusion: Se identificaron las bandas de aminoácidos; la existencia de las bandas se evidenció en todas las soluciones, en donde se observo con un color café en la prueba. El color café es a la presencia de asparagina, que tiene un grupo amino en la cadena lateral.
Reacción de Ácido Nitroso: Esta prueba nos permite identificar los grupos amino libres de los aminoácidos y proteínas (grupos amino alfa no combinados); evaluando la cantidad de nitrógeno liberado mediante la manifestación de efervescencia en el tubo.
	Sustrato:
	Observaciones:
	Resultado:
	Agua destilada (testigo)
	Sin efervescencia
	Negativo
	Solución "A"
	Sin efervescencia
	Negativo
	Solución "C"
	Sin efervescencia
	Negativo
	Solución "D"
	Mucha efervescencia
	Positivo
Discusión: La prueba donde se obtuvo un resultado positivo fue en la solución “D”, donde se generó una gran cantidad de efervescencia demostrado la existencia de aminos libres que reaccionaron con el ácido nitroso y liberaron nitrógeno en gas.
Acción reguladora de los aminoácidos: 
Esta prueba demuestra el comportamiento anfótero de los aminoácidos actuando estos como una base o como un ácido donde utilizamos ácido clorhídrico e hidróxido de sodio.
	Solución:
	Indicador:
	Color inicial:
	mL. HCl 0.1 N
	Color final
	Agua destilada
	Rojo Congo
	translúcido
	1 gota
	Naranja
	Solución "B"
	Rojo Congo
	translúcido
	10 gotas
	Naranja
	
	
	
	mL. NaOH 0.1 N
	
	Agua destilada
	Fenolftaleína 0.1%
	translúcido
	1 gota
	Rosa
	Solución "B"
	Fenolftaleína 0.1%
	translúcido
	10 gotas
	Rosa
Los indicadores utilizados Rojo Congo con color inicial (translucido) y una zona de viraje (rosa) pH acido 3.0 a 5.2 utilizando HCl hasta obtener solución básica (naranja) confirmando la reacción acido base. Y en el caso de la fenolftaleína color inicial (translucido) con una zona de viraje pH 8.2-10 utilizando NaOH y obtuvimos al final un color Rosa confirmando la propiedad anfótera.
6) Cromatografía en placa fina 
Se corrió en la placa una muestra de la mezcla de aminoácidos de la solución B con 2 aminoácidos patrón (Valina y Glicina). Durante este proceso ocurrió una falla en la aplicación de nuestra muestra ya que se colocó una gran cantidad de muestra lo que provoco que no corriera de forma correcta quedando una mancha larga, además de que el lugar de colocación de la muestra fue inadecuada. Por lo que se espera el Rf sea un poco erróneo. 
 
 
CONCLUSIONES
Se pudo obtener la hidrolisis de una proteína, se concluyeron con satisfacción las pruebas para la detección de aminoácidos por medio sus características físico-químicas en la pruebas (Xantoproteica detección de aminoácidos aromáticos, Precipitación par enlaces disulfuro en aminoácidos, Biuret detectar enlaces peptídicos, Ninhidrina aminoacidos libres, Reacción con ácido nitroso para la detección de aminos libres). Ya que se evidencio la teoría en los experimentos, estas pruebas se observaron cómo efervescencias, cambio decolor y precipitados. Además nos ayuda a identificar algunas características y propiedades que tienen las proteínas y aminoácidos.
BIBLIOGRAFIA 
· Paula Yurkanis Bruice. Química Orgánica. 
México: PEARSON Educación, 2008.
· Leroy Wade. Química Orgánica. 
México: PEARSON, 2012.
· Anónimo. "GUÍA No 9: ENSAYOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS. 2015. Universidad de Bogotá "Jorge Tadeo Lozano". 16/Octubre/2017 http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/guia_9_aminoacidos.pdf.