virologia-medica (447)

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para determinar la presencia del HBs Ag son discordantes, la de-
utilidad para el diagnóstico de la infección aguda. Dicha determi-
nación también es útil para el 
Otras indicaciones de solicitud de PCR para HBV son: 1) la 
investigación de replicación viral en pacientes con HBs Ag y anti-
cuerpos 2) la determinación de una infección 
oculta en individuos sin antigenemia HBs y eventual positividad 
para otro marcador serológico del 3) seguimiento de la in-
fección en programas de 
evolución del curso natural 
de la infección, el cuadro clínico inicial y la respuesta al tratamien-
to antiviral, con el/los genotipo/s del 
se ha postulado que la HBV debería imple-
mentarse antes de iniciar la terapéutica antiviral. Si bien actual-
mente se cuenta con diferentes técnicas para la 
del secuenciación nucleotídica, la 
Restriction Fragment Length Polymorphisms LiPA 
Line Probe Assay; 
-
microarrays HBV DNA-Chip assay proto-
el capítulo 9 "Diagnóstico virológico".
Secuenciación nucleotídica: El genotipo viral de una cepa 
de HBV puede determinarse luego de la secuenciación nu-
pre-core/core
se-
cuenciación nucleotídica directa de los fragmentos de PCR –sin 
previo clonado– puede no detectar coinfecciones con diferentes 
genotipos del HBV, ya que se requiere un umbral cercano al 
PCR para ser ob-
servable en la secuencia nucleotídica. Debido a la circulación 
de cepas recombinantes, una adecuada 
HBV debe ser realizada con la secuencia del genoma completo 
de la cepa analizada. Es importante tener en cuenta que ésta es 
una metodología costosa que requiere de equipos especializa-
dos y personal altamente entrenado, por lo que su utilización en 
la HBV no se realiza rutinariamente para 
diagnóstico o estudios de 
RFLP: Se realiza una digestión con enzimas de restricción 
PCR de una porción de la 
región pre-S/S de la cepa a analizar. El genotipo del HBV es 
-
tenido con patrones característicos de cada genotipo. Es una 
técnica menos costosa que la secuenciación nucleotídica, y de 
Es por esto que es muy utilizada para el diagnóstico y los es-
tudios de epidemiología molecular. A diferencia de la secuen-
ciación nucleotídica directa, con la 
coinfecciones con diferentes genotipos que contribuyen hasta 
-
genoma viral, a diferencia de la secuencicón nucleotídica de 
Diag-
LiPA: Se realiza una hibridación en soporte sólido con son-
HBV se determina al 
comparar las bandas reactivas en la muestra a estudiar y un pa-
tron de referencia. Los equipos para realizar el ensayo de LiPA 
se comercializan mundialmente, lo que hace que esta técnica 
-
ble entre diferentes estudios. Comparada con la secuenciación 
nucleotídica, el 
Microdisposiciones del DNA (HBV DNA-chip): se utilizan 
spots de oligonucleótidos del -
hibridación con am-
plicones obtenidos mediante PCR de la muestra de DNA del HBV 
del paciente que son marcados con biotina. Después de la tinción 
-
tados obtenidos, son analizados con un software apropiado en una 
 en spots . Comparado con 
la secuenciación nucleotídica, el 
Carga viral: 
puede realizar mediante 
hibridación líquida, sistema de captura híbrida, branched
mediante -
Capítulo 24 / Hepatitis Virales
Estado del paciente HBs Ag Anticuerpos anti-HBs HBe Ag
Anticuerpos 
anti-HBe
Anticuerpos 
anti-HBc DNA del HBV
Infección aguda
- Temprana
- Período de ventana
+
-
-
-
-
+
+
-
-
-
+/-
+
IgM
IgM
IgG
+
+/-
+/-
Infección persistente
- Estado activo
- Estado inactivo
- Reactivación
- Con variante 
minus pre-
core)
+
+
+
+
-
-
-
-
-
+/-
+
-
+/-
-
-
-
+
-
+
+/-
IgG, IgM1
IgG
IgG, IgM
IgG
+/-
>105 copias/mL
5 copias/mL
>105 copias/mL
>105 copias/mL
+
Infección pasada - + - - IgG -
Vacunado -2 + - - - -
1
2El