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Universidad pedagogica y tecnologica de Colombia Facultad de Ciencias Básicas – Escuela de Biología Biología celular TALLER - Fraccionamiento y ultraestructura celular OBJETIVO • Analizar la morfología de los organelos celulares y relacionarla con la función. INTRODUCCIÓN Una de las principales características de la célula eucariota es la presencia de compartimentos delimitados por membrana que están físicamente separados de la membrana plasmática. El compartimiento más notable es el núcleo, el cual alberga el material genético en forma de ADN. Entre la membrana plasmática y la envoltura nuclear está el citoplasma, que consiste en una emulsión coloidal fina de aspecto granuloso que alberga y facilita el movimiento de organelos que cumplen diferentes funciones. En el citoplasma ocurren muchos procesos bioquímicos. A través del citoplasma se extienden una serie de canales membranosos que conforman el retículo endoplasmático (RE). Hay regiones del RE en las que pueden encontrarse ribosomas unidos a la cara externa de las cisternas. Estas regiones se denominan RER (retículo endoplasmático rugoso). Cuando no hay ribosomas unidos a las cisternas, esta estructura se conoce como REL (retículo endoplasmático liso). Las membranas del RER junto con los ribosomas libres del citoplasma forman la base estructural de un sistema que sintetiza y distribuye proteínas. Algunas de las proteínas sintetizadas pasan al aparato de Golgi donde son modificadas. Adicionalmente, el aparato de Golgi empaqueta proteínas de secreción, algunas de membrana plasmática, estructurales del espacio extracelular y las proteínas destinadas a los lisosomas. Los lisosomas son organelos que contienen enzimas hidrolíticas encargadas de la digestión celular. Existen conexiones ocasionales entre los compartimientos membranosos del citoplasma, pero ninguno es continuo con la membrana plasmática. Con la excepción de algunos protozoos anaerobios, todas las demás células eucariotas poseen mitocondrias, que tienen como función principal la producción de energía en forma de ATP. Las células eucariotas poseen además otros organelos no membranosos como los microtúbulos y microfilamentos que participan en muchos procesos relativos al movimiento y mantenimiento de la estructura celular. Ejemplos de dichos procesos son: el desplazamiento de los cromosomas a los polos de la célula en la división celular, el transporte mediante vesículas de material en el interior del citoplasma y hacia la membrana plasmática, el flujo citoplasmático y la propulsión celular a través del medio ambiente líquido por medio de cilios y flagelos. El citoplasma puede presentar acumulación de macromoléculas llamadas inclusiones, derivadas de las actividades metabólicas propias de la célula, algunas de estas están compuestas de glucógeno, almidón, lípidos y gránulos de lipofuscina; también se pueden adquirir de manera exógena como moléculas con carbono, producto de la fagocitosis de los macrófagos. SELECCIONE Y EXPLIQUE: (Todas las respuestas deben tener sustento bibliográfico, referenciado no solo de los libros indicados aquí, sino también de artículos científicos) No. 1 – Envoltura Nuclear: La envoltura nuclear es un sistema de dos membranas que separa el interior nuclear del citoplasma circundante. A la membrana externa se le adhieren ribosomas activos en la síntesis de proteínas. La membrana interna no tiene ribosomas pero está asociada al material cromosómico (heterocromatina). Las dos membranas están separadas por el espacio intermembranoso. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencia la envoltura nuclear. Se evidencia en la fase de velocidad baja de una centrifugación diferencial. - Explique cuál es la función del núcleo y cuál es la razón (biológica) de que su envoltura sea un sistema formado por dos membranas. - ● R: el núcleo celular aísla y protege el material genético, regula el funcionamiento celular e interviene en la división celular ya que en este se presenta la replicación y la transcripción de ADN, su envoltura se compone de una doble membrana debido a el ingreso de sustancias como enzimas o proteínas. No. 2 – Cromatina: compuesta de ADN y proteínas puede presentarse en diferentes grados de condensación ya sea en forma de eucromatina o de heterocromatina. - Explique cuál es la diferencia entre eucromatina y heterocromatina? R: La heterocromatina y la eucromatina son las dos formas o niveles de compactación que presenta la cromatina durante la interfase. ● eucromatina: forma más descondensada de la cromatina, la cual permite la expresión genética, es la forma más abundante durante la interfase. ● Heterocromatina: forma más condensada de cromatina, la cual no permite la expresión genética. De esta hay dos tipos: la constitutiva, esta nunca se expresa; y la facultativa; la cual puede pasar a ser eucromatina y expresarse. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencia la cromatina. Se evidencia en la fase de velocidad alta de una centrifugación diferencial. No. 3 – Nucléolo: región enriquecida de ARN y proteínas, que se puede diferenciar claramente al interior del núcleo. Tiene un componente granular que contiene partículas de 15 a 20nm de ancho (algo más pequeñas que los ribosomas), es la zona más externa del núcleo. Posee además un centro fibrilar (denso y/o con fibrillas) que mide de 5 a 10 nm, se encuentra en la zona más interna del nucléolo. - Explique cuál es la función del nucleolo y su importancia para el desarrollo y trabajo celular en general? ● R: este orgánulo se constituye principalmente por proteínas y ARN el cual se sintetiza en este mismo orgánulo. Además de esto, otra de sus funciones es la transcripción de ARN ribosomal; la cual interviene en la formación de ribosomas. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencia el nucléolo. Se evidencia en la fase de velocidad baja de una centrifugación diferencial. - No. 4 – El complejo de poro: Existen puntos de unión entre las dos membranas de la envoltura nuclear caracterizadas por la presencia de complejos de proteínas que forman una estructura conocida como el poro nuclear, este constituye un sistema de transporte de sustancias entre el núcleo y el citoplasma. Los ocho gránulos del anillo se encuentran regularmente espaciados en los bordes del poro sobre ambas superficies de la envoltura nuclear. Además se observa el tapón electro-denso, formado por proteínas fibrilares, el cual cierra la luz del poro. - Explique cómo se realiza el transporte de sustancias desde y hacia el núcleo. ● R: Los poros se componen de más de 50 proteínas que son parte del grupo de las nucleoproteínas y a la vez complejos moleculares. El transporte de sustancias hacia el interior y exterior del núcleo, se da debido a que cada complejo presenta canales por los cuales se difunden por transporte pasivo, pequeñas moléculas de acuerdo al gradiente de concentración y solubilidad en agua (500 a 44000 Daltons). En cambio, para la difusión de proteínas globulares mayores como el DNA o RNA polimerasas estas se unen junto con proteínas receptoras que están en los complejos del poro y necesitan energía en forma de GTP o GDP por transporte activo. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencia el complejo del poro nuclear. Se evidencia en la fase de velocidad alta de una centrifugación diferencial. No 5 – Retículo endoplásmico rugoso: Las células glandulares que están produciendo hormonas u otros productos de secreción, desarrollan un RER que ocupa la mayor parte del citoplasma. - Explique cuál es la importancia del RER en la funcionalidad celular. ● R: Es una red de membranas dentro de la célula, es importante ya que a través de este se mueven las proteínas y otras moléculas. Las proteínas se ensamblan en orgánulos llamados ribosomas. Cuando las proteínas están destinadas a ser parte de la membrana celular o exportadas fuera de la célula. Los ribosomas las ensamblan y las añaden al retículo endoplasmático las cuales le dan a este orgánulo su aspectorugoso. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencia el RER e indique en ellas las diferentes partes del mismo. Se evidencia en la fase de velocidad media de una centrifugación diferencial. No. 6 – Retículo endoplasmático Liso: el REL se desarrolla más en las células que producen lípidos o esteroides. Identifique los túbulos y las vesículas. Compárelo con la micrográfica anterior. - Cuáles son las funciones del REL? ¿Qué diferencias encuentra entre el RER y el REL? ● R: El retículo endoplasmático liso se encarga del metabolismo de lípidos (hepatocitos). También produce enzimas para la síntesis de lípidos, fosfolípidos, colesterol y glucolípidos. Cumple la función de detoxificación, en la cual transforma alcoholes por oxidación los cuales son almacenados y eliminados por la orina. Se diferencia respecto al retículo endoplasmático rugoso en que este no tiene ribosomas. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencia el REL. Se evidencia en la fase de velocidad media de una centrifugación diferencial. No. 7 – Aparato de Golgi: Identifique la o las micrografías en las que se evidencia este orgánulo. Se evidencia en la fase de velocidad media de una centrifugación diferencial. - Mencione cuál es la función del Ap. de Golgi y de cada una de sus regiones. R: el aparato de Golgi es un sistema de membranas achatadas y apiladas formado por unas 80 dictiosomas (según el tipo de célula) que se componen por 40º 60 sáculos (cisternas) los cuales tienen como función completar la fabricación de algunas proteínas. El aparato de Golgi se puede dividir en tres regiones funcionales: ● Región Cis-Golgi: recibe vesículas de transición del retículo plasmático que son el vehículo de transición de las proteínas que contienen las cuales serán transportadas a la cara externa del aparato de Golgi. ● Región Medial: es una zona de transición. ● Región Trans-Golgi: las vesículas que vienen del retículo endoplasmático se fusionan con el Cis-Golgi atravesando hasta el Trans-Golgi donde se empaquetan y envían adonde correspondan. Cada región contiene diferentes enzimas que modifican las vesículas según el lugar al cual deban ir. - Investiga qué tipos de células poseen los aparatos de Golgi más desarrollados y explique por qué? R: el aparato de golgi se encuentra en mayor cantidad o más desarrollado en células procariotas ya que al estar relacionado con ribosomas, estos presentan subunidades mayores y menores, que se encuentran en mayor cantidad en células eucariotas. No. 8 – Lisosomas: Son vesículas pequeñas generalmente esféricas de tamaño variable. - Identifique la o las micrografías en las que se evidencian los lisosomas. Se evidencia en la fase de velocidad media de una centrifugación diferencial. - ¿Cuál es la importancia funcional de los lisosomas a nivel celular? No. 9 – Mitocondrias: - Identifique la o las micrografías en las que se evidencian las mitocondrias. Indique en ellas las partes más importantes. Se evidencia en la fase de velocidad media de una centrifugación diferencial. BIBLIOGRAFÍA - Gartner LP, Hiatt Jl. Atlas en color de histología. México: editorial médica panamericana 2011. - Gartner LP, Hiatt Jl. Histología Texto y atlas. México: McGraw-Hill Interamericana 1997 - Geoffrey M. Cooper. La célula. Ed segunda Editorial Marbán. 2002. Biología Celular y Molecular. Gerald Karp. Tercera Edición. Editorial McGrawHill. Interamericana. 1998. - Lodish, Berk, Ziporsky, Matsudaira, Baltimore, Darnell Biología Celular y Molecular. Cuarta Edición. Editorial Médica Panamericana. 2000.
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