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los virus para introducirse en las células, muestran una efi- cacia superior a la de los métodos no biológicos. Dentro de los vectores virales, los retrovirales y los adenovirales son los más eficaces para introducir genes exógenos en células de mamíferos. Hay que tener en cuenta que en el caso de los vectores retrovirales, la transformación suele ser permanente, ya que tales vectores se integran en el genoma de la célula invadida, expresando de una manera eficaz los genes controlados por los promotores virales, mientras que en el caso de los adeno- virales, la expresión suele ser transitoria debido a la locali- zación extracromosómica de los mismos. Por el contrario, la expresión del gen terapéutico, tras la integración de los vec- tores retrovirales, depende en gran manera de la división celular, mientras que los adenovirales pueden expresarse sin necesidad de división de la célula diana. La utilización de un retrovirus como vector de transfe- rencia génica requiere una serie de manipulaciones génicas que persiguen dos objetivos: 1) eliminar del genoma retro- viral ciertos genes que codifican proteínas que permiten la multiplicación de los mismos en el citoplasma celular y, 2) mantener otros que contribuyen a la integración y expresión del gen terapéutico que ha sido asociado al vector retroviral (véase el Recuadro 28-1). Algunos vectores, aparte de po- seer el ADN humano que se quiere integrar en el genoma celular, incluyen otro gen marcador que permite la selección de las células que expresan los genes del retrovirus recom- binante. 25.5.2 Animales transgénicos De la misma forma que se puede manipular la dotación gené- tica de células somáticas, se puede introducir ADN foráneo en células de embriones de ratón, lo que da lugar a células o animales completos que mantienen integrado el gen foráneo (transgén) en todas sus células, siendo capaces de transmi- Patología molecular y terapia génica | 439 Figura 25-5. Métodos de transfección de células eucarióticas. Distintos métodos químicos, físicos y biológicos utilizados para intro- ducir moléculas de ADN en el interior de células de mamíferos. O O O Integración MÉTODOS QUÍMICOS Fosfato cálcico Liposomas ADN Microinyección Electroporación Bombardeo de micropartículas MÉTODOS BIOLÓGICOS Retrovirus Adenovirus MÉTODOS FÍSICOS 25 Capitulo 25 8/4/05 11:49 Página 439 BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR (...) CONTENIDO PARTE II: BIOLOGÍA Y PATOLOGÍA MOLECULAR SECCIÓN V GENOMA, PATOLOGÍA MOLECULAR Y TERAPIA GÉNICA 25 PATOLOGÍA MOLECULAR Y TERAPIA GÉNICA 25.5 TERAPIA GÉNICA 25.5.2 Animales transgénicos
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