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✂ © D r. G ri ff it hs . 1/ Elegir los mejores puntos de biopsia • Obtener muestras representativas de las lesiones. • Tomar varias muestras (salvo que se trate de una lesión solitaria), mínimo 3. • Obtener muestras de las lesiones primarias completamente desarrolladas siempre que sea posible, evitando la piel traumatizada. • Para la alopecia: biopsiar la zona de máxima pérdida de pelo, el margen de la zona alopécica y la piel normal con pelo. • Para la piel ulcerada: biopsiar la zona ulcerada y la zona justo adyacente a la úlcera, donde la epidermis está todavía intacta. • Para las pústulas, vesículas o ampollas: extraer la lesión completa sin romperla. 2/ Preparar la zona cuidadosamente • Recortar el pelo, pero no demasiado. Suelen ser preferibles las tijeras a las pinzas. Biopsia cutánea Figura 1. Figura 2. - Raspado profundo: justo hasta provocar sangrado. • Depositar el material en uno o más portaobjetos con aceite mineral y cubrir con el cubreobjetos (Figura 2). • Ajustar la luz del microscopio, bajando el condensador para un mejor contraste. • Explorar sistemáticamente todo el portaobjetos a un aumento de 40X o de 100X. 3/ Errores • Número de muestras insuficiente: deben tomarse al menos 6, si es posible. • Aceite mineral inadecuado. • Falta de cubreobjetos. • Muestra demasiado gruesa u oscurecida por la sangre. • Demasiada intensidad de la luz. • No hacer un estudio exhaustivo. 1/ Elegir el tipo de raspado según su profundidad… • Superficial para parásitos superficiales (p.ej. Cheyletiella). • Profundo para parásitos más profundos (p.ej. Demodex, Sarcoptes). ... y el mejor sitio • Raspar las lesiones primarias sin traumatismos, siempre que sea posible. • Sarcoptes: buscar lesiones en el margen del pabellón auricular, codo, tarso y abdomen. • Demodex: incluir zonas de alopecia, comedones, hiper- pigmentación (Nota: estudiar además el tricograma en aceite mineral). 2/ Tomar una muestra de buena calidad y observar con detenimiento • Recortar el pelo de la zona a estudiar (con cuidado de no alterar las escamas o la superficie de la piel si el raspado es superficial). • Colocar aceite mineral en la hoja del bisturí y unas gotas directamente en la piel. • Apretar la piel antes de raspar si se sospecha de Demodex. • Raspar con la hoja colocada en un ángulo de 90° con respecto a la superficie de la piel, en la dirección del cre- cimiento del pelo (Figura 1). • ¿A qué profundidad hay que raspar? - Raspado superficial: no necesita llegar a provocar san- grado. Raspados cutáneos Kate Griffiths, BVSc, CertVD, MRCVS Facultad de Veterinaria de la Universidad de Nottingham, Nottingham, Reino Unido Consejos para conseguir raspados y biopsias útiles GUÍA PARA RECORTAR Y GUARDAR... Published in IVIS with the permission of the editor Close window to return to IVIS ✂© Dr. G ri ff it hs . Figura 3. Figura 4. Figura 5. • No tocar las costras ni la superficie de la piel. • No desinfectar ni frotar la piel (salvo para la biopsia esci- sional de nódulos). • Marcar con rotulador indeleble una línea de orientación a lo largo de la línea de crecimiento del pelo (especialmente para los casos de alopecia) (Figura 3). 3/ ¿Biopsia con punch o biopsia en cuña (elipse)? Cuña o elipse para el caso de: • Escisión de nódulos solitarios. • Transición de una piel normal a lesionada (p.ej. borde de alopecia o úlcera). • Vesículas. • Sospecha de lesiones profundas como la paniculitis. Biopsia con punch: • Biopsias de 4 mm sólo para estructuras delicadas (p.ej. el plano nasal de los perros de talla pequeña); utilizar el punch de 6 mm o de 8 mm de forma sistemática. • Mantener la perpendicular a la superficie de la piel. • Girar en una única dirección, no de atrás hacia delante. • ¡No reutilizar los punch de biopsia! 4/ Manipular la muestra apropiadamente • Manipular la biopsia con suavidad y únicamente por el tejido subcutáneo, nunca por la dermis ni por la epidermis (Figura 4). • Secar la sangre con cuidado empezando por la parte inferior de la muestra. • Si la muestra es fina, colocarla en una superficie dura o en el extremo de un depresor lingual de madera (tejido sub- cutáneo hacia abajo) para evitar que se arrugue (Figura 5). • Colocar lo antes posible la muestra en formol, con el tejido hacia abajo. • Utilizar formol al 10% y un volumen como mínimo 10 veces el volumen de la muestra de tejido. CONSEJOS PARA CONSEGUIR RASPADOS Y BIOPSIAS ÚTILES Neoplasia 5/ Ayudar al anatomopatólogo • Proporcionar la historia completa. • Enviar la muestra a un anatomopatólogo con interés parti- cular en dermatohistopatología, si es posible. 6/ Consideraciones especiales para las masas cutáneas… • Quizá no sean homogéneas, especialmente si son grandes, y probablemente la biopsia en cuña incisional (Figura 6) o la biopsia escisional (Figura 7) sean más representativas que la biopsia con punch. • Si se sospecha una neoplasia infiltrativa, se debe tomar en primer lugar una biopsia incisional para identificar la masa antes de intentar su extracción para así asegurarse de tomar los márgenes adecuados. • Asegurarse de que se toma la biopsia con márgenes ade- cuados para extraer el tumor en su totalidad. • Extraer el tejido más profundo “en bloque” y remitir intacto para valorar la infiltración. • Para una fijación adecuada, tomar un grosor máximo de tejido de 1 cm. 7/ ... y para el cultivo de tejido bacteriano y fúngico • Retirar la administración de antibióticos unos 5-7 días previos a la obtención de la muestra. • Enviar la muestra de biopsia por punch en solución salina estéril o en una gasa empapada en solución salina estéril. • Si se sospecha una enfermedad micobacteriana, hacer una impronta del tejido biopsiado para citología y enviar la biopsia al anatomopatólogo (solicitar tinciones de Ziehl-Neelsen en ambos). Congelar el tejido no fijado para un posterior cultivo de micobacterias, por si fuera necesario. (Nota: considerando el potencial zoonótico, tome precauciones durante la toma de muestra y el envío). Figura 6. Biopsia en cuña incisional. Centro necrótico Inflamación periférica Figura 7. Biopsia escisional. Published in IVIS with the permission of the editor Close window to return to IVIS
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