Curiosamente, al revisar la literatura existente sobre la señal espectroscópica que aparece a 2,80 ppm han sido pocos los autores que han abordado ...

Curiosamente, al revisar la literatura existente sobre la señal espectroscópica que aparece a 2,80 ppm han sido pocos los autores que han abordado el tema de los cambios lipídicos en el infarto cerebral: El primer trabajo que analiza este tema es de Gasparovic y colaboradores (Gasparovic et al. 2001)que quisieron determinar el origen de las diversas señales lipídicas en un modelo animal de oclusión de la ACM permanente con un seguimiento de 1 a 5 días post-infarto. Para ello realizaron una extracción lipídica del cerebro de la zona de infarto y un análisis por cromatografía de gases en un subgrupo y en el otro una tinción con Nile Red (marcador de gotículas lipídicas). En su trabajo dichos autores atribuyeron la detección de lípidos en las preparaciones estudiadas a actividad de los macrófagos fagocíticos ya que determinaron que los lípidos contenidos en gotículas se encontraban en su interior y que las señales de lípidos neutros detectables por RMN (LM) en las preparaciones de tejido infartado estudiadas se relacionaban con las señales de los lípidos neutros y no con el de ácidos grasos libres de las muestras. Harada y colabradores (Harada et al. 2007) describieron un aumento de las señales lipídicas a 1,28 ppm haciendo un seguimiento por ERM in vivo hasta los 7 días post-isquemia en un modelo de rata con oclusión de la ACM de 45 minutos. Utilizaron además un protocolo de ERM in vivo a 7T (TE= 563 ms) para detectar los cambios del Lac y poderlo diferenciar de los LM a 1,28 ppm que corresponde a los metilenos de los ácidos grasos en lípidos neutros. Dichos autores detectaron que el acúmulo de Lac desaparecía a las 48 horas mientras que los LM a 1,28 ppm incrementaban desde las 6 horas y a lo largo de todo el periodo analizado, con una diferencia de 6 veces de aumento de la medición de las 6 horas con respecto a los 7 días. En este trabajo no determinaron la señal de 2,80 ppm a tiempos largos post-infarto. Atribuían las señales de los lípidos a gotículas que se detectaban intracelularmente en las primeras horas post-infarto y tanto intracelularmente como libres en el espacio extracelular a los 7 días post-isquemia. Asociaban dicha señal de LM a 1,28 ppm a procesos de fagocitosis de la membrana celular de células apoptóticas o necróticas por parte de los macrófagos. Esta hipótesis se basó también en trabajos anteriores (Brierley and Brown 1982; Gasparovic et al. 2001). Van der Zijden y colaboradores (van der Zijden et al. 2008) determinaron la señal de los LMap en ratas Wistar machos con el mismo modelo de infarto de oclusión de la ACM que hemos utilizado en nuestros experimentos aunque ellos atribuyen la señal, en su caso a 2,70 ppm, a “macromoléculas”. También asocian a “macromoléculas” las señales de 0,8 y 1,3 ppm y citando a los anteriores trabajos mencionados(Gasparovic et al. 2001)lo asocian a degradación de productos de la membrana el interior de los macrófagos. A nivel clínico un trabajo de Saunders y colaboradores (Saunders et al. 1997) realizado en pacientes con infarto a los que hacían un seguimiento durante 3 semanas permitió detectar en 1 de 6 pacientes la aparición de la señal de 2,80 ppm. En este estudio apuntan al posible origen de esta señal como proveniente del ácido araquidónico. Kamada y colaboradores (Kamada et al. 2003) sin utilizar la RMN determinaron las gotículas lipídicas en un modelo tMCAO de rata con 90 minutos de oclusión. En dicho modelo mediante técnicas de inmunohistoquímica determinaron una serie de marcadores: Nile Red para determinar el contenido de lípidos neutros de las gotículas, tinción con filipin para determinar el colesterol libre, tinción con el anticuerpo anti-CD68, que es una glicoproteína presente en las membranas de los macrófagos y tinción contra la proteína asociada a microtúbulos-2 (MAP-2),que es un marcador específico de neuronas que se utiliza para determinar daño neuronal. Así, determinaron que el máximo de gotículas en el núcleo del infarto se daba a los 7 días, y posteriormente decrecían, mientras que en la zona de penumbra se mantenían en el tiempo. Concluían además que la forma de las gotículas era distinta entre el núcleo y la periferia y asociaban estos cambios con “procesos de regeneración y degeneración en la zona”. Atribuían a los macrófagos y en este caso, también, a los astrocitos un papel importante en la redistribución lipídica post-infarto. Estos autores también mencionaban un trabajo suyo anterior (Kitagawa et al. 1998) en el que determinaban la apoptosis (mediante tinción con TUNEL) que era mayoritario en el núcleo que en la periferia, aunque dichos autores no llegaron a asociar ambos procesos: apoptosis y acúmulo de gotículas conteniendo lípidos neutros. Para determinar otros posibles trabajos donde se encontrara esta señal a 2,80 ppm, aunque no lo mencionaran explícitamente en el texto, se llevó a cabo una revisión de la literatura sobre ERM en infarto, pero no se encontraron más descripciones en este sentido. Las causas de este hecho pueden atribuirse a que: (1) la mayoría de estudios están centrados en la etapa aguda del infarto donde no aparece la señal de 2,80 ppm(Bizzi et al. 1996; Hesselbarth et al. 1998; Mlynarik et al. 2008; Lei et al. 2009; Berthet et al. 2011; Campos et al. 2011; Alf et al. 2012), (2) la localización o tamaño del infarto descrita en los artículos era distinta a un infarto de la arteria cerebral media que es el utilizado en nuestro caso. Si el infarto es menor puede tener efecto sobre el grado de apoptosis que se produce en la zona (Kang et al. 2000; van Zandvoort et al. 2005), (3) la utilización de tiempos de eco más largos del empleado en nuestro caso (TE=12 ms) sobretodo en ensayos clínicos donde el TE empleado es mayor por cuestiones instrumentales o por tener interés específico de trabajar a TE largo para separar el lactato y reducir las señales provenientes de LM o macromoléculas(Graham et al. 1995; Wardlaw et al. 1998; Federico et al. 1998),(4) no muestran imágenes de los espectros completos y no se puede determinarla presencia o ausencia de la resonancia a 2,80 ppm (Franke et al. 2000; Dreher et al. 2001; Ross et al. 2005; Munoz Maniega et al. 2008; Bar-Shir et al. 2010; Huang et al. 2010), (5) la SNR de los espectros no permite la diferenciación de las señales de resonancia del ruido de la línea de base en la región de interés (Igarashi et al. 2001; Kang et al. 2009), (7) estudiaban regiones externas a la zona del infarto (Glodzik-Sobanska et al. 2007). Por lo tanto, en infarto, las señales de los LM han sido asociadas básicamente a actividad fagocítica. Para encontrar literatura referente a la asociación de la señal de los lípidos, especialmente 2,80 ppm, con procesos apoptóticos debemos referirnos principalmente a literatura sobre cáncer, especialmente acerca de glioblastoma. El primer grupo en proponer una correlación entre el aumento de la detección de LM por 1H-ERM y apoptosis fueron Blackenberg y colaboradores (Blankenberg et al. 1996) quienes detectaron un aumento de la señal de los metilenos a 1,30 ppm al inducir apoptosis en cultivo celular de células T. Más adelante Delikatny y colaboradores (Delikatny et al. 2002)detectaron que en una línea celular de cáncer de mama (HBL-100) también se acumulan estos LM durante la necrosis. Además, el aumento de los lípidos saturados detectables por RMN, especialmente 0,9 ppm y 1,3 ppm se asociaron con procesos necróticos inducidos por agentes quimioterapéuticos. Del mismo modo, Tugnoli y colaboradores