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EXPERIMENTO N° 5 REACCIONES CUALITATIVAS DE GLÚCIDOS I. CONTENIDO 1. Concepto de glúcidos o carbohidratos. 2. Identificación de glúcidos o carbohidratos. COMPETENCIAS GENERALES 1. Capacidad de aplicar e interpretar los conocimientos y resultados 2. Capacidad de trabajo en equipo COMPETENCIAS ESPECÍFICAS 1. Diferencia entre una cetosa y una aldosa 2. Distinguir por medio de pruebas sencillas, entre un monosacárido, un disacárido y un polisacárido. II. MARCO TEÓRICO Los glúcidos mejor conocidos como hidratos de carbono o carbohidratos, son los compuestos orgánicos más abundantes en la naturaleza. También los más consumidos por los seres humanos. Los hidratos de carbono que provienen del reino vegetal son más variados y abundantes que los del reino animal y se originan como producto de la fotosíntesis. Adicionalmente, los carbohidratos son los principales compuestos químicos que almacenan la energía radiante del sol. Casi todos los compuestos orgánicos que se encuentran en las plantas y en los animales son derivados de hidratos de carbono; la misma síntesis de proteínas se lleva a cabo con los aminoácidos provenientes de la reacción entre hidratos de carbono y diversas sustancias nitrogenadas. 1 This study source was downloaded by 100000827078593 from CourseHero.com on 06-21-2022 01:10:37 GMT -05:00 https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ Los carbohidratos se clasifican de acuerdo a su complejidad en monosacáridos, disacáridos (oligosacáridos) y polisacáridos. Los monosacáridos como la glucosa, fructosa, arabinosa y galactosa son carbohidratos simples y no pueden ser hidrolizados. Son buenos agentes reductores porque reducen los reactivos de Fehling, Benedict y Barfoed (Fig. 1). Todos los disacáridos son reductores, exceptuando la sacarosa. Por otra parte, dependiendo del número de carbonos, los carbohidratos se pueden clasificar como pentosas (5 átomos de carbono) y hexosas (6 átomos de carbono). Figura 1. Reacción de carbohidratos con el reactivo de Benedict. Los disacáridos como la sacarosa, maltosa y lactosa se pueden hidrolizar en dos moléculas de monosacáridos. Por ejemplo, la hidrólisis de la sacarosa produce glucosa y fructosa. Los polisacáridos pueden ser considerados polímeros por estar formados por muchas unidades de monosacáridos. El almidón y la celulosa son los polisacáridos más simples. El almidón, por ejemplo, se hidroliza en etapas; primero se forman dextrinas, luego maltosa y por último, glucosa. Sin embargo, el glucógeno, es el polisacárido de reserva de glucosa en nuestro cuerpo. Todos estos polisacáridos y sus derivados presentan complejos coloreados con la solución de yodo. La mayor parte de los hidratos de carbono se deshidratan con ácido sulfúrico concentrado para formar furfural o hidroxi-metilfurfural (Fig. 2). Estos compuestos reaccionan con el 2 This study source was downloaded by 100000827078593 from CourseHero.com on 06-21-2022 01:10:37 GMT -05:00 https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ reactivo de Molisch (α-naftol) generando un producto de color púrpura en forma de anillo el cual se forma en la interface de las soluciones. Figura 2. Reacción de deshidratación de carbohidratos con ácido sulfúrico. En medio acuoso ácido una cetosa se deshidrata más rápidamente que una aldosa, formándose 5-hidroxi-metilfurfural. De tal forma que este último reacciona con resorcinol para generar un producto condensado de color rojo cereza (Fig. 3). 9 Figura 3. Reacción de aldosas con el reactivo de Sellivanoff. III. MATERIALES 1- Solución alcohólica de α-naftol al 5 % 2- H2SO4 concentrado 3- Reactivo de Seliwanoff 4- Reactivo de Benedict 5- Reactivo de Fehling A 3 This study source was downloaded by 100000827078593 from CourseHero.com on 06-21-2022 01:10:37 GMT -05:00 https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ 6- Reactivo de Fehling B 7- Reactivo de Bial 8- Reactivo de Barfoed 9- Solución 0,01 M de Yodo 10- Soluciones acuosas de glucosa, fructosa, sucrosa, maltosa, ribosa (o arabinosa) y almidón al 0,5 % m/v. 11- Soluciones de dextrina y glucógeno al 1 % m/v. IV. MÉTODO A. Reacción de Molisch (prueba general para glúcidos) Coloca en tres tubos de ensayos debidamente rotulados 2 mL de glucosa, sucrosa y almidón al 0,5 % respectivamente. Adiciona 2 gotas de la solución de α-naftol (reactivo de Molisch) a cada tubo y mezcla bien. A continuación agrega a cada tubo 2 mL de ácido sulfúrico concentrado con mucho cuidado: para ello incline el tubo de ensayo y deje resbalar el ácido, contenido en una probeta de 10 mL, por las paredes de manera que se deposite en el fondo del tubo formándose una bicapa con un anillo de color violeta en la interfase. Coloca los tubos de ensayos sin agitar en la gradilla, observa y anota tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=9kD9sRAf2TM B. Reacción de Selliwanoff (prueba para identificar cetosas) Coloca en 3 tubos de ensayos debidamente rotulados 3 mL del reactivo de Seliwanoff y a continuación 6 gotas de las soluciones de fructosa, glucosa y sucrosa al 0,5% respectivamente y agita. Coloca los tubos en baño maría y calienta hasta que aparezca un color rojo cereza característico que indica la presencia de cetosas. Toma el tiempo de demora en formarse el complejo coloreado en cada tubo. También prepara un testigo con 6 gotas de agua destilada, observa y anota tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=TUY7UjOme3g C. Reacciones debidas al poder reductor de los azúcares 4 This study source was downloaded by 100000827078593 from CourseHero.com on 06-21-2022 01:10:37 GMT -05:00 https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ 1. Reacción de Benedict Coloca 5 mL del reactivo de Benedict en cada uno de 4 tubos de ensayos debidamente rotulados. Añade a continuación 8 gotas de la soluciones de glucosa, sucrosa, maltosa y almidón al 0,5% respectivamente. Coloca los tubos en baño maría aproximadamente por 3 minutos; observa, anota y compara tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=bVvy2UTfcl4 2. Reacción de Fehling Prepara el reactivo de Fehling mezclando en partes iguales las soluciones de Fehling A y B. Coloca 3 mL del reactivo en cada uno de 4 tubos de ensayos debidamente rotulados. Añade a continuación 5 gotas de glucosa, sucrosa, maltosa y almidón al 0,5% respectivamente. Pon los tubos en un baño María aproximadamente por 3 minutos. Observa, compara y anota tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=_C1llXoimns 3. Reacción de Barfoed (prueba para diferenciar disacáridos y monosacáridos) Coloca 3 mL del reactivo de Barfoed en cada uno de 3 tubos de ensayos debidamente rotulados. Adiciona a continuación de 5 a 10 gotas de glucosa, maltosa y sucrosa al 0,5% respectivamente. Coloca los tubos en un baño María por 5 minutos. Observa, compara y anota tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=yQfMqvOxPrc D. Reacción de carbohidratos con Yodo Los polisacáridos forman diferentes complejos coloreados con el yodo. Así, los polisacáridos lineales y helicoidales como el almidón presentan un color azul intenso, el glucógeno forman un complejo de color vino tinto, la dextrina tiene un color que va de rojo purpura a rojo chocolatoso y la maltosa una coloración amarillo pardo. 5 This study source was downloaded by 100000827078593 from CourseHero.com on 06-21-2022 01:10:37 GMT -05:00 https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/Coloca en 4 tubos de ensayos debidamente rotulados 2 mL de solución de almidón, glucógeno, dextrina y agua como blanco respectivamente. Agrégale a cada tubo 3 gotas de la solución de yodo. Observa, compara y anota tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=VV5RBdK_hng E. Reacción de Bial (prueba para determinar la presencia de pentosas) Coloca en cada uno de 4 tubos de ensayos debidamente rotulados 1 mL de solución de glucosa, sacarosa, arabinosa al 0,5% y agua respectivamente. Añade a continuación a cada tubo 2 mL del reactivo de Bial, coloca los tubos en baño María hasta observar una coloración verde azulado pronunciada. Observa, compara y anota tus resultados. Videografía: https://www.youtube.com/watch?v=JboA8Ghyz5A V. Cuestionario 1. ¿Cuál es la probable fórmula estructural del complejo coloreado que se forma en la prueba de Molisch? 2. Además del α-naftol, ¿qué otra sustancia se puede emplear como reactivo? 3. ¿Por qué algunas proteínas dan esta reacción? 4. ¿A qué se debe que el calentamiento prolongado de la maltosa con el reactivo de Seliwanoff da un color rojo cereza si la maltosa no es una cetosa? 5. Además de las sales de cobre, ¿Cuáles otros metales se pueden emplear para las reacciones de poder reductor? 6. ¿Cuál es la diferencia entre el reactivo de Benedict y de Fehling? 7. ¿Qué sustancia en la orina interfiere con la reacción de Benedict? 8. ¿Para qué es útil la prueba de Barfoed? 9. Explique el por qué las diferencias de colores entre los polisacáridos ante la presencia de la solución de yodo. 10. ¿Por qué es necesario utilizar ácido fuerte para el tratamiento de los azucares en la prueba general de los glúcidos? 11. Usted tiene unas muestras desconocidas: Vial A y Vial B y desea saber qué tipo de azúcar podrían contener. Se les realizaron las pruebas correspondientes arrojando los siguientes resultados: Vial A: anillo de color rojo, coloración rojo cereza y precipitado rojo en Barfoed y Benedict. Vial B: coloración rojo vino ante la prueba de yodo, no precipita a la prueba de Benedict y Barfoed. En base a esos resultados, explique brevemente que azucares están en cada vial. 6 This study source was downloaded by 100000827078593 from CourseHero.com on 06-21-2022 01:10:37 GMT -05:00 https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ Powered by TCPDF (www.tcpdf.org) https://www.coursehero.com/file/74392799/EXPERIMENTO-N-6-BQMdocx/ http://www.tcpdf.org
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