Prácticas en hematología

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Extracción sanguínea
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8.- La aguja se remueve de la jeringa por un movimiento de torsión y la sangre se vacía lentamente en el tubo de ensaye. 
7.- En cuanto se tenga la jeringa suficiente cantidad de sangre, se suelta el torniquete. Luego (de ninguna manera antes de soltar el torniquete) la aguja se repetirá rápidamente y se aplica una torunda de algodón sobre el sitio de la punción, indicando al paciente que la comprima con los dedos de la otra mano.
6.- La sangre puede s ubir espontáneamente en la jeringa pero si no es así, jala ligeramente el embolo, a una velocidad igual a la del flujo de la sangre. 
5.- Quitar el estuche protector de la jeringa y se toma esta de manera que le bisel de la aguja se encuentre hacia arriba. Sujeta la parte posterior del brazo del paciente a nivel del codo y se jala la piel ligeramente sobre la vena, poniendo la aguja paralela al trayecto de la vena, se perforara la piel a lo largo de la cara lateral de la vena. Se hace avanzar la punta de la aguja de 0.5 a 1.0 cm en el tejido subcutáneo y luego se perfora la parte de la vena. 
4.- Aplicar un torniquete de caucho blando a tres dedos del pliegue del codo. El torniquete no debe apretarse demasiado pues cerraría la arteria además de las venas.
3.- Preparar el brazo frotando la región anterior del antebrazo, con una torunda de algodón estéril empapado de alcohol al 70 %. 
2.- Acomodar el paciente en una posición adecuada, en la cual pueda presentar el brazo y mantenerlo inmóvil sin esfuerzo ni fatiga.
1.- Preparar un jeringa estéril seca de tamaño conveniente, observando las reglas de la asepsia, y se adapte una aguja de longitud mediana, estéril, de bisel corto de calibre 18 o 20; el protector estéril de la aguja se deja sobre esta para protegerla.
Materiales
Metodología
· Algodón
· Jeringa desechable estéril
· Aguja desechable estéril
· Torniquete
· Tubo de ensaye de 13 x 100mm
· Alcohol al 70%
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Tinción de Wright
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Materiales
Metodología
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Se observa al microscopio en el objetivo de 100x.
 Una vez seco, se le agrega una gota de aceite de inmersión.
Se enjuaga y se deja secar al aire libre.
Cubrir la muestra con agua destilada mezclar sin tirar el colorante. Se deja actuar 4 minutos.
Con la pipeta Pasteur se añade colorante de Wright sobre el frotis de manera que quede completamente cubierto. Se deja actuar durante 3 minutos.
En el puente de tinción se coloca el frotis en posición horizontal.
Dejar que la muestra seque al aire libre.
Una vez obtenida, se procede a hacer un frotis a partir de una gota de sangre de la muestra. 
Hacer una extracción de sangre, ya sea por vía venosa o cutánea.
· Pipeta Pasteur
· Puentes de tinción
· Microscopio Solución de eosina-azul de metileno según Wright.
· Agua destilada.
· Aceite de inmersión.
Frotis sanguíneo
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Materiales
Metodología
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Secar la extensión.
Rotular el porta soporte y confirme que la extensión esté bien hecha:
- No deberá haber líneas a lo ancho ni a lo largo del frotis.
- El extremo de la extensión deberá terminar suave y gradualmente, sin desgarros ni vetas como los que se observan en la figura B.
- La extensión no deberá ser demasiado larga.
- Tampoco deberá ser demasiado gruesa.
- No deberá tener espacios vacíos (esto debido a que se ha usado un portaobjetos con grasa).
A continuación, deslice el portaobjetos recortado hacia el extremo opuesto del portaobjetos que contiene la gota de sangre con un movimiento suave (se deberá agotar la gota de sangre antes de llegar al extremo del portaobjetos).
Deje que la gota de sangre se extienda por el borde del portaobjetos.
· Portaobjetos de vidrio, limpios y desengrasados.
· Pipeta.
Colocar el porta extensor y desplazarlo.
Depositar una gota de sangre sobre el portaobjetos con ayuda de una pipeta.
Determinación de VSG (Velocidad De Sedimentación Globular)
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Materiales
Metodología
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El resultado se reporta en mm en una hora.
El punto de la escala milimétrica hasta el que los eritrocitos han descendido en una hora justa, indica la Velocidad de Sedimentación Globular.
El tubo rellenado se coloca en una posición absolutamente vertical en una gradilla adecuada y se deja a la temperatura ambiente durante una hora.
Con una aguja metálica adaptada a una jeringa o empleando una pipeta Pasteur, se llena un tubo de Wintrobe hasta la marca 10. Esto se hace introduciendo la aguja metálica hasta el fondo del tubo. A medida que la sangre se deposita, se va retirando la aguja; permaneciendo la punta de la misma por debajo del menisco de la sangre. Esto impide la formación de burbujas de aire en el tubo.
Se extraen 3 ml de sangre y se colocan en un tubo de ensaye que contiene un anticoagulante de preferencia el E.D.T.A.
· Gradilla
· Tubo de ensaye con anticoagulante.
· Tubo de Wintrobe
· Cánula o Aguja metálica con jeringa.
· Pipeta Pasteur
· Cronómetro
· Anticoagulante E.D.T.A.
Determinación de hematocrito
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Materiales
Metodología
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· Gradilla
· Tubo de ensaye con anticoagulante 
· Tubo de Wintrobe
· Aguja Metálica (Cánula) con jeringa 
· Jeringa con aguja verde de 2 ml
· Torunda de algodón con alcohol
· Capilar con anticoagulante Heparina
· Centrífuga
· Micro centrífuga con lector
· Anticoagulante
Cuando el tubo de Wintrobe no se logra llenar hasta la marca 10, se emplea la siguiente fórmula para obtener el porcentaje del Hematocrito. 
100 L1
% H t = ------------ donde
L2
L1: Altura de la columna de glóbulos rojos sedimentados 
L2: Altura de toda la muestra y Ht = Hematocrito 
La cifra señalada por el nivel de eritrocitos sedimentados multiplicada por 10, le da el volumen total de ellos por 100 c.c. de sangre.
Una vez llenado el tubo de Wintrobe se centrifuga durante el tiempo suficiente para obtener la sedimentación completa de los glóbulos rojos, lo que suele conseguirse de 20 a 30 minutos de 2, 500 a 3, 000 R.P.M.
Se introduce la punta de la aguja metálica hasta el fondo del tubo de Wintrobe y a medida que se llena se va sacando la aguja metálica, permaneciendo por debajo del menisco de la sangre, para evitar la formación de burbujas de aire.
. Se llena el tubo de Wintrobe (de preferencia con un solo intento) exactamente hasta la marca 10 grabada en el lado derecho de la escala mediante la aguja metálica adaptada a una jeringa.
Se mezcla La cifra señalada por el nivel de eritrocitos sedimentados multiplicada por 10, le da el volumen total de ellos por 100 c.c. de sangre.cuidadosamente la sangre con el anticoagulante, invirtiendo lentamente el tubo de ensaye, esto por lo menos de ocho a diez veces.