Bacteriologia laboratorio I

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FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD 
PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA
	
	Bacteriología laboratorio II
	Informe #1: Identificación de enterobacterias en EDA
	Docente: Margarita María Díaz Durango Bacterióloga, MSc. en Salud Pública
 
	
 Berrio García Paula
 Gómez Emanuel 
 Flórez María Angelica 
 Programa: BACTERIOLOGÍA
 Montería, Córdoba – 2021-II
Tabla de contenido
INTRODUCCIÓN	3
OBJETIVOS	4
MATERIALES	4
PROCEDIMIENTO	4
RESULTADOS Y ANALISIS	6
ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS	10
PRE-LABORATORIO	10
POST-LABORATORIO 	12
REFERENCIAS	17
INTRODUCCIÓN
La familia Enterobacteriaceae caracterizada por estar conformada por bacterias con características como: ser bacilos Gram negativos, Oxidasa negativos, es decir que no hay presencia de la enzima citocromo oxidasa, a su vez son capaces de fermentar la glucosa más solo algunas que conforman a esta familia son capaces de fermentar la lactosa, estas y otras más nos permiten identificarlas. Algunos microorganismos que hacen parte de la familia son responsables de causar infecciones a nivel del tracto gastrointestinal o conjunto de órganos enlazados a lo largo en el inicio y ensortijados inferiormente que se ubican desde nuestra boca hasta el ano. Junto a la ya menciona hay un segundo grupo causador de graves cuadros de gastroenteritis, el Rotavirus famoso por causar afecciones en las patologías infantiles por ser un virus altamente contagioso por lo cual no es anormal observar que cualquier niño o niña contraiga este padecimiento sin depender del estatus en el que se encuentre este ya que este tiene la capacidad de sobrevivir durante varias horas en las manos sumado a eso por varios días en superficies solidas como por ejemplo en los utensilios, etc. Un último grupo identificado hasta la actualidad está representado por los parásitos, organismos que viven a expensas de otro ya sea en su exterior o exterior, en estos casos es más común que los causantes de estas enfermedades son las amebas organismos unicelulares de la familia Amoebidae que posee 5 especies registradas, también son llamadas como disentería amebiana identificadas por ser una infección de tipo intestinal, la Giardia que es característica por ser un protozoario flagelado, la infección por ella presenta cólicos estomacales frecuentes, diarrea acuosa , así mismo se identificó que está ubicada en muchas zonas una de ellas en especial son las que poseen menos higiene junto a agua contaminada. Por último, los helmintos que a diferencia de los demás mencionados es un organismo grande y multicelular visibles cuando estos alcanzan una adultez en un tiempo determinado teniendo en cuenta que estos no podrán reproducirse en el organismo humano. Estos microrganismos poseen caracteres propios de sus patologías que les permite identificar mientras los mismos se desarrollan sus patologías específicas de cada uno, por ejemplo, la adherencia a la mucosa intestinal, poder invasivo y por último pero fundamental tener presente que estas generan o activan la producción de toxinas. Cuando se dan afecciones gastroenteritis infecciosas o como también son llamadas por el personal del área respectiva de la salud EDA ( enfermedades diarreicas agudas) se dan sin tener en cuenta la edad ni m mucho menos los niveles económicos no obstante esto se presenta con mayor frecuencia en los pertenecientes a niveles económicos bajos que les conduce a vivir lamentablemente en situaciones precoces y expuestas mayormente a contraer cualquiera de estas, hoy en día es muy difícil que los pacientes acudan a observación cuando se dan ya que ellas suelen ser autoresolvibles con métodos de medicina tradicional o herbal , todos tienen como la principal vía de contagio o transmisión el área fecal-oral dando por consiguiente síntomas como disentería, diarrea acuosa o mucosa, malestar general, fiebre, escalofríos entre muchas más, donde la mayor parte de contagio fecal- oral suele ser por la falta de higiene del área como también la ingestión exacta del número del microorganismo para generar esta enfermedad son temas que aunque no se les da la importancia e investigación que debería aún siguen siendo un misterio por resolver y estudiar todos estos casos en pro de los avances científicos para una mejor salud a los ciudadanos y por ende un mejor estilo de vida sin temor y estable para los niños, jóvenes, adultos y adultos de la tercera edad. 
OBJETIVOS
· Identificar las enterobacterias relacionadas con EDA.
· Conocer y diferenciar los procedimientos para realizar un coprocultivo como examen diagnóstico de EDA
· Analizar los resultados obtenidos y elaborar un informe escrito.
MATERIALES
	Marcador de vidrio o marcador permanente delgado
	Colorantes para Gram
	Encendedor
	Asas bacteriológicas 
	Cinta de enmascarar
	Incubadora
	Agares entéricos: EMB, Hecktoen, XLD, MacConkey, SS, Bismuto-sulfito
	Lamina porta objetos
	Agar no selectivo: Agar sangre
	Microscopios
	Caldo Selenite o Tetrationato
	Palillos
	Pruebas bioquímicas: SIM, Urea, Citrato, TSI, MR, VP, LIA.
	Aceite de inmersión 
	Tirillas de oxidasa
	Reactivos: Kovacs, Rojo de Metilo, Alfa naftol al 5% y KOH al 40%
	Cepas bacterianas (E. coli, Salmonella, Shigella) sembradas en Agar Nutritivo y BHI.
	Papel Kraft
	Descartadores
	
PROCEDIMIENTO
Es importante tener en cuenta:
 1) La orden clínica para verificar que el nombre del examen coincida con la misma a su vez que examen se va a realizar 
2) Hacer un avistamiento general de la muestra desde lejos (examen macroscópico) observando si la misma esta purulenta, clara, sanguinolenta, de ser como la última es recomendable tomar de allí. 
3) Con asa estéril tomar y preenrriquecer está en caldo selenito por 6-8 hrs 37° en aerobiosis no más de allí ya que ese es el lapso de tiempo donde pueden actuar los agentes inhibidores, sembrar en cámara de flujo laminar. 
4) cultivar en Agar SS 37° por 24 hrs y observar las colonias sospechosas.
5) Gram de las colonias: las colonias sospechosas se les realiza un Gram (Gram del Cultivo). Donde después de hacer cada paso cuidadosamente de la tinción, respetando los tiempos estipulados para cada colorante, en el microscopio se evidencio bacilos Gram negativos (–) 
6) Prueba Oxidasa: Con un palillo de madera tomamos una colonia sospechosa de nuestro cultivo y impregnamos en la tira por 30 segundos. 
Pruebas bioquimicas para establecer cuál es el género y la especie de la Enterobacteria aislada.
7) TSI: Realizamos una siembra por picadura y estría con un asa recta, incubamos a 37°c durante 24 horas, en atmosfera de aerobiosis. 
8) Medio de SIM: A partir de una colonia aislada realizamos una siembra vertical por picadura con asa recta en el centro, incubamos a 37°c durante 24 horas, en atmosfera de aerobiosis. 
9) Simmons citrato: Para esta prueba, de una colonia aislada hicimos una siembra en estría en tubo con medio solido inclinado, incubamos a 37°c durante 24 horas, en atmosfera de aerobiosis. 
10) LIA: A partir de una colonia aislada, tomamos un asa recta y sembramos picando el fondo del tubo sin tocar el fondo y extendiendo sobre la superficie en forma de zigzag, incubamos a 37°c durante 24 horas, en atmosfera de aerobiosis. 
11) UREA: A partir de una colonia aislada, hicimos una estría en la superficie del pico de flauta, cuidando de no punzar la capa profunda, incubamos a 37°c durante 24 horas, en atmosfera de aerobiosis. 
12) Rojo de metilo (RM): Inoculamos directamente del cultivo de estudio y con la ayuda de un asa redonda, agitamos suavemente, incubamos a 37°c durante 24 horas, en atmosfera de aerobiosis, luego de que paso este tiempo agregamos 5 gotas del reactivo rojo de metilo al 0.04%
RESULTADOS Y ANALISIS 
Con respecto a los medios de cultivo usados, tuvimos preferencia por el agar SS puesto que son medios selectivos diferenciales para bacterias entéricas gramnegativas, en especial para el género salmonella
Después depasadas las 24 horas, observamos las colonias sospechosas; las cuales eran redondas, grandes, transparentes con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro. 
Posteriormente aplicamos las distintas pruebas bioquímicas a las colonias sospechosas para empezar con la identificación de genero y especie. 
A. Prueba oxidasa: Pasado 30 segundos, no observamos cambio de coloración, así que se reconoció que fue oxidasa negativa (–) 
B. TSI: Pasado el tiempo, observamos los resultados obtenidos; se interpretó un K/A, es decir, no hubo fermentación lactosa sino de glucosa al fondo con producción en el segundo tubo de H2s.
C. Medio SIM: Luego de 24h, se observó el medio, donde se vio Indol negativo (-), pues al agregar dos gotas del reactivo de Kovacs no hubo aparición de un anillo de color rojo; hay Motilidad, pues se evidencia turbidez y producción de H2s ya que el medio esta ennegrecido. 
9) Simmons Citrato: donde al cabo del tiempo establecido se interpretó la prueba (-) 
10) LIA: donde, la lisina descarboxilasa esta positiva (+), pues se presenta un pico y fondo violetas (K/K) y además hay producción de H2S, ya que hay un ennegrecimiento del medio 
11) UREA: Después de transcurrido el tiempo, no hay cambios en la coloración de medio, es decir que la prueba es negativa y el microrganismo estudiado no hidroliza la urea. 
12) RM + y VP -
 Rojo de metilo + VP -
Resumen pruebas bioquímicas
	TSI
	H2S
	CITRATO
	LIA
	UREA
	INDOL
	MOVILIDAD
	RM
	VP
	K/A
	+
	NO
	K/K
	NO
	NO
	SI
	+
	NO
Con todo lo anterior en mente y tras haber analizado cada uno de los resultados, desde las colonias obtenidas hasta las pruebas bioquímicas y sus respectivos resultados, se llegó a la conclusión de que el agente patógeno de la muestra analizada, es Salmonella subespecie typhi. 
ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS
PRE-LABORATORIO
1. Investigue acerca el fundamento del caldo Selenite, Tetrationato, Rappaport y caldo para Gramnegativos.
· Caldo Selenite: En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe flora Gram positiva y la mayoría de la flora entérica excepto Salmonella spp. durante las primeras 8-12 horas de incubación. (Laboratorios Britania, 2005, 01)
La L-cistina es el agente reductor y la FDA propuso que se agregue a la formulación del Selenito Caldo porque reduce la toxicidad del selenito de sodio llevando así a una mayor recuperación de especies de Salmonella. (Laboratorios Britania, 2005, 01).
· Caldo Tetrationato: Las peptonas presentes corresponden a digeridos pancreáticos de caseína y digerido péptico de tejido animal. Estas proporcionan la fuente de carbono, nitrógeno y nutrientes en general para el crecimiento bacteriano. (Gil, 2019) Por su parte, el tiosulfato de sodio reacciona con la solución yodurada para formar tetrationato. Este inhibe el crecimiento de coliformes y favorece el desarrollo de bacterias que contienen la enzima tetrationato reductasa, entre ellas se encuentra el género Salmonella, pero también Proteus. (Gil, 2019) 
Las sales biliares también actúan como sustancia inhibidora de la mayoría de las bacterias Gram positivas y algunas Gram negativas (coliformes). (Gil, 2019)
El carbonato de calcio absorbe las sustancias tóxicas generadas por la descomposición del tetrationato, lo cual forma ácido sulfúrico. En este sentido, el carbonato de calcio neutraliza la acidez manteniendo el pH del medio estable. (Gil, 2019)
En el caso de la modalidad con verde brillante, esta sustancia aumenta el poder selectivo del caldo tetrationato al inhibir otros microorganismos distintos al género Salmonella. (Gil, 2019)
· Caldo Rappaport: Medio de cultivo desarrollado originalmente por Rappaport et al (1956) y luego modificado por Vassiliadis et al (1976-1983) en el cual se disminuyó la concentración de verde de malaquita. Es un medio de cultivo nutritivo que contiene un sistema buffer de fosfatos, alta concentración de sales de magnesio y sodio y la presencia del colorante verde de malaquita (oxalato). (Laboratorios Britannia, 2009, 01) 
El enriquecimiento selectivo de especies de Salmonella se debe a la capacidad de estos microorganismos de sobrevivir y multiplicarse a presiones osmóticas relativamente altas (debido a la elevada concentración de cloruro de magnesio en el medio), a pH relativamente bajos, y porque se suprime el efecto tóxico del verde de malaquita hacia las salmonellas debido a la presencia de cloruro de magnesio. La incubación a 41-42 ºC favorece la selectividad hacia las salmonellas. (Laboratorios Britannia, 2009, 01).
· Caldo para Gramnegativos: Se emplea como caldo selectivo para el cultivo de Salmonella y Shigella a partir de muestras de heces e hisopos rectales. Contiene citrato de sodio y desoxicolato sódico (una sal biliar) que destruyen los microorganismos Gram positivos e inhiben la multiplicación temprana de los coliformes. La adición de mayor cantidad de manitol que de glucosa estimula el crecimiento de los patógenos fermentadores de manitol y no es favorable para Proteus. El medio se tampona para mantener el pH neutro aún después de la producción de metabolitos bacterianos ácidos. (Gran Farmacéutica, 2008)
 Para obtener el máximo beneficio de sus propiedades selectivas, el caldo GN debe ser sub cultivado después de 6-8 horas tras la inoculación e incubación iniciales, ya que después de este período los coliformes sobrepasan a los patógenos. (Gran Farmacéutica, 2008).
2. ¿Por qué se debe realizar un pre- enriquecimiento selectivo a las muestras de heces?
R/ Se debe hacer un pre-enriquecimiento selectivo puesto que generalmente las enterobacterias que causan enfermedades se presentan en menor proporción y se nos hace necesario hacer uso de esto. 
3. ¿Cuáles son los microorganismos de importancia clínica productores de gastroenteritis de tipo infeccioso?
R/ Las bacterias capaces de causar gastroenteritis de tipo infeccioso son las siguientes: E.coli(enterotoxigénica,enteropatógena,enterohemorrágico,enteroinvasivo,y enteroagregativo); Shigella sp. (S.dysenteriae (serogrupo A, 13 serotipos), S.flexneri (serogrupo B, 6 serotipos), S.boydii (serogrupo C, 18 serotipos), y S.sonnei (serogrupo D, 1 serotipo)); Salmonella sp.; Campylobacter sp. ( C.jejuni, C.coli, C.laridis, y C.upsaliensis); Yersinia sp.(Y.enterocolitica); Bacillus cereus; Staphylococcus aureus; Clostridium perfringens; Vibrio sp.(V.cholerae. V. parahaemolyticus, V.hollisae, y V.fluvialis); Aeromonas mesófilas (A.hydrophila, A.caviae, A.veronii y A.trota); Plesiomonas shigelloides; Clostridium difficile. (Vila et al., 2009, 407-408)
La causa más frecuente de gastroenteritis vírica es el Rotavirus del grupo A, principal agente etiológico de gastroenteritis infantil. Otros virus productores de estas infecciones son los Astrovirus, Adenovirus entéricos, Calicivirus (Norovirus y Sapovirus) además de otros agentes con una prevalencia menor o desconocida, como Coronavirus, Torovirus, Picobirnavirus, Kobuvirus (virus Aichi), Bocavirus, etc. (Vila et al., 2009, 409-410)
Las parasitosis intestinales son una causa frecuente de trastornos gastrointestinales. Tanto los protozoos (amebas, flagelados, ciliados, coccidios y microsporidios) como los helmintos (nematodos, cestodos y trematodos) pueden producir gastroenteritis de tipo infeccioso. (Vila et al., 2009, 411).
4. ¿Qué medios de transporte son utilizados para las muestras de materia fecal? 
R/. Se utilizará en caso de que la muestra tarde más de 2 horas en llegar al laboratorio. Puede usarse para hisopados fecales (introduciendo el hisopo directamente en la muestra tomando una parte de ella) o para hisopados rectales (toma de la muestra introduciendo el hisopo a través del ano del paciente). (Organización Panamericana de la Salud, 2010, 02)
POST-LABORATORIO
1. Investigue la colección y conservación adecuada para muestras de hecesen el laboratorio de microbiología.
R/ Para el estudio bacteriológico es suficiente enviar la muestra en un recipiente estéril si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su emisión. En caso contrario se remite en un sistema de transporte para bacterias. En ambos casos se mantiene en refrigeración hasta el procesamiento, para evitar el sobrecrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatógenos. El frío puede afectar la viabilidad de Shigella spp. Para el estudio de toxinas de C. difficile, la muestra se puede mantener hasta 48 horas en refrigeración, congelada a -20ºC se puede mantener indefinidamente. Este tipo de muestra, preferiblemente sin medio de transporte, es indispensable para el examen en fresco, el ensayo de las toxinas de C. difficile, detección por concentración de huevos o parásitos y estudios virológicos (cultivos, inmunoelectromicroscopia, ELISA, o látex para rotavirus). (García Sánchez et al., 1993, 11)
Es preferible enviar las muestras para estudio virológico sin medio de cultivo, pues este diluye las partículas virales disminuyendo la sensibilidad. Si su envío se retrasa mucho es necesario utilizar un medio de transporte. Se enviarán en recipientes colocados en hielo. Para el estudio de parásitos es útil, además, enviar una muestra pequeña en un medio fijador. Una parte en dos de fijador de alcohol polivinílico. (García Sánchez et al., 1993, 11).
2. ¿Para qué se utiliza el Agar MacConkey con sorbitol? investigue su fundamento 
R/BD MacConkey Agar with Sorbitol (agar MacConkey con sorbitol BD), también conocido como Sorbitol MacConkey Agar (SMAC) es un medio de diferenciación parcialmente selectivo para el aislamiento de E. coli O157:H7 a partir de muestras clínicas, veterinarias, alimentarias y medioambientales. (BD Diagnostic Systems, 2003, 01).
E. coli enterohemorrágica (EHEC) O157:H7 fue reconocida por primera vez como patógeno humano en 19821. Hasta el día de hoy, el serotipo O157:H7 es, sin lugar a dudas, el organismo responsable de esta enfermedad con mayor frecuencia, aunque de vez en cuando otros serotipos de E. coli pueden estar involucrados en este tipo de infección u otras similares. Debido a la producción de toxinas similares a Shiga (SLT, verocitotoxina), el serotipo O157:H7 de E. coli es conocido por estar involucrado en casos de diarrea, colitis enterohemorrágica grave y el síndrome urémico hemolítico (HUS). En términos epidemiológicos, el síndrome es una enfermedad de transmisión por vía alimentaria, a menudo relacionada con el consumo de carne bovina poco cocida u otros alimentos derivados de fuentes animales tales como leche cruda. (BD Diagnostic Systems, 2003,)
Habitualmente, las cepas O157 son diferentes de las cepas normales de E. coli por dar resultado negativo a sorbitol y beta-glucuronidasa (ß-gluc). Por tanto, se pueden diferenciar de E. coli normal mediante pruebas bioquímicas, cuando se incluyen los sustratos adecuados en los medios bacteriológicos. El agar MacConkey Sorbitol (= SMAC) fue uno de los medios que se utilizaron primero para aislar estos organismos. (BD Diagnostic Systems, 2003,)
El agar MacConkey con sorbitol es una modificación de la fórmula proporcionada por Rappaport y Henig para aislar los serotipos 011 y 055 de Escherichia coli enteropatógena. Se ha descrito la utilidad de este medio para detectar E. coli O157:H7, un patógeno humano asociado con la colitis hemorrágica. Este medio emplea D-sorbitol y no lactosa para aislar y diferenciar los serotipos enteropatógenos de E. coli que tienden a dar resultados negativos a sorbitol. Se puede utilizar para el análisis de muestras clínicas y alimentos. (BD Diagnostic Systems, 2003,). En BD MacConkey Agar with Sorbitol, las peptonas son fuentes de nitrógeno. D-Sorbitol es un carbohidrato fermentable. La mayoría de las cepas hemorrágicas de E. coli no fermentan Dsorbitol y producen colonias incoloras en agar MacConkey Sorbitol. Las sales biliares y el cristal violeta son agentes selectivos que inhiben el crecimiento de organismos gram positivos. El rojo neutro es un indicador del pH. (BD Diagnostic Systems, 2003,).
3. En caso de que el médico ordene un antibiograma ¿Qué antibióticos utilizaría? 
A. Penicilina naturales (penicilina G y penicilina V). en casos de gastroenteritis por 
C. perfringens. (Zolezzi, 1997)
B. Ampicilinas (ampicilina y amoxicilina). Están indicados en infecciones entéricas por Shigella y salmonella, en la fiebre tifoidea y paratifoidea. (Zolezzi, 1997)
C. Penicilinas de espectro extendido (Ticarcilina, Mezlocilina y Piperacilina). Estos agentes son de prescripción parenteral; son activos contra cocos aeróbicos gram positivos como otras penicilinas, pero son más activos contra enterobacterias y pseudomona aeruginosas. (Zolezzi, 1997)
D.CEFALOSPORINAS DE SEGUNDA GENERACIÓN (Cefoxitina, Cefotetan y Cefmetazol). Tienen un espec­tro mayor de cobertura de aerobios gram-negativos y son activos contra anaerobios, en particular B. fragilis. (Zolezzi, 1997)
E.LAS CEFALOSPORINAS DE TERCERA GENERACIÓN (Cefotaxime, Ceftriaxona, Cefoperazona, Ceftizoxime y Ceftazidime). Poseen una cobertura superior sobre gram negativos que las cefalosporinas de generaciones previas. No son activos contra enterococos. El ceftazidime es activo contra P. aeruginosa. Son activos contra anaerobios gram positivos y bacteroides, pero los expertos prefieren otros agentes para su tratamiento. Las cefalosporinas también alcanzan altas concentraciones en bilis, en especial la ceftriaxona. (Zolezzi, 1997)
F. Aztreonam. Se utiliza en infecciones gastroin­testinales severas en la que la causa son bacilos gram negativos aeróbicos. No afecta significativamente la microflora intesti­nal. (Zolezzi, 1997)
G. Aminoglucósidos. Son un grupo de antibióticos que tienen gran utilidad en el tratamiento de infecciones gastrointestinales severas causadas por bacilos gram negativos. Se usan con más frecuencia la gentamicina y la amikacina. (Zolezzi, 1997)
H. Quinolonas. Las quinolonas con mayor información clínica sobre su actividad en infecciones gastrointestinales son la ciprofloxacina, la ofloxacina y la norfloxacina. Su acción es sobre la mayoría de patógenos entéricos, destacando su acción sobre Salmonella, Shigella, E. coli, Y. Enterocolitica, especies de vibrio, C. jejuni y P. aeruginosa. Son activos in vitro contra el H. pylori, pero su acción en vivo es muy pobre. La mayoría de bacterias anaerobias, incluyendo C. difficile y B. fragilis, son resistentes a las quinolonas. (Zolezzi, 1997)
I. Metronidazol. Es un antibiótico muy usado en infecciones gastroin­testinales. Además de tener excelente actividad contra bacterias anaerobias, es activo contra Giardia lamblia y Entamoeba hystolitica. Es particularmente útil en infeccio­nes piógenas intraabdominales con componentes anaero­bios. (Zolezzi, 1997)
J. TMP/SMX.Es la combinación del inhibidor del dihidrofolato reductasa (trimetropin) y una sulfonamida. Es sumamente útil en el tratamiento de infecciones entéricas por Escherichia coli, Shigella, Salmonella y Cólera. Es también efectivo en el tratamiento del protozoo Isospora belli. Recientemente la resistencia a este agente está aumentando, por lo que es necesario conocer los patrones locales de resistencia bacteriana. (Zolezzi, 1997)
4. Elabore un caso clínico donde esté implicado el germen objeto de estudio.
R/. Hombre de 23 años ingresado al hospital San Jerónimo de Montería por fiebre persistente que no respondía a amoxicilina, paracetamol o ibuprofeno. Reside en la ciudad de Montería y estaba de viaje por zonas rurales del departamento de Córdoba desde hacía 11 días. En la exploración presentaba fiebre, hepatomegalia, dolor abdominal y alteraciones en la analítica de orina. Se obtuvieron hemocultivos en el momento del ingreso hospitalario y al día siguiente se confirmó el crecimiento de S. typhi. Como el microorganismo era sensible a las quinolonas, se eligió este tratamiento. A los 4 días la fiebre desapareció y el paciente recibió el alta para volver a su hogar.CONCLUSIÓN 
A lo largo de esta práctica, hemos estudiado y analizado tanto los requerimientos necesarios que debe tener una muestra para poder ser analizada en el laboratorio como las distintas pruebas bioquímicas que nos van a permitir su identificación. En definitiva, al terminar esta practica nos quedo claro que las enterobacterias implicadas en EDA son principalmente la Shigella, Salmonella, Yersinia, Campylobacter spp, etc. Por otro lado, es un hecho que las enfermedades a nivel gastrointestinal son muy comunes y se van a presentar independientemente de edad o nivel socioeconómico, es por esto que como profesionales de la salud debemos contar con todos los conocimientos necesarios para manejar con total éxito este tipo de infecciones y brindarles a nuestros pacientes resultados confiables y acertados. En relación al tratamiento de la muestra, desde que llega al laboratorio debemos cumplir con una serie de requisitos que no se deben saltar pues, cosas tan básicas como si hay irregularidades con el nombre de la persona al que esta la muestra, pueden hacer que nuestro trabajo se invalide.
Cabe señalar que no solo es de importancia el análisis microscópico de la muestra, pues un examen macroscópico de las heces nos puede ser de mucha ayuda; debemos prestar atención a cualquier peculiaridad que presente la muestra, pues esto más adelante puede ser un justificante de un falso resultado negativo. En el trayecto de nuestra practica también vimos la importancia de los caldos de pre-enriquecimiento para este tipo de muestras, pues son de gran utilidad ya que usualmente hay poca cantidad de enterobacterias patógenas presentes en las muestras fecales. 
Por ultimo y no menos importante, las pruebas bioquímicas para la identificación de las enterobacterias se nos hacen imprescindible, pues nos permite estudiar las características metabólicas de los microorganismos que queremos estudiar, estas pruebas son muy efectivas, pero si no se siguen todas las recomendaciones especificas de cada prueba, puede ocasionarse fluctuaciones en el resultado y por ende equivocarnos en la identificación de genero y especie que hagamos. 
Esta práctica fue muy significativa y nutritiva para nosotros, pues se pudo evaluar los conocimientos teóricos dados en clase y ganamos mucha más experiencia con respecto a la realización de las distintas pruebas bioquímicas. 
 
REFERENCIAS
· BD Diagnostic Systems. (2003, 06). BD MacConkey Agar with Sorbitol. In https://legacy.bd.com/. https://legacy.bd.com/. https://legacy.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/HB/CE/PA/ES-PA-254455.pdf
· García Sánchez, J. E., Gómez, M. L., Centelles, L., Rodríguez López, F. C., & Torreblanca Gil, A. (1993). Procedimientos en Microbiología Clínica Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Juan J. Picazo. https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia1.pdf
· Gil, M. (2019, 03 05). Caldo tetrationato: fundamento, preparación y usos. Lifeder.com. lifeder.com/caldo-tetrationato/
· Gran Farmacéutica. (2008, 11 02). Medios De Cultivo Y Pruebas Bioquímica. Slideshare.net. https://es.slideshare.net/roberchavez/medios-de-cultivo-y-pruebas-bioquimica-presentation
· Laboratorios Britania. (2005). Selenito Cistina Caldo. In Britainlalab.com. https://www.britanialab.com/. https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_607091d369005.pdf
· Laboratorios Britannia. (2009). Rappaport Vassiliadis Caldo. In Britanialab.com. britanialab.com. https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_60707dddb4f87.pdf
· Organización Panamericana de la Salud. (2010). Procedimientos para la identificación de Vibrio cholerae en el laboratorio de microbiología 2010.
· Vila, J., Álvarez, M. J., Buesa, J., & Castillo, J. (2009, 08). Diagnóstico microbiológico de las infecciones gastrointestinales. Elsevier, 27(07), 406-411. 10.1016/j.eimc.2008.11.009
· Zolezzi, A. (1997). Antibióticos en Gastroenterología. Revista de Gastroenterología del Perú, 17(01). 10:835-841 1997