CLASE OBJETVOS HEMATOLOGIA

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TECNICA PARA LA COLORACION DE LOS FROTIS SANGUINEOS 
PRUEBA DE COAGULACION 
Lcda. Luz Marina López
OBJETIVO 11: COLORACIÓN DE LOS FROTIS SANGUINEOS
DEFINICION 
IMPORTANCIA 
TIPOS
FUNDAMENTO
MATERIALES 
TECNICA DE LA PREPARACION
TECNICA DE LA TINCION 
OBSERVACION AL MICROSCOPICO
USOS
DEFINICIÓN DE FROTIS SANGUINEO:
Es un examen de sangre que brinda información acerca del número y forma de las células sanguíneas.
El frotis o extensión muestra la cantidad y los tipos de glóbulos blancos sanguíneos (fórmula leucocitaria), células sanguíneas anormalmente formadas, y arroja un cálculo aproximado de los conteos de glóbulos blancos y de plaquetas.
IMPORTANCIA DE UN FROTIS SANGUINEO
ESTUDIO
SERIE BLANCA 
ELEMENTOS CELULARES
HEMOGRAMA
SERIE ROJA 
PLAQUETAS
 
FROTIS SANGUINEOS
Frotis Sanguíneos: En Portaobjeto.
 En Cubreobjetos. 
FUNDAMENTO
Es una herramienta diagnóstica 
Descarte de enfermedades hematológicas (morfología/proporción de cel. Sanguineas.
COLORANTES
ROMANOWSKY. 
Eosinato de azul de metileno.
Violeta de metileno.
Eosinato de azul. 
Azul B. = COLORANTE BASICO.
Eosina Y. = COLORANTE ACIDO.
COLORANTES
Coloración WRIGHT. 
Solución ya preparada.
En polvo. 
1 gr colorante Wright. 
600 cc de Alcohol metílico.
Mezclar en un mortero (15 días), filtrar y usar. 
Técnica de Coloración Wright
.
Laminas para colorear.
Cubrir con solución Wright. Fijación.
Mezclar y observar en superficie un brillo metálico.
Lavar con agua destilada y secar. 
Técnica de Coloración Giemsa.
Preparación del Colorante.
Azur II eosina 3 gr
Azur II 0,8 gr
Glicerina purísima 125 cc
Alcohol metílico puro 375 cc
Técnica de Coloración Giemsa.
Fijar con metanol el frotis.
Al secar, se cubre la lamina con Giemsa.
Lavar y secar. 
MATERIALES
Laminas porta objetos
Guantes 
Laminillas o cubre objeto 
Lancetas o Inyectadora 
Torundas de algodón , gasas y alcohol 70%
Cubetas porta laminas 
Colorantes /metanol
Agua destilada o chorro
Aceite de inmersion 
PASO A PASO
Colocando una pequeña gota de sangre en un portaobjetos de vidrio 
Un esparcidor ha sido posicionado en un ángulo y lentamente atraído hacia la gota de sangre
El esparcidor se ha puesto en contacto con la gota de sangre, nota la capa de sangre en el borde de la corredera de separación.
PASO 1
PASO 2
PASO 3
PASO A PASO
El esparcidor está más retirado, dejando una fina capa de sangre detrás.
La prueba de sangre esta casi completa
Resultado final. Después de secar durante aproximadamente 10 minutos, el portaobjetos se puede teñir manualmente o automatizado
PASO 4
PASO 6
PASO 5
CAUSAS DE ERROR EN LA TINCIÓN
Frotis muy grueso
Lavado insuficientes 
Tinción muy prolongada
Colorante demasiado alcalino 
OBSERVACIÓN AL MICROSCOPIO
OBJETIVO 12. COAGULACIÓN
Tiempo que tarda la porción líquida de la sangre (plasma) en coagularse”. 
IMPORTANCIA 
TIPOS 
DIAGNOSTICO
HEMORRAGIAS 
QUIRURGICA 
DEFINICIÓN DE COAGULACIÓN
Se denomina coagulación al proceso por el cual la sangre pierde su liquidez, tornándose similar a un gel en primera instancia y luego sólida, sin experimentar un verdadero cambio de estado.
PRUEBAS DE COAGULACIÓN
PT (TIEMPO DE PROTROMBINA)
PTT (TIEMPO PARCIAL DE TROMPLOSPLASTINA
TIEMPO DE TROMBINA 
TIEMPO DE SANGRIA
RETRACCION DE COAGULO
PT (TIEMPO DE PROTROMBINA)
PT 
 (TIEMPO DE 	PROTROMBINA)
VIA EXTRINSICA
Anticoagulantes orales
Tromboplastina 
Ca+ 
Se utiliza para determinar la dosis correcta de la warfarina clase de medicamentos contra la coagulación (por ejemplo, Coumadin), por la presencia de enfermedad del hígado o daños, y para evaluar el estado de la vitamina K. 
Valor normal: de 11 a 13.5 segundos
20
PTT (TIEMPO PARCIAL TROMBOPLASTINA)
VIA INTRINSICA
PTT (TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA 
FACTOR PLAQUETARIO 3 
Déficit VIII/IX
Ca+ 
Se prescribe normalmente en pacientes con sangrado inexplicable o la coagulación.
Pre-operatorios.
Valor normal: +/- 6 seg.
TT (TIEMPO DE TROMBINA)
TT (TIEMPO DE TROMBINA) 
FASE FINAL 
Trombina IIA 
FIBRINOGENO 
FIBRINA 
PROCEDIMIENTO
Se limpia la zona de la punción del lóbulo de la oreja, con una torunda de algodón empapada de alcohol isopropilico al 70%, dejar que se evapore el alcohol.
Colocar un portaobjetos detrás del lóbulo de la oreja. Se punciona cerca de su borde inferior rápidamente con una lanceta para hacer una herida de 1 a 2 mm de profundidad. Simultáneamente, se pone en marcha el cronómetro
Retirar el portaobjetos. No debe ejercerse presión sobre la oreja para iniciar el sangrado. 
Se debe dejar salir libremente la sangre y se adsorbe sobre papel filtro.
La sangre se recoge cada 30 segundos con el papel filtro hasta que se ha detenido el sangrado. 
El valor normal es entre 2 y 5 minutos. 
 
METODO DE DUKE O TIEMPO DE SANGRIA
RECUENTO DE PLAQUETAS 
Manual
Automatizado
Azul cresil
Oxalato de Amonio 
Es un examen para medir la cantidad de plaquetas que uno tiene en la sangre. Las plaquetas ayudan a la coagulación de la sangre y son más pequeñas que los glóbulos blancos y los glóbulos rojos.
VR: 140.000 – 400.000 Plaq/mm3
ERRORES EN COAGULACIÓN
El tubo debe llenarse bien; si no es así, el tiempo de protrombina se prolonga falsamente.
Los tubos deben ser de PLÁSTICO para evitar activación plaquetaria. 
El estasis venoso por un torniquete prolongado aumenta el calcio en la muestra.
Se debe cuidar de homogenizar completamente la muestra con el anticoagulante a fin de evitar la formación de pequeños coágulos que dañarían la calidad de la muestra. 
Es recomendable tomar estas muestras 
 con ayuno de 8 horas.
El plasma se debe mantener de 4-10°C en tubos tapados y llevar a cabo las pruebas dentro de las primeras 4 horas.
GRACIAS