Práctica 1 microbiologia clinica

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Práctica 1.- Exudado Faringeo 
Asignatura: MICROBIOLOGIA CLINICA 
Periodo 2023 
Docente: Edlin Mariel Ramos González 
Integrantes: Cesia Carolina Castillo Izaguirre 
Fecha de entrega: 12/03/2023 
RESUMEN 
Un exudado faríngeo es una prueba diagnóstica que se obtiene a partir de células de la faringe 
y es de utilidad para detectar microorganismos que pueden causar una infección, posterior a 
la toma de muestra se siembra en medios de cultivos con grandes fuentes de vitaminas, 
carbono y nitrógeno para estimular el crecimiento de los microorganismos, para poder 
brindar un tratamiento adecuado al paciente acorde con el material orgánico que se presenta. 
Durante la práctica se tomó una muestra por medio del exudado faríngeo y otra muestra por 
el exudado nasofaríngeo las cuales fueron estriadas en un medio agar sal y manitol, un medio 
agar sangre y un medio dextrosa sabouraud. 
PALABRAS CLAVE: exudado faríngeo, agar sangre, agar sal y manitol, 
staphylococcus, 
INTRODUCCION 
 Un cultivo del exudado faríngeo es una 
prueba para detectar microorganismos que 
pueden causar una infección. Se añade una 
muestra de células de la faringe a una 
sustancia que estimula la multiplicación de 
los microorganismos. Si no hay una 
multiplicación de microorganismos, el 
cultivo es negativo. Si hay una 
multiplicación de microorganismos que 
pueden causar una infección, el cultivo es 
positivo. El tipo de microorganismo puede 
identificarse con un microscopio o pruebas 
químicas. A veces, se hacen otras pruebas 
para determinar cuál es el medicamento 
adecuado para tratar la infección. (North 
Shore, 2019) 
Algunos ejemplos de microorganismos 
causantes de infecciones que pueden 
encontrarse durante un cultivo del exudado 
faríngeo incluyen: 
 Candida albicans. - Este hongo 
causa aftas, una infección de la 
boca y la lengua y, a veces, de la 
garganta. 
 Estreptococo del Grupo A.- Esta 
bacteria puede causar faringitis 
estreptocócica, escarlatina y fiebre 
reumática. 
 Neisseria meningitidis. - Esta 
bacteria puede causar meningitis. 
(Struthers, 2018) 
PRUEBAS DE DETECCION 
Catalasa. – la catalasa es la enzima 
presente en la mayoría de los 
microorganismos que poseen citocromos 
estas bacterias que sintetizan la catalasa 
hidrolizan el agua oxigenada que se libera 
en burbujas, el objetivo de esta prueba es 
separar Micrococacceae (positiva) de 
Streptococcus spp. y Enterococcus spp. 
(negativa). 
Cuando la prueba es positiva se observan 
burbujas tras agregar al cultivo la reacción. 
(UNAM, 2017) 
Oxidasa. -Esta prueba sirve para 
determinar la presencia de enzimas 
oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe 
a la presencia de un sistema 
citocromooxidasa que activa la oxidación 
del citocromo el cual es reducido por el 
oxígeno molecular produciendo agua o 
peróxido de hidrógeno según la especie 
bacteriana. 
Por lo general, el sistema 
citocromooxidasa solo se encuentra en las 
bacterias aerobias, algunas anaerobias 
facultativas y, excepcionalmente, en algún 
microaerófilo (Vibrio fetus), pero las 
bacterias anaerobias estrictas carecen de 
actividad oxidasa. 
En esta prueba, se reporta como resultado 
positivo la aparición de un color azul-
violeta en la muestra, tras añadir el 
reactivo al cultivo. Con esta prueba se 
pueden identificar especies de Neisseria 
(positiva) y Pseudomonas de los miembros 
oxidasa (negativo) de las Enterobacterias. 
(UNAM, 2017) 
MEDIOS DE CULIVOS 
Agar sangre 
es un medio de cultivo utilizado paras el 
aislamiento de numerosos 
microorganismos, este permite el 
crecimiento de microorganismos 
nutricionalmente exigentes y con una 
visualización clara de una reacción de 
hemolisis. 
En un medio de cultivo de agara sangre se 
pueden observar distintos tipos de 
hemolisis: 
Hemólisis alfa: Lisis parcial de los 
glóbulos rojos. Se observa un halo de color 
verdoso alrededor de la colonia en estudio. 
Es debido a la oxidación de la 
hemoglobina a metahemoglobina 
(compuesto de color verdoso) por el 
peróxido de hidrógeno generado por los 
microorganismos. 
Hemólisis beta: Lisis total de los glóbulos 
rojos. Se observa un halo claro, brillante 
alrededor de la colonia en estudio. 
Hemólisis gamma: Ausencia de lisis de 
los glóbulos rojos. El medio de cultivo no 
presenta modificaciones de color y aspecto 
alrededor de la colonia en estudio. 
(Barraza, 2018) 
Agar Sal y Manitol 
En el medio de cultivo, el extracto de 
carne, la peptona de carne y la tripteína, 
constituyen la fuente de carbono, 
nitrógeno, vitaminas y minerales que 
promueven el desarrollo microbiano. El 
manitol es un hidrato de carbono 
fermentable. El cloruro de sodio (que se 
encuentra en alta concentración) es el 
agente selectivo que inhibe el desarrollo de 
la flora acompañante, el rojo fenol es el 
indicador de pH y el agar es el agente 
solidificante. (Rossi, 2012) 
Las bacterias que crecen en un medio con 
alta concentración de sal y fermentan el 
manitol, producen ácidos, con lo que se 
modifica el pH del medio y vira el 
indicador de pH del color rojo al amarillo. 
Los estafilococos crecen en altas 
concentraciones de sal, y pueden o no 
fermentar el manitol. (Rossi, 2012) 
Los estafilococos coagulasa positiva 
fermentan el manitol y se visualizan como 
colonias amarillas rodeadas de una zona 
del mismo color. Los estafilococos que no 
fermentan el manitol, se visualizan como 
colonias rojas, rodeadas de una zona del 
mismo color o púrpura. (Rossi, 2012) 
TINCION DE GRAM 
La tinción de Gram es una prueba que 
detecta bacterias en el lugar donde se 
sospecha una infección, como la garganta, 
los pulmones, los genitales o las lesiones 
en la piel. 
Hay dos categorías principales de 
infecciones bacterianas, grampositivas y 
gram negativas. Las categorías se 
diagnostican según cómo reacciona la 
bacteria a la tinción de Gram. 
La tinción de Gram es de color púrpura. 
Cuando la tinción se combina con la 
bacteria en una muestra, las bacterias 
pueden seguir de color púrpura o volverse 
rosadas o rojas. Si se mantienen púrpuras, 
son Gram positivas. Si se vuelven rosadas 
o rojas, son Gram negativas. (Nuñez, 
2020) 
ANTIBIOGRAMA 
Las pruebas de sensibilidad o 
antibiogramas determinan la 
susceptibilidad de un microorganismo 
frente a los medicamentos 
antimicrobianos, a partir de la exposición 
de una concentración estandarizada del 
germen a estos fármacos. Las pruebas de 
sensibilidad pueden hacerse para bacterias, 
hongos o virus. Para algunos 
microorganismos, los resultados obtenidos 
con un fármaco permiten predecir los 
resultados que se obtendrán con fármacos 
similares. Así, no todos los medicamentos 
potencialmente útiles necesitan probarse. 
Las pruebas de sensibilidad se realizan in 
vitro, y no tienen en cuenta numerosos 
factores que afectan al fármaco in vivo (p. 
ej., la farmacodinámica y la 
farmacocinética, las concentraciones del 
medicamento en el sitio de acción, el 
estado inmunitario del huésped, las 
defensas específicas de sitio) y que 
influyen en el éxito de un tratamiento. Por 
ello, las pruebas de sensibilidad no 
siempre predicen los resultados de la 
terapia. 
OBJETIVOS 
 Conocer el método para una buena 
toma de muestra de un exudado 
faríngeo y nasofaríngeo 
 Identificar qué tipos de 
microorganismos pueden crecer en 
este tipo de muestras (nasofaríngeo 
y faríngeo) 
 Observar si hay crecimiento de 
bacterias en nuestros medios 
(sangre, sal y manitol y dextrosa 
sabouraud) 
METODOLOGIA 
MATERIALES 
 Cajas Petri 
 Abate lenguas 
 Hisopos estériles 
 Asa bacteriológica 
 Mechero bunsen 
 Papel estraza 
 Equipo de tinción de Gram 
 Peroxido de hidrogeno al 3% 
 Reactivo para prueba de 
oxidasa 
EQUIPO 
 Incubadora 
 Microscopio 
SUSTANCIAS 
 500 ml Solución Salina 
Fisiológica (0.85% 
NaCl) 
 Agua destilada 200 ml Agar sal y 
manitol 
 200 ml Agar nutritivo 
 200 ml Agar Eosina 
Azul de metileno 
 200 ml de Agar sangre 
 50 ml de Caldo 
nutritivo 
EQUIPO DE PROTECCION 
´PERSONAL 
 Mascarilla 
 Lentes de seguridad 
 Guantes 
 Bata 
 
 
TOMA DE MUESTRA 
1. Colocar al paciente por debajo del 
nivel de la vista. 
2. Pedir que incline un poco la cabeza 
hacia atrás y abra la boca y que diga 
“ah” (si no se logra ver la laringe con 
ayuda de un abate lengua bajar la 
lengua.) 
3. Hacer un raspado con 2 hisopos 
estéril a un lado de la úvula (hacer el 
rapado en la parte más roja o donde 
presente puntos blancos. 
4. Con uno de los hisopos, realizar un 
frotis y proceder a teñirlo con la 
técnica de Gram. · 
SIEMBRA. 
1.Con el otro hisopo, realizar la 
descarga del inóculo en un extremo del 
agar sangre. En el agar sangre, realice 
dos picaduras, una en la última y una 
penúltima estría; con la finalidad de 
observar la hemolisis bajo la superficie 
del agar. colocar en una jarracon una 
vela encendida (atmosfera de 
anaerobiosis) por 24hrs 
2. Y en los diferentes medios de 
cultivo, con ayuda de un asa 
bacteriológica, realizar la distribución 
del inóculo empleando la técnica de 
estría cruzada. 
3. Incubar a 37ºC durante 24 h. 
4.. Con el otro hisopo, hacer un frotis y 
realizar tinción de Gram y tinción 
negativa. 
6.. Observar las morfologías que se 
desarrollan en los diferentes medios de 
cultivos y realizar Gram a las colonias 
sospechosas. 
7.. Realizar pruebas de catalasa y 
coagulasa. 
TINCION DE GRAM 
1.- Se hace un frotis delgado del 
material a estudiar y se deja secar al 
aire. 
2. – Se fija la preparación pasándola un 
par de veces a través de la flama del 
mechero. De esta forma se evita que 
sea lavada durante la tinción. 
3.- Cubrir la superficie del frotis con 
solución de cristal violeta por un lapso 
de un minuto. 
4.- Enjuagar con agua destilada. 
5.- Cubrir la superficie del frotis con la 
solución de yodo de Gram, dejando 
que esta actué por un lapso de un 
minuto. 
6.- Enjuagar con agua destilada. 
7.- Cubrir la superficie del frotis con la 
solución de alcohol- cetona por un 
lapso de 30 segundos. 43 
 8.- Enjuagar con agua destilada. 
9.- Cubrir el frotis con la solución de 
safranina por 15 segundos. 
10.- Enjuagar con agua destilada. 
11.- Secar al aire. 
12.- Observar al microscopio a 40x y 
100x. 
PRUEBA DE COAGULASA 
1. La prueba de la coagulase se 
efectúa al tomar una asada de la 
muestra 
2. inocular por suspensión en el tubo 
de plasma citratado, incubar a 
37°C durante 4, 8 y 24 hrs., 
3. observar la formación de coágulo. 
Si en este tiempo no se ha 
formado reportar la prueba corno 
negativa. 
 
PRUEBA DE CATALASA 
1. Para efectuar la prueba de la 
catalasa, tomar una asada de la 
muestra 
2. suspender en una gota de agua 
sobre una porta objetos 
3. adicionarle una o dos gotas de 
peróxido de hidrógeno y esperar la 
formación inmediata de burbujas, 
de ser así reportar la prueba como 
positiva. 
 
RESULTADOS 
Durante esta practica se logaron 
completar exitosamente diversos 
objetivos para una elaboracion de un 
exudado faringeo 
 
Imagen 1.toma de muestra 
se tomo una muestra de las amigdalas del paciente 
 
Imagen 2.siembra de muestra 
se sembro la muestra del exudado en los diferentes tipos 
de agares siendo el agar sangre estriado en dos 
cuadrantes,el dextrosa s.estrado por angulo recto y el agar 
sal y manitol estriado por angulo recto 
 
 
Imagen 3. elaboracion de tincion de Gram 
 
Imagen 4. Crecimiento de colonias en los agares 
 
Imagen 5. agar sangre 1 
la primera colonia es beta hemolítica, con forma 
circular, borde entero, con elevación plana y con 
superficie brillante de color gris. 
la segunda colonia es irregular sin presencia de 
hemolisis con bordes ondulados, elevación elevada y 
superficie rugosa color amarillo. 
 la tercera colonia presenta forma circular de borde 
entero sin presencia de hemolisis, color blanco, con 
elevación plana y con superficie cremosa. 
 
 
Imagen 6. agar sangre 2 
se presenta con colonias con forma puntiforme beta 
hemolítica, con borde ondulado, de elevación plana y 
superficie cremosa 
la colonia grande que se presenta en el agar se 
presenta de color blanco con forma circular de borde 
ondulado, con gamma hemolisis, elevación plana y 
superficie lisa. 
 
 
Imagen 7. agar sal y manitol 
El agar sal y manitol se divido en muestra de exudado 
faríngeo y nasofaríngeo 
En la muestra del exudado faríngeo se observaron 
colonias circulares, con borde entero, elevación 
convexa, superficie cremosa, presencia de 
fermentación de manitol debido al color amarillento 
del medio. 
 En cambio, en la muestra con el exudado nasofaríngeo se pudo 
observar la presencia de colonias puntiforme, con bordes 
enteros y ondulados, elevación plana, superficie lisa y mate, sin 
presencia de fermentación de lactosa 
 
Imagen 8, agar dextrosa s, 
sin crecimiento bacteriano 
 
Imagen 9. observación en microscopio 100x para resultado de 
tinción de Gram agar sal y manitol 
 
imagen 10. observación en microscopio 40x para resultado de 
tinción de Gram, agar sangre 2, colonia 2. 
 
imagen 11. observación en microscopio 100x de tinción de 
Gram, agar sangre 1 
 
imagen 12. observación en microscopio 40x de tinción de Gram, 
agar sangre 2, colonia 1 
 
Imagen 13. Antibiograma 
 
Imagen 14. Prueba de catalasa 
 
ANALISIS DE RESULTADOS 
Tras llevar la acabo la tinción de Gram 
con muestras recogidas de los cultivos 
de exudados faríngeos se pudo 
observar en el agara sal y manitol 
(imagen 9) la presencia de 
estafilococos y diplococos Gram 
positivos. 
En la tinción de Gram del agar sangre 
1 (imagen 10) se pudo observar la 
presencia de estafilococos, 
estreptococos y diplococos Gram 
positivos 
 De igual forma en la tinción de Gram 
del agar sangre 2 en la colonia 1 
(imagen 12) se observó la presencia de 
estafilococos, estreptococos, sarcina, 
tétradas y diplococos Gram positivo 
En cambio, en la colonia 2 (imagen 
11) se pudo observar la presencia se 
observó la presencia de estreptococos 
Gram positivos 
CONCLUSION 
Con los resultados obtenidos se llegó a 
la conclusión que el paciente presenta 
principalmente estreptococos y 
estafilococos aureus, sin embargo, este 
último no tiene repercusiones en el 
paciente ya que estas bacterias son 
habituales en la boca. 
Si el paciente hubiera presentado una 
infección se le suministrarían 
antibióticos como la Tetraciclinas, 
Trimetoxibenzilpirimidina y 
Ciprofloxacino puesto que en el 
antibiograma presento susceptibilidad. 
También podemos concluir que el 
exudado faríngeo es unos de los 
métodos más factible a la hora de 
examinar una infección en el tracto 
respiratorio, puesto a la facilidad de la 
toma de muestra y siembra de esta. 
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https://www.britanialab.com/back/publ%20ic/upload/productos/upl_6070906bed8%209d.pdf
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