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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONÓMA DE NICARAGUA (UNAN-Managua) Facultad de Bilogía e Ingenierías Departamento de Biología /Laboratorio de Biotecnología Titulo: Potencial de Fitorremediación de Paspalum conjugatum P.J. Bergius y consorcios microbianos, en sedimentos contaminados por la minería artesanal en el botadero La Estrella, del municipio de Santo Domingo, Chontales. Autor: Berman José Herrera Gutiérrez Tutor: Dra. Katia Montenegro Co- Asesores: Lic. Juan Carlos Ruíz; Ing. Ena Rivers. Managua, Junio 2014 Los metales pesados, están entre los tipos de contaminantes del ambiente más importante de investigación, por sus efectos nocivos a la salud humana y la cadena trófica. Varios métodos, de remediación han sido usados para limpiar el ambiente de estas clases de contaminantes, pero la mayor parte de ellos son gravosos y difíciles de implementar para obtener resultados óptimos. resulta necesario utilizar técnicas o medidas de descontaminación y recuperación de suelos por metales pesados producto de las actividades mineras, para disminuir el riesgo de contaminación del agua, suelo, biota y proteger la salud pública. Debido a las experiencias que se han tenido a nivel latinoamericano se ha recomendado tomar en cuenta el potencial de la flora nativa que convive en condiciones ambientales extremas . La investigación plantea, el uso de P. conjugatum P.J. Bergius, como una especie alternativa y con potencial de fitorremediación al problema de la contaminación por residuos mineros. Justificación OBJETIVOS General Evaluar el potencial de fitorremediación de Paspalum conjugatum P.J. Bergius y consorcios microbianos asociados, en sedimentos contaminados por la minería artesanal en el botadero La Estrella de la rivera del Rio Sucio, del municipio de Santo Domingo, Chontales. Específicos Determinar la influencia de la actividad de micorrizas autóctonas procedentes del área de estudio en el crecimiento y acumulación de metales pesados en las planta P. conjugatum P.J. Bergius. Evaluar la interacción de los microorganismos autóctonos de la rizósfera y la grama P. conjugatum P.J. Bergius en la movilización de metales pesados. Determinar la interacción de la asociación de los hongos micorriziticos con la gramínea P. conjugatum P.J. Bergius y microorganismos autóctonos de la rizósfera, en la remoción de contaminantes. Marco teórico Actividad minera en la zona Central de Nicaragua En la actualidad la actividad minera en Nicaragua se encuentra orientada. Principalmente a la minería metálica (oro y plata), no metálica (arena, piedra pómez, cantera). La exploración y explotación de material aurífero, es desarrollada por empresas extranjeras que ejecutan sus operaciones de Pequeña y mediana escala en los municipios de Bonanza, La Libertad, Larreynaga, Santo Domingo, entre otros. Por otro lado, se da la extracción rústica de minería artesanal, siendo ejecutada por cooperativas o simplemente familias, que se ubican en paralelo a las localidades de la extracción industrial, las cuales realizan esta actividad sin las medidas de seguridad respectivas, además de contar con poco o nulo financiamiento y capacitación técnica. Mecanismo de extracción del oro a escala artesanal. En el municipio se generan una serie de contaminantes producto de las labores mineras, además de las sustancias que se utilizan para el proceso. Estos contaminantes agilizan la disolución de metales que van a parar junto con los demás desechos a los cauces de los ríos entre ellos el rio Sucio directamente en el caso de Santo Domingo. Por ello, en diversos estudios se ha encontrado altas concentraciones de metales pesados en diversos puntos del área. Alternativas de remediación de sitios contaminados por metales pesados Entre las técnicas fisicoquímicas se puede mencionar la técnica de “lavado ex-situ”, flushing (enrojecimiento,técnica in situ), adición de enmiendas o químicos. Entre las técnicas biológicas empleadas en las últimas décadas están la fitorremediación (phyton– planta y remedium-que hace alusión al medio que se toma para reparar un daño o inconveniente), que aprovecha los medios de especies vegetales que han desarrollado mecanismos fisiológicos- bioquimicos para minimizar los efectos de metales pesados, controlando su absorción, acumulación y translocación en el tejido vegetal y la biolixiviación; técnica que busca solubilizar de manera ex-situ, los metales pesados mediante el uso de microorganismos tanto hongos como bacterias. Biolixiviación La biolixiviación está basada en la capacidad de los microorganismos para transformar compuestos sólidos en elementos solubles y extractables. Fitorremediación. En las técnicas de fitorremediación, las plantas actúan como trampas o filtros biológicos que descomponen los contaminantes y estabilizan las sustancias metálicas presentes en el suelo y agua al fijarlos en sus raíces y tallos, o metabolizándolos tal como lo hacen los microorganismos para finalmente convertirlos en compuestos menos peligrosos y más estables, como dióxido de carbono, agua y sales minerales. En la fitorremediación se identifican varios tipos de procesos de remediación que varían según las partes de la planta que participan o los microorganismos que contribuyen con la degradación de los contaminantes. Las técnicas de fitorremediación de metales pesados más estudiadas incluyen la Fitoestabilización Es el uso de plantas para reducir la movilidad y la disponibilidad de los contaminantes en el medio ambiente Fitoextracción pesados del suelo y acumularlos en su parte aérea (Chaney et al., 1995). También es conocida como fitoacumulación. El trabajo se esta llevando a cabo en dos etapas. Etapa de campo: se realizaron dos muestreos, el primero fue de reconocimiento de campo, identificación de Plántulas de Paspalum conjugatum P.J.Bergius, Toma de muestra de sedimento en tres puntos escogidos al azar en el botadero la “estrella”; en estos puntos se cavaron tres agujeros de 80 cm de profundidad cada uno. Después se concentro en un solo punto donde se homogenizo y luego fue depositado en tres cajas plásticas. Etapa de laboratorio. En esta etapa se procedió a secar el sedimento en campo abierto, para luego ser pasteurizado en horno eléctrico en bandejas de aluminio a ya que cuando fue recolectado estaba muy húmedo. El proceso de pasteurizado fue en base al método, Katarcina, 1 hora diario, a 90°c durante tres días consecutivos. Montaje de plántulas de Paspalum c.P.J.Bergius Preparación de plántulas Micorrizas autóctonas 2g de micorrizas para tratamientos (T4,T6) Aplicación de micorrizas Preparación de inóculos de micorrizas para tratamientos Preparación de inóculos de hongos autóctonos Fusarium ssp Aspergilus ssp Penicilium ssp Cruvularia ssp Tratamiento 1 Tratamiento 2 Tratamiento 3 Tratamiento 4 Tratamiento 5 Tratamiento 6 Tratamiento 7 Proceso de establecimiento y desarrollo de plántulas Parámetros a monitorear y actividades a realizar durante los experimentos de Fito-lixiviación Pesar diario la maceta con la planta para determinar que cantidad de agua agregarle para mantenerla alrededor del 90-95% de la capacidad máxima WHC Medir intensidad de luz y la temperatura del aire en tres puntos de la mesa 4 veces al dia( 8am- 11am-2pm-4pm) Rotar de lugar las maceteras para homogenizar y así asegurar de que tengan las mismas condiciones de luz Tomar muestras de lixiviado cada mes ½ Monitoreo y desempeño de las plantas cada mespara valorar parámetros : Tratamientos sobrevivencia Numero de entrenudos Numero de hojas Numero de estolones Tamaño de plántulas (cm) Inflorescencia Necrosis T1/1 T1/2 . . T7/5
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