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Bacilos Gram negativos pequeños (0,3 - 0,5 x 0,6 - 1,4 m). Producen formas celulares variables (pleomorfismo). Aerobios o anaerobios facultativos, pero requieren CO2 para aislamiento primario (in vitro). Crecimiento exigente. Crecimiento lento (2 a 3 días). Fermentadores de carbohidratos, sin producción de gas, (en aprox. 24 horas). No móviles. No esporulados. No son ácido-alcohol resistentes. La mayoría de las especies producen Ureasa y crecen en Agar MacConkey. Respuesta variable a las pruebas de oxidasa y catalasa. CARACTERÍSTICAS GENERALES : TAXONOMIA: FILO: Proteobacteria. CLASE: Gammaproteobacteria. ORDEN: Pasteurellales. FAMILIA: Pasteurellaceae. El Bergey´s Manual of Systematic Bacteriology reconoce las siguientes especies Actinobacillus pleuropneumoniae Pleuroneumonía fibrinosa aguda y pleuritis, abscesos y secuestro pulmonar crónico. Actinobacillus lignieresii Actinobacilosis bovina (lengua de madera o Glositis), lesiones piogranulomatosas y abscesos en ovinos (cuello y cabeza), abscesos granulomatosos en cerdos (glándula mamaria). Actinobacillus equuli En equinos, enfermedad del sueño, septicemia en recién nacidos, onfaloflevitis, nefritis multifocal supurativa, neumonía, artritis, abortos. Actinobacillus suis Septicemia en cerdos < de 3 meses, neumonía, artritis y pericarditis en cerdos adultos. HABITAT: Comensales de las membranas mucosas, boca y TR superior de sus hospederos (animales domésticos). Algunas están en membranas del tracto digestivo y genitales de animales domésticos. Distribución mundial con excepción de Actinobacillus seminis. Enfermedad de naturaleza esporádica y se consideran patógenos oportunistas. Principalmente patógenos de animales domésticos (animales de granja). No pueden sobrevivir grandes periodos de tiempo en ambiente. Animales portadores desempeñan papel importante en transmision. CARACTERISTICAS ANTIGENICAS: Estructura muy compleja. Se han descrito: Ag termoestables: Somáticos y capsulares. Ag termolábiles: Superficie. Esto permite su división en tipos antigénicos. También las toxinas inducen la síntesis de anticuerpos protectores. El serotipado de aislamientos de A. pleuropneumoniae está basado en diferencias de Ag polisacáridos capsulares (Pruebas de aglutinación o en Gel difusión). Existen 2 biotipos: ★ NAD dependiente: Con 12 serotipos y 2 subtipos. ★ NAD independiente: 2 o 3 serotipos, basado en las caracteristicas antigenicas de la cápsula. Actinobacillus lignieresii Distribución mundial. Produce una lesión caracterizada por abscesos granulomatosos en la cabeza y sus alrededores. Hay formación de nódulos firmes con descarga de pus de blanco a gris y la aparición de pequeños gránulos blanco grisáceos que suelen ser similares a los de las drusa actinomicotica. La lesión envuelve a la lengua y pulmones. Se cree que es un problema donde esta muy involucrado el sistema inmune. No se conoce con exactitud los elementos que intervienen. A. pleuropneumoniae Se transmite por contacto directo o indirecto, infectando la via respiratoria, mas comúnmente por inhalación. Alta morbilidad y alta mortalidad en grupos susceptibles. La pleuroneumonia aguda es fibrinosa y severa. La forma crónica inutiliza amplias zonas de los pulmones y afecta a la pleura. Las lesiónes envuelven una reaccion Ag-Ac donde se ven afectado los vasos sanguineos. Dentro de los factores asociados se encuentran la capsula antifagocitica, el LPS que tiene propiedades de adherencia hacia epitelio respiratorio porcino. Actinobacillus suis Distribución mundial. Se localiza en las tonsilas y mucosas del TRS y TG. Cerdas y lechones infectados por aerosoles, por abrasiones en piel. Su ruta de infección es por via respiratoria o digestiva y por via umbilical. Afecta principalmente cerdos jóvenes de menos de 3 meses de edad. Bacteriemia o septicemia se desarrolla en las fases iniciales, sobre todo en cerdos Jovenes, muerte rápida. Produce una serie de cuadros clínicos: fiebre, afección respiratoria, neumonía intersticial, pleuritis, meningoencefalitis, miocarditis. Produce una citotoxina con actividad de formación de poros. MORFOLOGÍA CELULAR: Bacilos pequeños Gram negativos de forma cocobacilar hasta filamentos. Algunos se presentan como slime: A. lignieresii, A. suis y A. equuli Capsulado: A. pleuropneumoniae. En extendido se observan aisladas o pares, raramente en cadenas. Tinción de tinta china se observa una fina capa de moco alrededor de la bacteria. Muestras Pus de los abscesos , exudados de las lesiones, orina (nefritis), biopsias de tejido y biopsias de material granulomatoso fresco y con formalina al 10% para estudio histopatológico. Observación Microscópica: Lavar pus y exudado con agua destilada. Revelar gránulos blanco grisáceos. Gránulos sobre un portaobjeto con una gota de KOH al 10%- colocar cubreobjeto. Los grupos de colonias se pueden observar con objetivo de menor aumento. Se ven los bacilos cocoides Gram - en forma de rosetas. Coloraciones de secciones histopatológicas. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Aislamiento: La mayoría se cultiva en Agar sangre (no hemolíticos) y Agar MacConkey (fermentan los carbohidratos). A. pleuropneumoniae se beneficia del Factor V - Nicotinamida adenina dinucleótido (NAD). Agar chocolate o Agar sangre sembrado con Staphylococcus aureus (Satelitismo). Condiciones de 5-10% de CO2 favorecen su crecimiento. Incubación a 37 ºC por 24 a 72 horas. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO IDENTIFICACIÓN: Apariencia de las colonias: A. lignieresii Colonias pequeñas y relucientes se desarrollan en 24 horas. Ligeramente pegajosas (viscosas) en aislamientos primarios perdiendo esta características en subcultivos. Colonias no hemolíticas de 2 mm de diámetro en 48 horas. Crece bien en agar MacConkey: colonias primero pálidas y después tornan rosadas (Fermentador tardío de la lactosa). A. equuli Alguna cepas son hemolíticas Las colonias son pegajosas manteniendo esta características en subcultivos Fermentador de la lactosa en Agar MacConkey A. suis: Todas las cepas son Hemolíticas con colonias similares a A. lignieresii, pero más pegajosas Crece bien en agar MacConkey A. pleuropneumoniae: Colonias pequeñas color gris blanquecino (1 mm) bordeadas por un halo de beta hemólisis parecida a la de los estreptococos hemolíticos Dos tipos de colonias – Cerosa – Suave y reluciente NO crece en Agar MacConkey. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO – A . li g n ie re s s i – A . e q u u li – A . s u is – A . p le u ro p n e u m o n ia e – A . c a p s u la tu s – A . a c ti n o m y c e te m c o m it a n s – A . u re a e – A . s e m n is Hemólisis Agar sangre oveja - v + + - - +() - CAMP (Staphylococcus aureus) - - - + - - - - Crecimiento en agar MacConkey + + + - + - - - Catalasa v+ v- + v+ + + + - Oxidasa + v v v + + + - Hidrólisis de esculina - - + - (+) - - - Ureasa + + + + + + + - Producción de ácido Arabinosa (+) - + - + - - (+) Lactosa (+) + +- + - - - Maltosa + + + + + + + - Manitol + + -* - + v + - Melibiosa - + + - + - - - Sucrosa + + + + + - + - Trehalosa - + + - + - - - Características diferenciales de los Actinobacillus A. lignieresii Colonias No- Hemolíticas en aislamiento primario Agar Sangre El Test CAMP con A. Pleuropneumoniae contra Staphylococcus aureus (trazo horizontal) mostrando un aumento del efecto hemolítico de la Beta- hemolisina estafilocócica
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