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TECNICAS HISTOLOGICAS Pasos necesarios para la preparación de los tejidos observados en la microscopia óptica Preparación de los tejidos: Obtención de la muestra Fijación Deshidratación Aclaramiento Inclusión Corte Tinción de los colores Montaje Obtención de la muestra: Necropsia Biopsias Piezas operadas Fijación: Químico Congelación Mantener la morfología parecida a la estructura viva Físico Formaldehido Glutaraldehída Deshidratación: Aclaramiento: En tejido se torna transparente o claro en xilol o xileno Inclusión: Rellenar o infiltrar completamente la muestra histológica Corte: En secciones delgadas para permitir el paso de luz Tinción: Se elimina la parafina en un solvente orgánico, la muestra se rehidrata. Montaje: Tipos de colorantes: Básicos Ácidos Neutros Metacromáticos Indiferente Colorante más usado: Hematoxilina-Eosina(HE) Bicrómica Hematoxilina Eosina Básico Ácido Núcleo (ácido) Citoplasma (básico) Basófilo Acidófilo Básico Ácido Basófilo Acidófilo Hematoxilina Eosina H-E Como vemos en el microscopio? Tinciones especiales: PAS: Glucógeno y carbohidratos Tinción argéntica (cajal): Fibras reticulares Coloración de Wright y Giemsa Sangre Orceína: Fibras elasticas Artificios (artefactos): Alteración que aparece en la lámina durante la preparación. Objetos ajenos al tejido que aparecen en el corte histológico Problemas que pueden presentar las laminas (Artefactos): Manchas negras Dobleces Espacios acordeón RESUMIENDO A ver si aprendimos algo. Rellenar o infiltrar con parafina fundida. Inclusión Cuando hablamos de necropsia, biopsia o piezas operadas nos referimos a: Obtención de la muestra Para mantener la morfología del tejido lo mas parecido posible a lo que esta antes de hacer la extracción Fijación Eliminación del agua en concentraciones crescientes de alcohol. Deshidratación El tejido se torna transparente o claro en xilol o xileno. Aclaramiento El mas utilizado es H-E. Tinción Secciones delgadas para permitir el paso de la luz Corte El núcleo presenta: El citoplasma presenta: Hematoxilina tiñe de color: Eosina tiñe de color: Alteración que aparece en la lámina durante la preparación: Basofilia Acidofilia Violeta Rosado Artefacto El Microscopio 35 El Microscopio es el instrumento mas importante en la histología, debido al pequeño tamaño de las estructuras analizadas. Debemos conocer bien sus partes y el manejo correcto para evitar accidentes durante su manejo. En nuestras clases prácticas utilizaremos el Microscopio Óptico, pero existen otros tipos con mayor poder de resolución. 36 38 MEV MET Esto es todo por hoy… Muchas Gracias!!
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