les se pueden utilizar para comple- pruebas mentación de mutantes que afectan el mismo rasgo. Ejemplo 12.19. Una cepa Hfr de E. colt U no puede fermentar la lactosa (zj ") y puede transferir la z ', gene a través del sexo-producción de un mutante (ZF) receptor, formando la heierogenote zj / (F-ZF). Si? L y z-i pertenecer a la misma cistrón (allcles funcionales). a continuación, la complementación no producen y sólo se producen fenotipos mutantes. Si zt y z2 mutantes de arco en diferente cistrones. complementación podría producir tipos silvestres capaces de fermentar la lactosa. Complementación Intracistronic Algunas veces puede ser posible cuando el producto enzimático es com- planteado de dos o más cadenas polipeptídicas idénticas. La evidencia experimental ha demostrado que una in vitro mezcla de enzimas inactivas de algunos mutantes que complementan puede "hibridar" para producir una enzima con actividad normal hasta 25%. Mutantes lhat fallan para complementar con algunos, pero no todos los demás mutantes se supone que se solapan en la función. Un mapa de complementación puede ser construido a partir de la resultados experimentales de pruebas de todos los posibles pares de mutantes para la acción complementaria en bacterias merozygotes o en heterocaryons hongos. Un mapa de complementación no puede equipararse en modo alguno con CHAP. 12 | GENÉTICA DE BACTERIAS Y BACTERIOPHAGES 325 un mapa de cruce, ya que el gen se define por diferentes criterios. Un mapa complementación nos dice nada de la estructura o la localización de las mutaciones implicadas. Mapas de complementación se deducen desde merozygotes o heterocaryons; mapas de cruce de los experimentos de recombinación. Ejemplo 12.20- Tres mutantes mapa por complementación de la siguiente manera: Esto indica que los mutantes [y 2 son complementarias y no se solapan en la función. De ahí que 1 y 2 mutaciones arco nonallclic por este criterio. Mutant 3 falla para complementar con cither t o 2 y por lo tanto deben superponerse (hasta cierto punto) tanto con 1 y 2. Por lo tanto 3 es funcionalmente alélica con tanto yo como 2. (/ Asignación por mutantes de deleción. Una deleción en algún segmento de un gen funcional no puede recombinar con mutaciones puntuales en la misma región, aunque dos mutaciones puntuales en diferentes sitios dentro de esta región puede recombinar para producir de tipo salvaje. Otra propiedad distintiva de los mutantes de deleción es su estabilidad, al no poder mutar volver a su forma natural. El uso de deleciones de solapamiento se reducir considerablemente el trabajo en el análisis de estructura fina de un gen. Ejemplo 12.21. La determinación de los límites de una eliminación. Supongamos que un scries de mutantes individuales (1,2, 3. 4) ya ha sido asignada como se muestra a continuación; Una deleción que no recombinc con mutantes puntuales I y 2 pero docs producen de tipo salvaje con 3 y 4 se extiende sobre la región X. Una supresión que produce no rccombinants con 3 y 4 tiene los límites diagramados como Y. Un mutante de deleción que produce tipo salvaje sólo con mutantes puntuales I o 4 tiene los límites de Z. Ejemplo 12.22. Asignación de mutaciones puntuales a la eliminación regiones. Teniendo en cuenta las supresiones RS y T como se muestra arriba, la mutación puntual que rccombincs a dar de tipo salvaje con deleciones S y T. pero no con R, es I. Número 3 es el único de los cuatro mutantes que falla para recombinarse con una de las tres eliminaciones. BACTERIÓFAGOS 1. Características de Todo Los virus. Virus AH difieren de los organismos celulares en los siguientes aspectos: (1) Los virus son no celular. obligar, parásitos intracelulares. (2) Los virus tienen un solo tipo de ácido nucleico (ADN o ARN), mientras que las células tienen ambos tipos. (3) Los virus no tienen un sistema de síntesis de proteínas propias (por ejemplo, no tienen ribosomas); ellos tienen hay un sistema de conversión de energía de su propia (es decir, que no metabolizar los alimentos para generar ATP). (4) Los virus no están contenidas por una membrana lipídica de su propia creación (aunque algunos virus se vuelven 326 GENÉTICA DE BACTERIAS Y BACTERIOPHAGES (Cap. 12 invertido por una envoltura de la membrana host modificado cuando salen de la célula). No tienen interna membranas. (5) Los virus no se ven afectados por los niveles de antibióticos que las células pueden tolerar. (6) Los virus no tienen citoesqueleto o medio de motilily distinta de difusión. (7) Los virus no "crecer" en el sentido clásico del aumento de la masa; es decir, una vez que se forma el virus, no aumenta de tamaño. La completamente virus formado se llama una virión, y se ha protegido su material genético dentro de una cubierta proteica conocida como una cápside. Los subunils individuales de proteínas que forman la cápside se llaman capsómeros. Las células que son susceptibles a la infección viral tener específica receptores en sus superficies a las que cada virus puede adjuntar. Las células sin estos receptores serían refractaria a la infección por virus. 2. Características de los bacteriófagos. Los virus que infectan bacterias se llaman bacteriófagos o simplemente fagos. La forma plural "fagos" se utiliza cuando se hace referencia a diferentes especies (por ejemplo, lambda y T4 son ambos fagos). Cuando se refiere a uno o más viriones de la misma especie, la palabra fago es utilizado; por lo tanto a) célula de las bacterias puede estar infectado por uno o más de fago lambda. Los fagos más estudiados tienen un icosaédrica aproximadamente esférica cápside, o la cabeza (que consta de 20 caras triangulares equiláteros), al que se adjunta una cola. La cola puede ser largo o corto, contráctil o ninguno en contráctil. Otros tipos de phajie tienen cabezas sin cola o filamentosos estructuras. El material genético de la mayoría de los fagos es doble varados en una (dsDNA). aunque algunos sola ADN de hebra (ssDNA), ARN de cadena sencilla (ssRNA), y ARN de doble cadena (dsRNA) son fagos conocido. Formas envueltos son raros. Otras características que son útiles para la clasificación incluyen molecular peso, composición de la base genómica (contenido de G + C), las especificidades antigénicas de la cápside, y la especie (o cepas) de células huéspedes susceptibles (Rango de huéspedes). Restricción Host es la capacidad de un bacteriófago para replicar en sólo ciertas cepas de bacterias. Ejemplo 12.23. Varias especies bacterianas sintetizan una enzima endonuclcase específica de sitio que pueden digerir cualquier ADN extraño que contiene la secuencia nucleotidc específico que constituye el cimiento El sitio de recono- de la enzima. De acuerdo con la restricción y modelo modificación pro- planteado por W. Arber, una bacteria tal también contener una enzima para modificar roethylasc (Por methylatiun) estas mismas secuencias en su propio ADN. así ami protegerla de la digestión por endonucleasa endógena. El ADN extraño de una cepa diferente, no tendría estos sitios de reconocimiento metilado y, por tanto, sería destruido (y por lo tanto restringido de sobrevivir en esa cepa) por endonuclcase del anfitrión. El ácido nucleico de una sola partícula de fago (virión) normalmente infecta una célula bacteriana, repeticiones sí mismo muchas veces, produce proteínas virales para hacer numerosos virus, y rupturas de la célula para liberar varios cientos de fagos de la progenie. Las repeticiones de este proceso de reproducción vegetativa pueden causar una turbia cultivo bacteriano se convierta rápidamente clara debido a la lisis de las células huésped. Los diversos tipos de viral procesos reproductivos se denominan a veces "La vida ciclos ", lo que es un nombre poco apropiado porque los virus No se considera que tienen todas las propiedades atribuidas a las células vivas. Si una solución diluida de fago es chapada en un crecimiento confluente de células bacterianas ("césped") en agar nutriente en un plato de Petri, un área despejada, o "agujero", se desarrollará en torno a cada posición en la que se depositó una partícula de fago. Estos agujeros, que se refiere como placas, contener millones de fagos progenie que han sido liberados de las células lisadas. Al contar el número de placas en una placa, y conociendo la cantidad y la dilución de la suspensión de fago añadió a la placa, se puede estimar el número total de partículas de fago en la cultura original de fagos. 3. Ciclos bacteriófago vida. La mayoría de los fagos (como T4 fago que infect