PRACTICA 2

Vista previa del material en texto

Universidad Veracruzana 
Facultad de Bioanálisis – Xalapa 
 
Bioquímica Básica 
Ricardo Vázquez Ballona 
 
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
 
PRACTICA 2. Indicadores. 
8 de septiembre de 2021 
 
PRACTICA 1. Fragilidad osmótica de los eritrocitos 
Objetivos: 
- Distinguir el uso adecuado de indicadores en función de una solución de titulación, 
que determinará los diferentes pH de vire del indicador, así como su color en 
medio ácido y alcalino. 
 
Generalidades: 
Un indicador de pH es una sustancia que permite medir el pH de un medio. Habitualmente, 
se utilizan como indicador a sustancias químicas que cambian su color al cambiar el pH de 
la disolución. 
El cambio de color se debe a un cambio estructural inducido por la protonación o 
deprotonación de la especie. Los indicadores ácido-base tienen un intervalo de viraje de 
una unidad arriba y otra abajo de pH, en la que cambian la disolución en la que se 
encuentran de un color a otro, o de una disolución incolora, a una coloreada. 
Los más conocidos son el naranja de metilo, que vira en el intervalo de pH 3,1- 4,4, de color 
rojo a naranja, y la fenolftaleína, que varía desde un pH 8 hasta un pH 10, transformando 
disoluciones incoloras en disoluciones con colores rosados/violetas. Además, se pueden 
usar indicadores caseros como la disolución resultante de hervir con agua col lombarda, 
pétalos de rosa roja, raíces de cúrcuma a partir de las cuales se obtiene curcumina, y otros 
(entre los cuales podemos destacar a la col morada y la piel de ciruela, que son usadas por 
algunas culturas indígenas). 
 
Procedimiento: 
1. Verter aproximadamente 50-60 mL de NaOH 0.1 N en un vaso de precipitados 
a partir del “stock. * 
2. Verter aproximadamente 50-60 mL de HCl 0.1 N en un vaso de precipitados a 
partir del “stock” * * nota: los vasos deben ser previamente rotulados para evitar 
confusiones. 
3. Montar el equipo de titulación con HCl como titulante. 
4. Con la pipeta de vidrio colocar 5 mL de NaOH 0.1 N en cada uno de los matraces 
y rotular cada matraz con el indicador respectivo que se le agregará. 
5. Con una pipeta pasteur agregar 3 o 4 gotas de indicador, que se vaya a ocupar 
a cada matraz, observar coloración del indicador en ese medio alcalino. 
6. Titular cada matraz con HCl 0.1 N. 
7. Anotar los mL gastados de HCl 0.1 N al momento del vire y observar el color del 
vire. 
8. Identificar el pH en cada matraz usando una tira reactiva y el potenciómetro. 
9. A cada matraz agregar con una pipeta un exceso de base de 0.5 a 2 mL, o hasta 
observar de nuevo un cambio de coloración en cada matraz. 
10. Anotar resultados en la tabla. 
Titulación: Se adiciona el titulante por goteo, al mismo tiempo que se gira lentamente el 
matraz Erlenmeyer con muestra, sin despegarlo de la base del soporte. Cuando aparece el 
cambio de color se cierra la llave de la bureta y el matraz se sigue girando durante 15 
segundos, si el color de cambio permanece se da por terminada la titulación y se toma la 
lectura en la bureta y se calcula la cantidad de HCl gastada, si el color no permanece, se 
adiciona más HCl a gotas hasta que la coloración permanezca, entonces se da por 
terminada la titulación. 
Para desechar las disoluciones: junta todas las disoluciones en el matraz de vidrio de 500 
o 1000 mL y con el potenciómetro identifica el pH, añade tanta base o ácido 1 M como sea 
necesario hasta obtener una disolución a pH neutro, la cual podrás desechar en tarja. Verter 
ácidos y bases del laboratorio a la tarja irresponsablemente daña el medio ambiente. 
 
Materiales y equipo: 
Material por equipo: 
- 1 soporte universal 
- 1 pinzas para bureta 
- 1 bureta de 25 mL 
- 6 matraces Erlenmeyer de 125 o 
150 mL 
- 2 pipetas graduadas de 5 mL 
- 8 pipetas pasteur con bulbo 
- 1 perilla 
- 2 vasos de precipitados de 150 
mL 
- 1 potenciómetro manual 
- Piseta con agua destilada 
 
 
Material traído por los alumnos por 
grupo: 
- 1 marcador para tubo de vidrio 
- Tijeras 
 
Reactivos y material por grupo: 
- 1000 mL de agua destilada 
- 10 mL Azul de bromotimol con 
gotero 
- 10 mL Fenoftaleina con gotero 
- 10 mL Rojo de fenol con gotero 
- 10 mL Azul de timol con gotero 
- 10 mL Naranja de metilo con 
gotero 
- 10 mL Verde de bromocresol con 
gotero 
- 10 mL Amarillo de metilo con 
gotero 
- 10 mL Amarillo de alizarina con 
gotero 
- 500 mL HCl 0.1N 
- 500 mL NaOH 0.1N 
- Soluciones para calibrar el 
potenciómetro 
- 5-10 mL de NaOH y HCl 1 N o M 
para neutralizar desechos 
- Tiras indicadoras de pH 
- 2 probetas de 100 mL 
- 1 vaso de precipitado de vidrio de 
500 o 1000 mL para desecho de 
residuos.
 
Precauciones: 
- Colocarse la respectiva bata de laboratorio, abotonada. 
- Colocarse los accesorios de protección individual (cubrebocas, lentes de protección, 
guantes). 
- Ajustar correctamente el soporte universal. 
- Tener cuidado al pipetear los indicadores. 
- Importante rotular el material, los indicadores y las soluciones. 
 
 
 
 
 
 
 RESULTADOS: 
Indicador 
Color en 
Medio Alcalino 
Color del vire 
PH 
Potenciómetro 
ml 
gastados 
en el 
vire. 
Color con exceso de 
base. 
Amarillo de metilo Amarillo Rojo claro 6.77 5.1ml Amarillo 
Naranja de metilo Amarillo Rojo 6.83 5 ml Rosa 
Azul de bromuro Azul Amarillo 6.86 11.3 ml Sin cambio 
fenolftaleína Morado Incoloro 7.5 6.8 ml Rosa 
Rojo de metilo Amarrillo Rosa 7.1 – 6.9 6.5 ml Amarillo 
Rojo de Fenol Púrpura Amarillo 7.1 5.4ml Púrpura 
Amarrillo de 
alizarina 
Lila Amarrillo 7.10 5.1 ml Lila 
Azul de timol Turquesa Amarrillo 7.21 5 ml Azul 
Verde de 
bromocresol 
Azul Amarrillo 7.3 5 ml Rosa 
 
Indicador (Amarillo de Metilo) más la base. Titular con solución HCl 0.1 N gota por gota. 
 
 
 
 
 
 
La mezcla se vuelve color rojo claro. Se mide el pH. 
 
 
 
 
 
 
 
Conclusiones. 
Los indicadores de pH son colorantes orgánicos que varían de color cuando son 
expuestos a ciertas sustancias. A cada color le corresponde un nivel de basicidad 
o acidez. 
Se llegó a lograr el objetivo de la práctica haciendo titulación de un ácido y una 
base logrando observar la utilidad de los indicadores. 
El cambio de color del indicador se debe a que al aumentar o disminuir la acidez o 
alcalinidad de la disolución, se genera un cambio químico estructural que hace 
que el número de protones del elemento aumenten o disminuyan. 
Indicador ¿Qué es? ¿Para qué se utiliza? Color 
Azul de 
Bromotimol 
Colorante sensible al pH de su entorno. El 
azul de bromotimol tiene una escala de 
indicación activa comprendida entre un pH 
6.0 y de 7.6. 
Se utiliza principalmente 
en aplicaciones que 
requieren sustancias de 
medición que tendrían un 
pH relativamente neutro. 
Un uso común es para 
medir la presencia de 
ácido carbónico en un 
líquido. 
En solución ácida 
presenta un color 
amarillo, en solución 
básica presenta un 
azul y en solución 
neutra presenta un 
color verde. 
Fenolftaleína 
Es un compuesto químico que se obtiene 
por reacción del fenol (C6H5OH) y el 
anhídrido ftálico (C8H4O3), en presencia 
de ácido sulfúrico. 
Se utiliza sobre todo 
para valoraciones ácido-
base. 
En disoluciones 
ácidas permanece 
incoloro, pero en 
disoluciones básicas 
toma un color 
rosado con un punto 
de viraje entre 
pH=8,2 (incoloro) y 
pH=10 (magenta o 
rosado). 
Rojo de 
fenol 
Sustancia orgánica que tiene la propiedad 
de cambiar de color cuando pasa de 
alcalino a ácido y viceversa. También se 
le conoce como Fenolsulfonftaleina, 
Sulfental, Sulfonftal o PSP. 
Utilizado como indicador 
ácido-base. 
Este indicador de 
pH es de color 
amarillo por debajo 
de 6,8, y de color 
rojo por encima de 
8,4. 
Azul de 
timol 
Se le conoce con el nombre de timol 
sulfonaftaleína y su fórmula química es 
C27H30O5S. Es una sustancia que resulta 
irritante parala piel y las mucosas. 
Utilizado como indicador 
de pH en los laboratorios 
de química. 
Puede ser de color 
amarillo o fucsia 
(sobre una solución 
ácida) y verde o azul 
(en una solución 
básica). 
Naranja de 
metilo 
Es un colorante azoderivado, y un 
indicador de pH con cambio de color de 
rojo a naranja-amarillo entre pH 3,1 y 4,4. 
El nombre del compuesto químico del 
indicador es sal sódica de ácido sulfónico 
de 4-Dimetilaminoazobenceno. 
Utilizado en la titulación 
de alcalinidad del filtrado 
de lodos y muestras de 
agua. 
El indicador es 
amarillo en las 
soluciones con un 
pH superior a 4,3 y 
rojo por debajo de 
4,3. 
Verde de 
bromocresol 
El verde de bromocresol es un indicador 
orgánico para valoración ácido-base. 
Su intervalo de transición de pH es 
aproximadamente entre 3.8–5.4. Su 
fórmula química es C21H14Br4O5S. 
Se usa como revelador, 
especialmente para 
sustancias que contienen 
ácidos carboxílicos y 
ácidos sulfónicos o 
también para separar 
Es amarillo por 
debajo de pH 3.8 y 
azul por encima de 
pH 5.4. Entre pH 3.8 
y 5.4 es verde 
https://www.quimica.es/enciclopedia/Fenol.html
https://www.quimica.es/enciclopedia/%C3%81cido_sulf%C3%BArico.html
sustancia que posean un 
pKa por debajo de 5. 
Amarillo de 
metilo 
Es un colorante azoico derivado del 
alquitrán; se observa como un sólido color 
pardo-amarillento, es inodoro. 
Colorante azoderivado empleado en la 
industria alimentaria como aditivo para 
teñir las grasas de un color amarillo 
similar al de la mantequilla. Empleado 
también como indicador de pH en medio 
ácido capaz de virar del color amarillo al 
rojo. 
Utilizado en la titulación 
de alcalinidad del filtrado 
de lodos y muestras de 
agua. 
En disoluciones 
básicas toma un 
color rosado con un 
punto de viraje entre 
pH=8,2 (incoloro) y 
pH=10 (magenta o 
rosado). 
Amarillo de 
alizarina 
La alizarina es un conjunto de colorantes 
orgánicos que se obtienen de forma 
natural a partir de las raíces de una planta 
de nombre rubia. 
Indicador de pH 
Esta sustancia por 
debajo de 10,2 es 
amarilla, pero por 
encima de 12 es 
roja. 
 
 
 
 
Referencias. 
Cómo funcionan los indicadores de pH [Internet]. Com.mx. 2018 [citado el 9 de 
septiembre de 2021]. Disponible en: https://farbe.com.mx/como-funcionan-
los-indicadores-de-ph/ 
Indicadores de pH [Internet]. Lifeder.com. 2021 [citado el 9 de septiembre de 
2021]. Disponible en: https://www.lifeder.com/indicadores-ph/ 
Sosa EPG. Indicadores de pH [Internet]. Unam.mx. [citado el 9 de septiembre de 
2021]. Disponible en: 
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/12.IndicadoresdepH_9152.pdf 
Azul de bromotimol: estructura, propiedades, preparación, usos [Internet]. 
Lifeder.com. 2018 [citado el 9 de septiembre de 2021]. Disponible en: 
https://www.lifeder.com/azul-de-bromotimol/. 
Greelane.com. [citado el 9 de septiembre de 2021]. Disponible en: 
https://www.greelane.com/es/ciencia-tecnolog%C3%ADa-
matem%C3%A1ticas/ciencia/definition-of-ph-indicator-605499/. 
Wikipedia contributors. Verde de bromocresol [Internet]. Wikipedia, The Free 
Encyclopedia. [citado el 9 de septiembre de 2021]. Disponible en: 
https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Verde_de_bromocresol&oldid=12
0139545