Manual De Procedimientos En Química SANGUINEA

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS EN 
QUIMICA SANGUINEA 
Vigencia:2018 
 
Cód.: GMLCMA-
120.11 
Versión: 1 
EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO 
HOSPITAL DE LA VEGA – PUESTO 
DE SALUD DE NOCAIMA 
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Francia L. 
Contreras 
 
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Aprobado Por : 
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Cargo: Líder laboratorio clínico Cargo: Asesora de Calidad 
planeacion 
 
Cargo: Gerente 
Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 
 
 
E.S.E HOSPITAL LA VEGA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
MANUAL DE QUIMICA SANGUINEA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
LABORATORIO CLINICO 
 
 
 
 
 
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS EN 
QUIMICA SANGUINEA 
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planeacion 
 
Cargo: Gerente 
Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 
 
 
 
 
 
 
1-OBJETIVO: 
 
Estandarizar los procedimientos en química sanguínea, para garantizar que la 
realización de los análisis cumpla con los parámetros establecidos en cada 
técnica, y por consiguiente se obtengan resultados confiables, con precisión y 
calidad. 
 
 
 
2. ALCANCE 
 
Este documento está dirigido a los profesionales que laboran en el área de 
química del Laboratorio Clínico. 
 
 
 
3- RESPONSABILIDAD 
 
La responsabilidad es de los profesionales que realiza los exámenes quien debe 
desarrollar los procedimientos acorde a lo establecido en los insertos y manuales y 
procedimientos de la institución. 
 
 
 
 
 
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4. TECNICA DE GLICEMIA 
 
FUNDAMENTO 
 
 
Técnica enzimática líquida donde la glucosa de la muestras se oxida por la acción 
de la glucosa-oxidasa formándose peróxido de hidrógeno y gluconato. Se produce 
un compuesto de color rojo cuya intensidad de color es proporcional a la cantidad 
de glucosa presente en la muestra. 
La determinación enzimática de la glucosa se basa en la siguiente reacción 
 GOD 
Glucosa + O2 +H2O--------------- ácido glucónico +H2O2 
 
 POD 
2 H2O2 + 4AF +4 hidroxibenzoato------------ quinomina roja. 
 
CONDICIONES GENERALES 
- Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa 
amarillo) para obtener suero. 
- Orina obtenida por micción simple y líquido cefalorraquídeo obtenido por 
punción. 
- 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
El paciente debe estar en ayunas o haber ingerido la última comida por lo menos 8 
horas antes de la prueba no más de 12 horas. 
 
 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
Suero, plasma, sangre entera o líquido cefalorraquídeo 
 
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a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual o plasma recolectado 
con anticoagulante comunes. También es posible realizar la determinación en 
otros líquidos biológicos tales como líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido Pleural, 
etc. 
Cuando no es posible extraer sangre venosa o en caso de urgencia, la prueba se 
puede realizar en sangre capilar. 
b) Aditivos: En caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda el 
uso de anticoagulante G para su obtención (el mismo contiene fluoruro como 
conservador) o heparina. 
c) Sustancias interferentes conocidas: Los sueros o plasmas con hemólisis visible 
o intensa deben ser desproteinizados, como se indica en la técnica para sangre 
total. 
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente 
método. 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: La destrucción enzimática de la 
glucosa sanguínea (glucólisis) por hematíes y leucocitos es proporcional a la 
temperatura a la que se conserva la sangre, siendo máxima a 37ºC. Este proceso 
no se inhibe aún en estado de congelación, por lo que la sangre debe 
centrifugarse dentro de las 2 horas de la extracción. El sobrenadante límpido se 
transfiere a otro tubo para su conservación. De esta forma la glucosa es estable 4 
horas a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En caso de no poder 
procesarse la muestra de la forma indicada, deberá adicionarse un conservador en 
el momento de la extracción. 
 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
Reactivos Provistos: Son estables en refrigerador (2 a 10ºC) hasta la fecha de 
vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante 
lapsos prolongados. 
 
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Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: Durante el uso, el Reactivo 
puede colorearse ligeramente no afectando su funcionamiento siempre que se 
procese un Blanco con cada lote de determinaciones y un Standard 
periódicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 
D.O. o las lecturas del Standard sean anormalmente bajas. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
- Temperatura de reacción: 37ºC 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
Utilizar los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
funcionabilidad del procedimiento de medida. 
Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el 
numeral 5. 
 
GLOSARIO 
 
La Glucosa es un carbohidrato que se altera, en enfermedades metabólicas dando 
luego a Hiperglicemia, Diabetes Mellitus. La hiperglicemia crónica de la diabetes 
está asociada con daño a largo plazo, disfunción y falla de varios órganos, 
especialmente los ojos, riñones, nervios, corazón, y vasos sanguíneos. Existen 
 
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múltiples factores causales de hiper o hipoglicemia, debe considerarse en cada 
caso la condición fisiológica y/o la patología presente en el paciente. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipo Mindray BS-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
La determinación de glicemia en ayunas y la prueba de tolerancia a una carga de 
glucosa sirven para establecer el diagnóstico de DM y los trastornos del 
metabolismo de los carbohidratos. También sirven para controlar el tratamiento en 
los diabéticos y en pacientes con deshidratación, coma, hipoglicemia, insulinoma, 
acidosis y cetoacidosis. 
 
De acuerdo al comité de Expertos los criterios para establecer el diagnóstico de 
DM son: 
1. Síntomas de diabetes (poliuria, polidipsia, pérdida de peso) más un hallazgo 
casual de niveles de glicemia mayor o igual a 200 mg/dl. Se define como casual al 
valor de glicemia encontrado en cualquier momento sin tener en cuenta ayuno o 
tiempo de la última comida. 
 
2. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. Se define como ayuno la NO 
ingestión de calorías por lo menos 8 horas antes de la prueba. Si la glicemia post 
prandial está entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. En este caso la prueba debe repetirse 
en un día diferente y si el resultado es el mismo hacer controles periódicos 
porque estos niveles pueden representar un factor de riesgo para Diabetes y 
enfermedad cardiovascular en un futuro. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
 
Glicemia en ayunas: 75 a 110 mg/dl 
 
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Glicemia 2 hrs. post carga: < 140 mg/dl 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
La patología más común relacionada con el metabolismo de los hidratos de 
carbono es la diabetes mellitus. El diagnóstico precoz y el control de los pacientes 
diabéticos, tiene por objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones resultantes 
de la hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado.La diabetes mellitus (DM) 
se define como un grupo de enfermedades metabólicas caracterizadas por 
hiperglicemia crónica que resulta de defectos en la secreción de insulina, en su 
acción o en ambos. 
 
5. TECNICA DE COLESTEROL 
 
FUNDAMENTO 
Técnica enzimática espectrofotométrica por química líquida donde el surfactante 
Triton X-100 disocia el colesterol y sus ésteres de los complejos lipoprotéicos 
presentes en la muestra. La enzima colesterol-ester-hidrolasa cataliza la hidrólisis 
de los ésteres de colesterol a colesterol. Luego el colesterol libre es oxidado en 
presencia de colesterol oxidasa formándose colestenona y peróxido de hidrógeno 
(H2O2). Finalmente el H2O2 junto con un leucocolorante genera un compuesto 
coloreado cuya densidad es proporcional a la concentración de colesterol presente 
en la muestra. 
La concentración de LDL/BD se calcula teniendo en cuenta el valor de los 
triglicéridos de acuerdo a la siguiente formula de Friedewald: 
LDL/BD = colesterol total – HDL – Triglicéridos/5 
 
La secuencia reaccional es la siguiente: 
 CHE 
Esteres del colesterol ---------------- colesterol + ácidos grasos 
 
 
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 CHOD 
Colesterol + O2 --------------------------- colesten-3-ona + H2O2 
 
 POD 
H2O2 + 4-AF + aceptor ----------------------- quinonimina roja 
 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarilla) 
para obtener suero. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
 
Para determinar el colesterol de alta/baja densidad requiere ayuno de 12 a 14 
horas y no haber ingerido alcohol en las últimas 48 horas previas a la toma de la 
muestra. 
No es posible calcular los niveles de colesterol LDL/BD cuando el nivel de 
triglicéridos del paciente está por encima de 400 mg/dl. 
 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
 
Suero o plasma. 
a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual. 
b) Aditivos: En caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda 
únicamente el uso de heparina como anticoagulante para su obtención. 
c) Sustancias interferentes conocidas: 
- Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en la 
determinación. 
- Los sueros o plasmas con hemólisis visible o intensa producen valores 
falsamente aumentados por lo que no deben ser usados. 
 
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- No se observan interferencias por bilirrubinas hasta 80 mg/l, ácido ascórbico 
hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera. 
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente 
método. 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: El colesterol en suero es 
estable por lo menos 1 semana en refrigerador y 2 meses en congelador, sin 
agregado de conservantes. 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
 
Reactivos Provistos: Son estables en refrigerador (2 a 10ºC) hasta la fecha de 
vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante 
lapsos prolongados. 
Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: Lecturas del Blanco 
superiores a 0,160 D.O. son indicio de deterioro de los reactivos. En tal caso 
desechar. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
- Temperatura de reacción: 37ºC 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
· Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
funcionabilidad del procedimiento de medida. 
 
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· Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el 
numeral 5. 
 
GLOSARIO 
El colesterol es un esteroide alcohólico no saturado y componente estructural muy 
importante de las membranas celulares y precursor de la síntesis de los ácidos 
biliares y las hormonas esteroides. Las 2/3 partes del colesterol están esterificadas 
y 1/3 está libre. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
Sirve para evaluar pacientes con riesgo de enfermedad cardiovascular 
arterioesclerótica, para determinar colestásis hepática y para definir evidencia de 
abetalipoproteinemia. 
 
El colesterol sérico se eleva en hiperlipoproteinemias hereditarias, síndrome 
nefrótico, ictericia obstructiva con colestásis, cirrosis biliar primaria, embarazo, 
hipotiroidismo y otros desórdenes metabólicos. 
Niveles bajos de colesterol se encuentran en hipertiroidismo, mala absorción, 
hepatitis severa, desnutrición y deficiencias de apolipoproteínas. Existe una 
relación inversa entre el riesgo de enfermedad coronaria y la concentración de 
colesterol HDL, pues entre más baja sea hay mayor riesgo y viceversa. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
El panel de experto del Nacional Colesterol Educación programa (NCEP) provee 
los siguientes valores de colesterol: 
Deseable: Menor 200 mgr% 
 
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Moderadamente alto 200 – 239 mgr% 
Elevado 240 mgr% 
Hay mucha variabilidad de los valores con relación a sexo, edad, dieta y riesgo 
coronario por lo cual es difícil establecer valores de referencia para la población 
general. En niños, adultos jóvenes y mujeres los valores son más bajos que en 
adultos mayores de 30 años. 
 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad diagnóstica limitada. 
Sin embargo, su concentración varía de maneras más o menos predecible en un 
gran número de condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno de los 
factores contribuyentes a la formación de ateromas dado que las complicaciones 
arterioscleróticas prevalecen en individuos hipercolesterolémicos. 
Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar además, que el riesgo 
de contraer enfermedad cardiaca coronaria (ECC) para los individuos varones de 
más de 40 años con colesterolemia menor o igual a 210 mgr% es 3 veces menor 
entre individuos con más de 230 mgr% y 6 veces menor que entre individuos con 
más de 260 mgr%. 
 
 
6. TECNICA DE TRIGLICERIDOS 
 
FUNDAMENTO 
 
Técnica colorimétrica basada en el método enzimático. Los triglicéridos se 
disocian de los complejos lipoprotéicos por la acción del triton X-100 y se 
hidrolizan por la lipasa a glicerol y ácidos grasos. 
Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y ácidos 
grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa (GPO) y 
 
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ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato (G3P) y 
adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona 
fosfato (DAP) y peróxido de hidrogeno (H2O2) por GPO. 
Al final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona (4-AF) y 
p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración 
roja: 
 LPL 
Triglicéridos + H2O2 ------------------ Glicerol + Acidos grasos libres 
 Glicerol quinaza 
Glicerol + ATP -------------------------- G3P + ADP 
 GPO 
G3P + O2 ------------------------- DAP + H2O2 
 POD 
H2O2 + 4-AF + p-Clorofenol ----------------- Quinona + H2O 
 
 
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de triglicéridos 
presentes en la muestra ensayada. 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja- tubo tapa amarilla) 
para obtener suero. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
El paciente debe estar en ayunas durante por lo menos 13 horas y haber ingerido 
la noche anterior una comida liviana sin grasa. 
 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
Suero y plasma heparinizado o EDTA. Estabilidad de la muestra 5 días a 2-8ºC. 
 
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No se han observado interferencias con bilirrubinas hasta 170 umol/L y 
hemoglobina hasta 10 g/L 
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la 
determinación de los triglicéridos. 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada 
en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos 
de la luz y se evita su contaminación. No mantener a temperaturas elevadas 
durante lapsos prolongados. 
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. 
Indicadores de deterioro de los reactivos: 
- Presencia de partículas y turbidez. 
- Absorbancia (A) del Blanco a 505 nm mayor o igual 0,14. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
 - Temperatura de reacción: 37ºC/ 15-25ºC 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: Normal y 
Patológico. 
 
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Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el 
instrumento, los reactivos y el calibrador. 
 
GLOSARIO:Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también producidos en forma 
endógena o a partir de los carbohidratos. Los triglicéridos, ésteres de ácidos 
grasos, representan la principal forma de la grasa corporal; su función principales 
el de almacenar y proveer la energía celular La concentración plasmática de los 
triglicéridos representa el balance entre la velocidad de entrada y de remoción de 
la grasa corporal, varía con la edad y con el sexo .. 
 
 
REFERENCIAS 
 
labtest Vademecum. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
Las principales razones para la determinación de los triglicéridos son: 
· Evaluar el perfil lipídico de un paciente con riesgo de enfermedad cardíaca 
coronaria 
Calcular el colesterol de baja densidad (BD,LDL) cuando no se dispone de 
medición directa utilizando la fórmula: LDL colesterol = colesterol total – (Tg/5 + 
colesterol HDL). Esta fórmula solo es válida para concentraciones de triglicéridos 
menores a 400 mg/dl. 
 Determinar si la disminución del colesterol de alta densidad (HDL,AD) es el 
resultado de una hipertrigliceridemia para desarrollar la estrategia de tratamiento 
más adecuada. 
 
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Evaluar riego de pancreatitis por hipertrigliceridemia cundo los niveles están por 
encima de 1000 mg/dl. 
Determinar etiología en caso de xantomas eruptivos o plantares y de lipemia 
retinalis. 
Confirmar si la hipertrigliceridemia secundaria es producida como un efecto 
colateral del tratamiento con antihipertensores, hipocolesterolémicos y otras 
drogas como isotretionina, estrógenos, etc. 
 Hacer seguimiento de la efectividad de dieta, ejercicio y terapia con drogas en 
pacientes con altos niveles de Triglicéridos. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
Hombres: 40 a 160 mgr% 
Mujeres : 35 a 135 mgr% 
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca 
sus propios valores de referencia. 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las hiperlipedemias, 
Estas enfermedades pueden tener origen genético o ser secundaria a otras tales 
como nefrosis, diabetes mellitus y disfunciones endocrinas. El aumento de 
triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en enfermedades 
arterioscleróticas. 
Los triglicéridos son insolubles en la sangre y por esto no circulan libremente en el 
suero sino que son transportados como quilomicrones (80%) y lipoproteínas pre-
beta (55%); se elevan marcadamente después de una comida y hay una demora 
de 10-12 horas para que se depuren de la circulación después de haber comido y 
persiste por otras 6-8 horas. 
Hay hipertrigliceridemia en muestras de pacientes sin ayuno y en 
hiperlipoproteinemia primaria (tipos I, II, III, IV, V). En hiperlipoproteinemias 
secundarias debidas a infusión de lípidos parenterales en pacientes 
 
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hospitalizados, diabetes mellitus, isquemia cardiaca, cetoacidosis diabética, 
alcoholismo agudo, anticonceptivos orales, síndrome nefrótico, insuficiencia renal 
crónica, esteroides, pancreatitis aguda, gota, hipotiroidismo, embarazo, 
infecciones por Gram (-) y enfermedad de depósito de glicógeno. 
 
Hay hipotrigliceridemia en dieta restrictiva de grasas, hipertiroidismo, drogas 
hipolipidicas, síndromes de malabsorción, desnutrición severa y en abeta o 
hipobetalipoproteinemia hereditaria. 
 
 
7. TECNICA DE COLESTEROL HDL 
FUNDAMENTO 
 
Las HDL (lipoproteínas de alta densidad) se separan de los quilomicrones, 
las VLDL (lipoproteínas de densidad muy baja) y LDL (lipoproteínas de 
baja densidad) por la adición de un reactivo precipitante (ácido 
fosfotúngstico - cloruro de magnesio) a suero o plasma. Tras la 
centrifugación, el contenido de colesterol de la fracción HDL, que permanece 
en el sobrenadante, se determina mediante el método colorimétrico 
enzimático que utiliza colesterol esterasa, colesterol oxidasa, peroxidasa y 4- 
aminoantipirina/fenol (cromógeno). 
 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja) para obtener 
suero. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
 
 
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Para determinar el colesterol de alta/baja densidad requiere ayuno de 12 a 14 
horas y no haber ingerido alcohol en las últimas 48 horas previas a la toma de la 
muestra. No es posible calcular los niveles de colesterol LDL/BD cuando el nivel 
de triglicéridos del paciente esta por encima de 400 mg/dl. 
 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
 
Suero o plasma. 
a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual. 
 
b) Aditivos: En caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda 
únicamente el uso de heparina como anticoagulante para su obtención. 
 
c) Sustancias interferentes conocidas: 
 
-Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en la determinación. 
- Los sueros o plasmas con hemólisis visible o intensa producen valores 
falsamente aumentados por lo que no deben ser usados. 
- No se observan interferencias por bilirrubinas hasta 80 mg/l, ácido ascórbico 
hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera. 
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente 
método. 
 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: El colesterol HDL en suero es 
estable por lo menos 1 semana en refrigerador y 2 meses en congelador, sin 
agregado de conservantes. 
 
 
 
 
 
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CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
 
Reactivos Provistos: Son estables en refrigerador (2 a 10ºC) hasta la fecha de 
vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante 
lapsos prolongados. 
Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: Lecturas del Blanco 
superioresa 0,160 D.O. son indicio de deterioro de los reactivos. En tal caso 
desechar. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
- Temperatura de reacción: 37ºC. 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
 
Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
funcionabilidad del procedimiento de medida. 
Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el 
numeral 5. 
 
 
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GLOSARIO 
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) son partículas de origen no bien 
establecido, estrechamente relacionadas con el transporte reverso del colesterol y 
con una comprobada función antiaterogénica que se debe sólo en parte a este 
transporte reverso, y en parte a otras múltiples propiedades relacionadas con 
inflamación, función endotelial y mecanismos de aterotrombosis y fibrinólisis. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
Es sabido que tener colesterol HDL (C-HDL) bajo es un factor de riesgo 
independiente para enfermedad coronaria y eventos cardiocerebrovasculares y 
por muchos años se recomendó elevar el C-HDL por medios nofarmacológicos, 
como dejar de fumar, perder el exceso de peso, combatir el sedentarismo y 
controlar la diabetes, en pacientes con LDL en valores normales. 
9.3- VALORES DE REFERENCIA 
Hasta 35 mg/dl= 0.91 mmol/L Riesgo Elevado 
Mayor de 60 mg/dl = mayor a 1.56 mmol/L Riesgo bajo 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
 
Un valor de Colesterol-HDL bajo es un indicador independiente y firme de 
enfermedad coronaria. En ATP III
4
, el valor bajo de Colesterol-HDL quedó 
categóricamente definido como un nivel < 40 mg/dL (1,04 mmol/L). 
 
Un valor bajo de Colesterol-HDL se emplea como un estimador de riesgo a 10 
años, de padecer la enfermedad cardíaca coronaria debiéndose ésta a diversas 
causas: triglicéridos elevados, sobrepeso y obesidad, inactividad física, tabaco, 
 
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ingestas muy altas de carbohidratos (> 60% de calorías) y ciertas drogas como los 
esteroides, anabolizantes y los agentes progestionales. 
 
 
 
 
8. TECNICA DE ACIDO URICO 
FUNDAMENTO 
 
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno 
(2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y 2-4 
Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un compuesto rosáceo: 
 
 Uricasa 
Ácido úrico + 2H2O + O2 ---------------- Alantoína + CO2 + 2H2O2 
 
 POD 
2H2O2 + 4-AF + DCPS ------------------ Quinonaimina + 4H2O 
 
La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la concentración de 
ácido úrico presente en la muestra ensayada. 
 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarilla) 
para obtener suero. 
5.1- CONDICIONES DEL PACIENTE 
 
El paciente debe estar en ayunas. 
 
 
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CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
Suero o plasma. Estabilidad 3-5 días a 2-8ºC y 6 meses a -20ºC. 
No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 umol/L, hemoglobina 
hasta 130 mg/dL y ácido ascórbico hasta 570 umol/L. 
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la 
determinación del ácido úrico. 
 
 
 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
 
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada 
en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos 
de la luz y se evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. 
Una vez abierto es estable 1 mes si se mantiene los viales bien cerrados a 2-8ºC, 
protegidos de la luz y se evita su contaminación. 
 
Indicadores de deterioro de los reactivos: 
-Presencia de partículas y turbidez. 
- Absorbancia (A) del Blanco a 520 nm mayor o igual 0,16. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
 - Temperatura de reacción: 37ºC 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
 
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Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
 
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: Normal y 
Patológico. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, 
revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe disponer 
su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los 
controles no cumplan con las tolerancias. 
 
GLOSARIO 
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas 
.Los uratos son sintetizados por el organismo y también se obtienen de la dieta. El 
75% se elimina por vía renal y el 25% por vía intestinal. Los uratos se filtran 
libremente por el glomérulo y aproximadamente el 98% es absorbido por el túbulo 
proximal. Aproximadamente el 8% de la carga filtrada se excreta en la orina. El 
ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipomindray Bs-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
 
Los niveles elevados en suero o plasma se acompañan generalmente de niveles 
elevados en orina. La principal indicación de la prueba es el diagnóstico de 
hiperuricemia (gota) como resultado del aumento en la síntesis de las purinas.Hay aumento fisiológico por el uso de drogas tales como: agentes antineoplásicos, 
ácido etacrinico, adrenocorticosteroides, hidroclorotiazida, ciclosporina, 
 
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pirazinamida, espironolactona, teofilina, indapamide, prednisona, propanolol, 
triamterene, warfarina, espironolactona y ácido acetilsalicílico. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
Mujeres : 2.5 a 6.8 mgr% = 149 a 405 umol/L 
Hombres: 3.6 a 7.7 mgr% = 214 a 458 umol/L 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
 
El ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de las purinas. En 
una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina 
y ácido úrico.Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero varía de un 
individuo a otro de acuerdo a diversos factores tales como: sexo, dieta, origen 
étnico, constitución genética, embarazo. 
Niveles altos de ácido úrico son indicativos de patología renal y generalmente se 
asocian con la gota. Y son indicio de desorden en el metabolismo de las 
sustancias que lo originan o de defectos en su eliminación. Los niveles altos en 
suero o plasma se acompañan generalmente de niveles elevados en 
orina.También hay niveles altos en leucemias y policitemias por aumento del 
metabolismo de las nucleoproteínas, por ingestión de alimentos ricos en 
nucleoproteínas , en pacientes con disminución de la función renal, en ciegos y 
alcohólicos. 
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y 
de laboratorio. 
 
9. TECNICA DE CREATININA 
 
FUNDAMENTO 
La creatinina y otros compuestos de la muestra reaccionan con el ácido pícrico en 
medio alcalino dando un complejo color rojo que se cuantifica mediante lectura 
 
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fotométrica. La determinación de creatinina puede llevarse a cabo por medio de 
una técnica de punto final, o por una técnica cinética eliminándose en ambas el 
color que se debe a los cromógenos no creatinina. 
En el primer caso, la adición de ácido al medio, destruye el picrato de creatinina 
pero no el color formado por los demás compuestos. Por lo tanto la diferencia 
entre la lectura fotométrica antes y después del agregado de ácido, permite 
cuantificar la creatinina en forma específica. En la técnica cinética, los cromógenos 
no creatinina, reaccionan dentro de los primeros 30 segundos de iniciada la 
reacción, que se comporta como cinética de primer orden para la creatinina. De 
manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la 
reacción, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina. 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja –tubo tapa amarilla) 
para obtener suero. 
Para depuración de creatinina se requiere muestra de orina. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
No es necesario ayuno previo. 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
Suero u orina 
 
a) Recolección: Obtener suero de la manera usual. En el caso de orina, obtener 
orina de 2 horas o de 24 hs empleando un recipiente perfectamente limpio y 
manteniendo en el refrigerador (2-10ºC) durante la recolección. Medir la diuresis, 
tomar una alícuota y efectuar una dilución 1:50 de la misma. En caso que la 
diuresis sea 2 hs, multiplicar el volumen medido por 12 para calcular la cantidad 
de creatinina eliminada durante 24 hs. 
b) Aditivos: No se requieren. 
 
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c) Sustancias interferentes conocidas: Sueros con concentraciones de bilirrubina 
mayores a 50 mg/l producen valores erróneos. No interfieren: hemólisis ligera o 
moderada, hiperlipemia, disproteinemia ni cromógenos no-creatinina (tales como 
glucosa, ácido ascórbico, cetoácidos, glutatión o ergotionina). 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: La creatinina en suero es 
estable hasta 24 horas y en orina hasta 4 días, en refrigerador sin agregado de 
conservadores. 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
 
Reactivos provistos: estables a temperatura ambiente hasta la fecha de 
vencimiento indicada en la caja. 
Reactivo de Trabajo: a temperatura ambiente y protegido de la luz es estable una 
semana a partir de la fecha de su preparación. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
 
- Temperatura de reacción: 25ºC 
El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar entre 22 y 30ºC. 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
 
 
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GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
funcionabilidad del procedimiento de medida. 
Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el 
numeral 5. 
 
GLOSARIO 
La creatinina es importante en metabolismo del músculo porque sirve de 
almacenamiento de fosfatos de alta energía a través de la síntesis de 
fosfocreatina. La creatinina es un anhídrido de creatinina y se forma, de una 
manera constante, por una reacción espontánea e irreversible de la creatinina 
perdiéndose una molécula de agua. La creatinina libre no es reutilizada por el 
organismo y funciona solamente como producto de desecho de la creatinina. 
La excreción urinaria es directamente proporcional a la masa muscular; 
aproximadamente se excretan 0.5 mmol de creatinina por kilogramo de masa 
muscular. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
 INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
La determinación de creatinina sérica se utiliza principalmente para evaluar la 
función renal pero se considera que para éste propósito es más sensible 
determinar la depuración de creatinina corregida para la superficiecorporal. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
SUERO Y PLASMA 
Hombres: 0.9 - 1.3 mg/dl 
Mujeres: 0.6 - 1.1 mg/dl 
 
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ORINA 
Hombres: 14 – 26 mg/dl/ 24h 
Mujeres: 11- 20 mg/dl /24 h 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
 
La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi 
exclusivamente por filtración renal. Su determinación en suero, así como el 
clearance de creatinina endógena constituyen parámetros importantes para el 
diagnóstico de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a los problemas 
prácticos inherentes a la determinación del clearance (recolección de orina en 
niños, etc), la determinación de creatinina sérica es más utilizada como índice de 
funcionalismo renal. 
 Su concentración se eleva en daño renal y es un indicador más específico que el 
nitrógeno ureico. También se puede elevar en necrosis músculo esquelética, 
trauma, distrofia muscular progresiva, esclerosis lateral amiotrofia, amiotonia 
congénita dermatomiositis, miastenia gravis, ayuno prolongado, hipertiroidismo y 
acidosis diabética. 
Hay aumento en el suero por interferencia analítica con algunos métodos por las 
siguientes drogas o constituyentes: acetaminofén, acetoacetato, acetona, ácido 
amino y beta hidroxihipúrico, ácidos linoléico, nalidíxico, oxaloacético, úrico, ASA, 
ampicilina, bilirrubina, cefalosporinas, alanina, cafeína, creatina, citrato, clofibrato, 
dipirona, EDTA, espironolactona, estreptomicina, etanol, fenitoína, glucosa, 
hemoglobina, heparina, hidantoína, hidroclorotiazida, lactato,tobramicina, 
triglicéridos y warfarina. 
Hay disminución por interferencia analítica por: ácido ascórbico, bilirrubina, oxalato 
de sodio y fenacemide. 
La depuración de creatinina mide simultáneamente concentraciones de la 
sustancia en sangre y orina y sirve para evaluar la función renal total porque es un 
buen indicador de la rata de filtración glomerular (GFR). 
 
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Cargo: Líder laboratorio clínico Cargo: Asesora de Calidad 
planeacion 
 
Cargo: Gerente 
Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 
 
 
10. TECNICA DE BUN 
FUNDAMENTO 
La urea presente en la muestra origina, según las reacciones descritas a 
continuación, un indofenol coloreado que se cuantifica espectrofotométricamente. 
 
 ureasa 
Urea+H20 --------------------- 2NH4+C02 
 
 nitroprusiato 
NH4+ salicilato+NACLO --------------------------------- Indofenol 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja –tubo tapa amarilla) 
para obtener suero. 
Para depuración de creatinina se requiere muestra de orina. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
No es necesario ayuno previo. 
 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
Suero u orina 
a) Recolección: suero plasma u orina recogidos mediante procedimientos 
estándar. Diluir la orina1/50 con agua destilada antes del ensayo. 
b) Aditivos: No se requieren. 
c) Sustancias interferentes conocidas: Sueros con concentraciones de bilirrubina 
mayores a 50 mg/l producen valores erróneos. No interfieren: hemólisis ligera o 
moderada, hiperlipemia, disproteinemia ni cromógenos no-creatinina (tales como 
glucosa, ácido ascórbico, cetoácidos, glutatión o ergotionina). 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: 
 
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planeacion 
 
Cargo: Gerente 
Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 
 
La urea en suero o plasma es estable 7 días a 2 a 8 C. Se recomienda la heparina 
como anticoagulante. 
La urea en orina es estable 3 días a temperatura ambiente si no se produce 
crecimiento bacteriano. 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
 
Reactivos provistos: 
Conservar a 2 a8 C 
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la 
etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación 
durante su uso. 
Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: presencia de partículas, 
turbidez, absorbancia del blanco superior a 0.250 a 600 nm (cubeta de 1 cm). 
Patrón: presencia de partículas y turbidez. 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
Temperatura de reacción: temperatura ambiente: 16 a 25 ºC o durante 5 minutos a 
37 ºC. 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
 
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Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
funcionabilidad del procedimiento de medida. 
Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas 
anteriormente. 
GLOSARIO 
La urea representa el producto final en el metabolismo proteico realizado por el 
hígado, presente en el torrente circulatorio y eliminado por el riñón. Toda 
perturbación renal en la capacidad de eliminar desechos orgánicos, se refleja en 
un aumento de la urea, que hoy en día se expresa por medio de su nitrógeno 
ureico, con el que indirectamente se correlaciona y expresa el nivel de urea 
sanguínea. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
 
Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
 
La determinación de urea se utiliza principalmente para evaluar la función renal 
pero se considera que para éste propósito es más sensible determinar la 
depuración de creatinina corregida para la superficie corporal. 
 
VALORES DE REFERENCIA 
7 a 20 mg/dl 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
La urea se sintetiza en el hígado como un producto de la desanimación de los 
aminoácidos. Su eliminación en la orina representa la principal via de excreción 
del nitrógeno. 
 
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Se encuentran concentraciones elevadas de urea en plasma como consecuencia 
de una dieta hiperproteica, aumento del catabolismo proteico, después de una 
hemorragia gastrointestinal, ligera deshidratación, shock e insuficiencia cardiaca o 
tratamiento con glucorticoides(uremia prerrenal). 
La uremia posrrenal esta causada por condiciones que obstruyen el flujo urinario: 
nefrolitiasis, tumor o hipertrofia prostática. La utilidad de la urea como indicador de 
la función renal esta limitada por la variabilidad de su concentración plasmática 
como consecuencia de factores no renales. El diagnostico clínico no debe 
realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe 
integrar los datos clínicos y de laboratorio. 
 
 
11. TECNICA DE BILIRRUBINA TOTAL 
 
FUNDAMENTO 
Técnica enzimática líquida donde la Bilirrubina reacciona específicamente con el 
acido sulfanilico diazotado produciendo un pigmento color rojo violáceo 
(azobilirrubina) que se mide fotocolorimetricamente a 530 nm. 
 
CONDICIONES GENERALES 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarillo) 
para obtener suero. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
 
El paciente debe estar en ayunas o haber ingerido la última comida por lo menos 8 
horas antes de la prueba no mas de 12 horas. 
Evitar el consumo de medicamentos que alteran los resultados y elevan los 
valores de la bilirrubina como son: Alopurinol, esteroides, antibióticos, 
antimalaricos , entre otros. 
 
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CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
Suero, plasma, sangre entera o líquido cefalorraquídeo 
a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual o plasma recolectado 
con anticoagulante comunes. También es posible realizar la determinación en 
otros líquidos biológicos tales como líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido Pleural, 
etc. 
b) Aditivos: No se requiere de ningún aditivo especial o preservativo. 
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemolisis abundante puede causar 
disminución en los valores de hemoglobina debido a la inhibición de la 
oxihemoglobina. Sueros lipemicos pueden producir resultados elevados falsos. 
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente 
método. 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la bilirrubina sérica es estable 
hasta 7 días a 2-8 C, Puede ser congelada por 3 meses protegida de la luz.. 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
 Reactivos Provistos: 
Conservar a 15-30 C. 
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, 
siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su 
uso. 
Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: presencia de partículas, 
turbidez, absorbancia del blanco superior a 0.05 a 540 nm (cubeta de 1 cm). 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
- Temperatura de reacción: 37ºC 
 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
 
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Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. 
Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual 
de Bioseguridad del Laboratorio. 
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. 
 
GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA 
Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
funcionabilidad del procedimiento de medida. 
Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el 
numeral 5. 
 
GLOSARIO 
La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina. Los 
hematíes al degradarse liberan la hemoglobina que es metabolizada a dos 
moléculas del grupo hem y el grupo globina, el grupo hem se transforma en 
biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o indirecta. Al 
pasar por el hígado esta bilirrubina se conjuga con acido glucoronido 
transformándose en bilirrubina conjugada o directa. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
 
El aumento de la bilirrubina indirecta o bilirrubina total puede indicar: 
- Síndrome de Crigler-Najjar 
- Eritroblastosis fetal 
 
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- Enfermedad de Gilbert 
- Cicatrización de un hematoma grande (sangrado bajo la piel) 
- Anemia hemolítica 
- Enfermedad hemolítica del recién nacido 
- Ictericia fisiológica(normal en los recién nacidos) 
- Anemia depranocitica 
- Reacción a una transfusión 
- Anemia perniciosa 
 
VALORES DE REFERENCIA 
 
Bilirrubina total: hasta 1.0 mg/dl 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
La determinación de bilirrubina sirve para determinar si el paciente tiene una 
enfermedad hepática o una obstrucción en vías biliares. 
La ictericia de la decoloración de la piel y de la esclerótica del ojo que ocurre 
cuando la bilirrubina se acumula en la sangre a un nivel mayor de 2.5 mg/dl 
aproximadamente. La ictericia se presenta porque los glóbulos rojos son 
descompuestos demasiado rápido para que el hígado los procese, lo cual podría 
suceder debido a una enfermedad hepática o a una obstrucción en vías biliares. 
 
12. TECNICA DE BILIRRUBINA DIRECTA 
 
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FUNDAMENTO 
 
La bilirrubina directa reacciona con acido sulfanilico diazotizado en una solución 
acuosa acida para formar azobilirrubina un cromófilo purpureo con absorbancia 
máxima aproximadamente 550nn. La intensidad del color resultante es 
directamente proporcional a la concentración de bilirrubina directa. 
 
CONDICIONES GENERALES 
 
Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarillo) 
para obtener suero. 
 
CONDICIONES DEL PACIENTE 
Elpaciente debe estar en ayunas o haber ingerido la última comida por lo menos 8 
horas antes de la prueba no mas de 12 horas. 
Evitar el consumo de medicamentos que alteran los resultados y elevan los 
valores de la bilirrubina como son: Alopurinol, esteroides, antibióticos, 
antimalaricos , entre otros. 
 
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS 
 
 
Suero, plasma, sangre entera o líquido cefalorraquídeo 
a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual o plasma recolectado 
con anticoagulante comunes. También es posible realizar la determinación en 
otros líquidos biológicos tales como líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido Pleural, 
etc. 
 
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b) Aditivos: No se requiere de ningún aditivo especial o preservativo. 
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemolisis abundante puede causar 
disminución en los valores de hemoglobina debido a la inhibición de la 
oxihemoglobina. Sueros lipemicos pueden producir resultados elevados falsos. 
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente 
método. 
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la bilirrubina sérica es estable 
hasta 7 días a 2-8 C, Puede ser congelada por 3 meses protegida de la luz. 
 
CONDICIONES DE LOS REACTIVOS 
Reactivos Provistos: 
Conservar a 15-30 C. 
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, 
siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su 
uso. 
 
Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: presencia de partículas, 
turbidez, absorbancia del blanco superior a 0.05 a 540 nm (cubeta de 1 cm). 
 
CONDICIONES DE LA PRUEBA 
- Temperatura de reacción: 37ºC 
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD 
Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las 
muestras. Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el 
manual de Bioseguridad del Laboratorio. 
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· Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la 
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· Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las 
condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el 
numeral 5. 
 
GLOSARIO 
 
La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina. Los 
hematíes al degradarse liberan la hemoglobina que es metabolizada a dos 
moléculas del grupo hem y el grupo globina, el grupo hem se transforma en 
biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o indirecta. Al 
pasar por el hígado esta bilirrubina se conjuga con acido glucoronido 
transformándose en bilirrubina conjugada o directa. 
 
DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO 
Método automatizado con equipo mindray Bs-240. 
 
 
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 
La determinación de bilirrubina sirve para determinar si el paciente tiene una 
enfermedad hepática o una obstrucción en vías biliares. Si hay una obstrucción de 
las vías biliares, la bilirrubina directa se acumula, escapa del hígado y termina en 
la sangre. Si los niveles son lo suficientemente altos, una parte aparecerá en la 
orina. Solo la bilirrubina directa aparece en la orina. El aumento de la bilirrubina 
directa generalmente significa que las vías biliares están obstruidas. El aumento 
de la bilirrubina directa puede indicar: 
- Obstrucción de las vías biliares 
- Cirrosis 
- Síndrome de dubin-Johson 
 
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- Hepatitis 
- Colestasis intrahepatica 
VALORES DE REFERENCIA 
Bilirrubina Directa 
0.1 a 0.3 mg/dl 
 
SIGNIFICADO CLINICO 
La bilirrubina directa es la bilirrubina conjugada por el hígado, principalmente con 
el acido glucuronico y en pequeños porcentajes con glucosa, Xilosa, proteínas y 
sulfatos, obteniendo así solubilidad en agua. Los adultos normales tienen muy 
bajos niveles de bilirrubina conjugada, usualmente menor a 0.1 mg/dl. La 
bilirrubina directa esta aumentada cuando existe una obstrucción del árbol biliar 
intrahepatico o extrahepatico (colanginitis, colelitiasis, colecistitis, tumores de vías 
hepáticas, tumores de cabeza,de páncreas, pelotón de Ascaris), en el daño 
hepatocelular(sobretodo en el periodo tardio del proceso patológico), en la 
colestasis, en el síndrome de Dubin-Johson, en el síndrome de Rotor. También 
esta aumentada en la ictericia hapetocelular o parenquimatosa. Es decir en las 
enfermedades que cursan con insuficiencia hepática: hepatitis vírica o toxica, 
cirrosis hepática, necrosis hepática aguda, tumores de hígado y abscesos. 
 
 
 
 
14. TECNICA DE LA FOSFATASA ALCALINA 
 
FUNDAMENTOS DEL METODO 
La fosfatasa alcalina (ALP o monoéster ortofosfórico fosfohidrolasa, EC. 3.1.3.1.) 
hidroliza al p-nitrofenilfosfato (p-NFF), que es incoloro, produciendo fosfato y p-
nitrofenol a pH alcalino. La velocidad de aparición del anión p-nitrofenolato 
 
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(amarillo) a 405 nm, es proporcional a la actividad enzimática de la muestra. 
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solución de buffer DEA (dietanolamina), 
conteniendo sales de magnesio. B. Reactivo B: solución conteniendo p-nitrofenil 
fosfato 
(p-NFF). Concentraciones finales 
DE.......................................................................1,0mol/l 
Mg.......................................................................0,5 mmol/l 
p-NFF ..................................................................10 mmol/l 
 
INSTRUCCIONES PARA SU USO 
Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse separados o como 
Reactivo único, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 
4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B). 
 
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el 
espectrofotómetro es llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia 
del Reactivo único (premezclado) superioresa 0.900 D.O. son indicio de deterioro 
del mismo. 
 
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Utilizar los 
reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de 
química clínica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo 
a la normativa local vigente. 
 
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos 
Provistos: son estables en refrigerador (2-10o C) hasta la fecha de vencimiento 
indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer destapados y fuera 
del refrigerador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo único 
(premezclado): estable 1 mes en refrigerador (2-10o C) a partir de la fecha de su 
preparación. 
 
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MUESTRA 
Suero o plasma heparinizado a) Recolección: se debe obtener suero de la manera 
usual. b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, debe usarse 
heparina como anticoagulante. c) Sustancias interferentes conocidas: - No se 
observan interferencias por bilirrubina hasta 16 mg/dl, lípidos hasta 1000 mg/dl de 
triglicéridos, ni heparina hasta 50 UI/ml. - Hemólisis moderadas (hasta 200 mg/dl) 
no producen interferencias pero hemólisis muy intensas pueden producir 
variaciones en los resultados. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos 
de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de 
almacenamiento: emplear suero preferentemente fresco. En caso de no efectuarse 
el ensayo dentro de las 6 horas posteriores a su obtención, la muestra debe 
conservarse en el congelador. 
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) - Espectrofotómetro. - Micropipetas y 
pipetas para medir los volúmenes indicados. 
GLOSARIO 
La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo. 
Hidroliza los monoésteres del ácido ortofosfórico en medio alcalino. En el adulto 
proviene en parte del hígado (fracción termoestable) y en parte del hueso, sistema 
reticuloendotelial y vascular (fracción termolábil), dando lugar a distintas 
isoenzimas. La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea, en condiciones 
normales, alcanza su mayor actividad en los niños en edad de crecimiento 
(llegando a triplicar los niveles del adulto) debido a que esta isoenzima se localiza 
en los osteoblastos (relacionados con la calcificación y formación de estructuras 
óseas). También es fisiológico el aumento que se produce al final del primer 
trimestre del embarazo, a expensas de la isoenzima placentaria que en este 
período alcanza niveles máximos (aproximadamente el doble de los valores 
normales). Entre las patologías que afectan la actividad sérica de fosfatasa 
alcalina, se pueden citar: carcinomas metastásicos en hígado y en hueso 
(productores de enzima), colestasis biliar, fenómenos osteoblásticos, trastornos de 
malabsorción acompañados de lesiones ulcerosas (donde la deficiencia de 
 
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS EN 
QUIMICA SANGUINEA 
Vigencia:2018 
 
Cód.: GMLCMA-
120.11 
Versión: 1 
EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO 
HOSPITAL DE LA VEGA – PUESTO 
DE SALUD DE NOCAIMA 
Página 1 de 42 
 
 
 41 
 
 
 
 
Elaborado Por : 
Francia L. 
Contreras 
 
Revisado Por : 
Molchizu Arango 
Aprobado Por : 
Hernán Duran 
Cargo: Líder laboratorio clínico Cargo: Asesora de Calidad 
planeacion 
 
Cargo: Gerente 
Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 
 
vitamina D produce osteomalacia con el consecuente aumento de fosfatasa 
alcalina ósea) e incluso lesiones en vías de reparación tales como infarto agudo 
de miocardio, infarto pulmonar o renal. 
 
 
 
VALORES DE REFERENCIA 
En adultos normales (edades entre 20 y 60 años) se observan los siguientes 
rangos: Temperatura 37o C Valores en adultos (U/l) 65-300 Debido al proceso 
osteoclástico, la isoenzima ósea se encuentra aumentada en la niñez y 
adolescencia (hasta los 18 años, aproximadamente) proporcionando valores de 
fosfatasa alcalina más elevados que en los adultos. En condiciones normales se 
consideran los siguientes valores límites: Temperatura 37o C Valores en niños y 
adolescentes (U/l) hasta 400 hasta 450 hasta 645. 
 
 
 
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO 
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. 
Los anticoagulantes comunes (tales como EDTA disódico, oxalato, citrato o 
fluoruro) producen inhibición de la actividad de fosfatasa alcalina. El reactivo 
puede colorearse en presencia de trazas de soluciones de limpieza a base de 
hipoclorito. Asegurarse de enjuagar abundantemente con agua desmineralizada 
todo el material que pueda estar en contacto con hipoclorito, incluyendo las agujas 
y conexiones de los analizadores, cuando se emplea la técnica automática 
 
 
 
 
 
 
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Vigencia:2018 
 
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planeacion 
 
Cargo: Gerente 
Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 
 
BIBLIOGRAFIA 
 
LABTEST REACTIVOS DE DIAGNOSTICO Group. Vademecum: reactivos, 
consumibles y accesorios. 
http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/resultados-de-un-analisis-
bioquimico-12160