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DIAGNÓSTICO YESTUDIO DE ENFERMEDADESINFECCIOSAS INFECTOLOGIA INTRODUCCIÓN El médico sospecha una E.I basándose en los síntomas, los resultados de la exploración física y los factores de riesgo del paciente. Sin embargo necesita saber que Ag. Infeccioso está causando la patología, para ello existen diferentes pruebas de laboratorio que a través de una muestra de sangre, orina, esputo, o de otro fluido corporal permite identificar al M.O específico. Es entonces cuando el médico puede iniciar el tratamiento más adecuado. INICIODELDIAGNÓSTICO HISTORIA CLÍNICA F.R GENERALES previas ● Edades extremas de la vida. ● Enf. crónicas subyacentes. ● Medicaciones (Inmunosupresores y AB) ● Alcoholismo. ● Procedimientos invasivos previos: vascular,(Hemodiálisis, cateterismo endoscopias, etc). F.R EPIDEMIOLÓGICOS ● Viajes a zonas tropicales: Enf. endémicas. ● Historia ocupacional. ● Contacto con animales: Inf. zoonóticas. ● Prácticas sexuales de riesgo: ETS → VIH. ● Uso de tóxicos: Drogas por vía parenteral. ● Transfusiones previas: Enf. virales. ● Contactos con PX con enfermedades transmisibles. Identificar la localización de la infección e identificar el probableAg. causal. EXPLORACIÓN FÍSICA Completa y Minuciosa. Valorar el estado general, nutricional, los signos vitales y todo aquello que aporte datos sobre la situación del PX. Lesiones cutáneas. Exantemas y enantemas. Celulitis e infecciones necrotizantes, foliculitis, nódulos subcutáneos, etc. Adenopatías periféricas. Enf. virales: Toxoplasma, TB, infección por VIH, etc. Cabeza y cuello. Otitis, faringoamigdalitis, etc. Fondo de ojo. Uveítis, endoftalmitis o lesiones retinianas características Exploración cardiaca- pulmonar-abdominal. Cardiaca: Soplos (endocarditis). Respiratoria Neumonía o derrame pleural. Abdominal: Dolor, ascitis, hepato y/o esplenomegalia Exploración de genitales Úlceras y tacto rectal para evaluación de la próstata. Neurológico Signos meníngeos o focalidad motora o sensitiva. PRUEBASGENERALESINESPECÍFICAS Leucocitosis Muy inespecífico Neutrofilia Bacteriana Neutropenia Viral, Brucelosis, Tifus. Linfocitosis Virales Linfopenia Viral (VIH), TB. Eosinofilia Parasitaria Inv. Monocitosis TB, F.tifoidea. Anemia Malaria, Lepra. Pancitopenia TB miliar, Histoplasmosis Trombocitopenia Sepsis, Malaria, Dengue Análisis del sedimento urinario Hemoglobinuria Mioglobina Gangrena gaseosa Hematuria Leptospirosis, tifus, leishmaniasis visceral Hematimetría PERFIL BIOQUÍMICO Urea, creatinina Cualquier infección grave. Fosfatasa alcalina Legionelosis, hepatitis viral. Hiperbilirrubinemia Gonococemia, legionelosis. VSG elevada Inespecífica. Abscesos. VSG baja Triquinelosis, tularemia. Transaminasa ↑ moderada Inespecífico. Transaminasa ↑importante Hepatitis viral Estas pruebas no son diagnósticas por sí mismas y deberían usarse en su contexto clínico. DIAGNOSTICOMICROBIOLOGICO Estrategias varían según los distintos microorganismos y tipos de infección DIAGNÓSTICO DIRECTO DIAGNÓSTICO INDIRECTO Demostración del Ag. Infeccioso, directamente en la muestra clínica. Evidenciar una respuesta inmune del huésped frente a la infección. Examen Microscópico Cultivos Deteccion de antigenos Estudios de sensibilidad in vitro Métodos moleculares Análisis serológico. LABORATORIO El laboratorio debe: -Ejercer métodos adecuados y actualizados para la toma de muestras. -Detección e identificación de los patógenos aislados. -Determinación de la sensibilidad de estos microorganismos con los que se trabaja. -Determinación y seguimiento de las cepas causantes de las infecciones. CALIDADDEMUESTRA -La muestra debe de obtenerse antes de empezar cualquier tipo de terapéutica, es decir, tener la muestra antes de tomar cualquier tipo de fármaco. -No debe de presentar contaminación con la flora habitual, o esta debe de ser la mínima posible. -Los sistemas de recolección deben ser apropiados al tipo y volumen de la muestra que se desea obtener. -El material usado debe de ser esteril y libre de material residual, como detergentes o desinfectantes. -La muestra debe de llegar al laboratorio en un mínimo de tiempo. -de existir cierta demora en el traslado de la muestra, el laboratorio tendría que proporcionar un transporte rápido y ágil. -Las muestras deben de ser identificadas con una nota adherida al envase, y los datos en ella, deben de concordar con los del portador del patógeno y solicitud de examen. -deben de adherirse notas que puedan ayudar al laboratorio a manejar adecuadamente la muestra, y si es el caso, aislarla. TINCIÓN TINCIÓN DE GRAM Tinción que se realiza sobre las bacterias para observarlas mejor bajo el microscopio. Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve, se tiñen de una forma u otra. Tiñen bacterias GRAM+ y GRAM- ●Recoger la muestra ●Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar. ●Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol). ●Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un minuto. ●Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol). ●Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos segundos. ●Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina. ●Se visualizarán de color violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas. TINCIÓN DE GIEMSA: Útil en el diagnóstico de parásitos como malaria y babesiosis. TINCIÓN ZIEHL NEELSEN: Tiñe y permite observar bacilos ácido alcohol resistentes, parásitos y algunos tipos de bacterias. TINCIÓN SCHIFF: Permite la detección de hongos en muestras de tejido. TINCIÓN CON ANARANJADO DE ACRIDINA: Utiliza un fluorocromo que tiñe el ADN. Es más sensible que la tinción de GRAM, ya que aun, las bacterias dañadas por algún antibiótico, pueden ser observadas. TINCIÓN CON AZUL DE METILENO: Es usada en la búsqueda de leucocitos fecales, permitiendo una buena tinción de los núcleos de esta célula. CULTIVODEMUESTRAS La muestra se deposita en una placa estéril o en un tubo de ensayo para cultivo que contiene nutrientes específicos que favorecen el crecimiento de los microorganismos. Se utilizan diferentes nutrientes dependiendo del microorganismo que el equipo médico sospeche como causante de la infección. EJEMPLOS. HEMOCULTIVO: Indicada conmayor frecuencia en sospecha de bacteremia. UROCULTIVO: Dedicada a la detección de infecciones urinarias. COPROCULTIVO: Usada en la búsqueda de patógenos intestinales productores de enterocolitis aguda. CULTIVO DE HONGOS: Permite la búsqueda de hongos levaduriformes o micelados. PRUEBASDEDETECCIÓNDEANTICUERPOSOANTÍGENOS Para diagnosticar dichas infecciones se pueden utilizar diversas pruebas denominadas pruebas inmunológicas. Anticuerpos. Sobre una muestra de sangre del paciente, LCR o en otros fluidos corporales. ❏ El médico puede realizar pruebas para detectar varios anticuerpos, dependiendo de qué infecciones considere que son probables Antígenos.Permiten detectar directamente la presencia de un microorganismo (No es necesario esperar a que una persona produzca anticuerpos en respuesta al microorganismo) ❏ Se toma una muestra de una persona y la mezclan con un anticuerpo testado del microorganismo que se sospecha. Si en la muestra obtenida de la persona existen antígenos del microorganismo, estos antígenos se unen al anticuerpo de la prueba de detección Si el Px posee anticuerpos frente a un microorganismo particular, significa que ha estado expuesto a ese microorganismo y ha producido una respuesta inmunitaria Útil en personas con sistema inmunitario deprimido y no es capaz de producir muchos anticuerpos, PRUEBASDESENSIBILIDAD Se hace para ayudar a elegir el antibiótico que será el más eficaz contra los tipos específicos de bacterias u hongos que infectan a un individuo. - Pueden ser cualitativas,semicuantitativas o con métodos basados en los ácidos nucleicos. - Pueden determinar el efecto de la combinación de distintos antimicrobianos - Se realizan in vitro - No tienen en cuenta numerosos factores que afectan al fármaco in vivo (p. ej., la farmacodinámica y la farmacocinética, las concentraciones del medicamento en el sitio de acción, el estado inmunitario del huésped, las defensas específicas de sitio) - Pueden hacerse para bacterias, hongos o virus. - Para algunos microorganismos, los resultados obtenidos con un fármaco permiten predecir los resultados que se obtendrán con fármacos similares. PRUEBASDEDETECCIÓNDEMATERIALGENÉTICO Pruebas basadas en ácidos nucleicos. Tipos. Reacción de la cadena de polimerasa. Se utiliza para producir muchas copias de un gen de un microorganismo, lo que hace que el microorganismo sea mucho más fácil de identificar Cada prueba genética es específica de un microorganismo concreto, sólo se realizan cuando el médico sospecha la existencia de una determinada enfermedad. MÉTODOSPARAVALORARSUSCEPTIBILIDADBACTERIANA CUANTITATIVOS -CMI (concentración mínima inhibitoria) -CBM (concentración bactericida mínima) CUALITATIVOS -Disco Difusión cepas ATCC: cepas ya conocidas Agar Muller Hinton para realizar el antibiograma, para estandarizar la cantidad de: -timina y timidina -pH del medio -altura E. Faecalis ATCC 29212 TMS halo de inhibición mayor a 20 mm DISCO DIFUSIÓN MÉTODOSPARAVALORARSUSCEPTIBILIDADANTIMICÓTICA -CALDOS DE DILUCIÓN (macro y micro dilución) -DILUCIÓN EN AGAR MÉTODOSPARAVALORARSUSCEPTIBILIDADANTIVIRAL Los diferentes componentes geneticos juegan un papel importante en la determinación diferencial de la susceptibilidad a las principales enfermedades infecciosas Relacionado a la variabilidad genética -secuenciación del genoma vírico: para determinar el orden de los nucleótidos .que tan estrechamente relacionados genéticamente están los virus .para monitorear la evolución y cambios de los virus a lo largo del tiempo .para evaluar efectividad de una vacuna REPORTEEINTERPRETACIÓN Es un documento que resume los resultados obtenidos en el análisis de las pruebas de laboratorio solicitadas por un médico a un paciente Al realizar el reporte, se deben dar a conocer con precisión y en terminos técnicos los resultados que se obtuvieron posteriormente de realizar un procedimiento microbiológico a una muestra. Al interpretar los resultados se debe de comprender, expresar y traducir el contenido y expresar de una forma más entendible el mismo contenido. ASPECTOSACONSIDERARENLAINTERPRETACIÓN - Agente etiológico - Aspectos clínicos - Epidemiología - Factores predisponentes - Estado inmunológico del paciente - Edad del paciente - Estado fisiológico del paciente ¿CÓMOAYUDALAMEDICINANUCLEAR? PET (tomografía por emisión de positrones) - Enfermedad intestinal inflamatoria - Enfermedad de Hodgkin - Linfoma no hodgkiniano - Cáncer colorrectal - Infecciones torácicas y de los tejidos blandos. OSTEOMIELITIS El Dx no es evidente, asi que e llevan a cabo procedimientos con radionucleidos. BIBLIOGRAFÍA ● McAdam A.J., & Onderdonk A.B. (2019). Diagnóstico de laboratorio de enfermedades infecciosas. Kasper D, & Fauci A, & Hauser S, & Longo D, & Jameson J, & Loscalzo J(Eds.), Harrison. Principios de Medicina Interna, 19e. McGraw Hill. ● Elsevier. (2018). Categorías de agentes infecciosos para el ser humano. Elsevier Connect. ● García Palomo, J.J., Parra Blanco, J. A., & Santos Benito, M. F. (2010). Enfermedades infecciosas. Concepto. Clasificación. Aspectos generales y específicos de las infecciones. Pruebas diagnósticas complementarias. Medicine, 10(49), 3251–3264. https://doi.org/10.1016/S0304-5412(10)70027-5. ● Elsevier. (2018). Técnicas para la identificación de los agentes infecciosos. Elsevier Connect.
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