discrepancias

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Discrepancias ABO – 
Pasos procedimentales 
PROF. TUHeI Néstor A. Zani 
Paso 1 – Validar resultado obtenido. 
• MÉTODO 2-4. Investigación INICIAL DE LAS DISCREPANCIAS ABO
• Principio
• Para ser considerados válidos, los resultados de la tipificación ABO de glóbulos rojos y suero deben concordantes. 
• Este método describe un enfoque general sobre la investigación inicial de la discrepancia del agrupamiento ABO causada ya 
sea por reacciones inesperadas tanto positivas como negativas 
• Procedimiento
• 1. Repetir el procedimiento de tipificación ABO en la misma muestra. Si las pruebas iniciales se realizaron con glóbulos rojos 
resuspendidos en suero o plasma, se debe realizar la prueba luego de lavar los glóbulos rojos en solución salina. Esta 
reevaluación elimina muchos de los problemas asociados con proteínas plasmáticas o anticuerpos.
• 2. Estudiar la nueva muestra. Se debe pedir una nueva muestra cuando la discrepancia ABO refleja falta de concordancia 
entre los resultados actuales y en los registros previos o cuando se sospecha la contaminación de una muestra.
• 3. Revisar la historia c1ínica del paciente por condiciones médicas que pudiesen alterar la tipificación ABO. Esta revisión 
debe incluir: a. Diagnóstico médico. b. Antecedentes del grupo sanguíneo. c. Antecedentes transfusionales. d. Medicación 
actual. 
• 4. Revisar y comparar los resultados de las pruebas de plasma con los glóbulos rojos autólogos y los glóbulos rojos O en la 
prueba de detección de anticuerpos para detectar posibles aloanticuerpos o autoanticuerpos.
• 5. Puede ser útil realizar una PAD. 
Paso 2 – Mejorar, optimizar, la temperatura de reacción.
• MÉTODO 2-5. INVESTIGACiÓN DE ANTíGENOS A Y B DÉBILES Y ANTICUERPOS REACTIVOS A BAJA 
TEMPERATURA
• Principio
• La incubación prolongada a bajas temperaturas puede potenciar la unión de anticuerpos y la detección de antígenos y anticuerpos débiles del 
ABO. Debido a que a menudo no está claro si la discrepancia ABO es consecuencia de antígenos o anticuerpos débiles, se recomienda 
realizar las prueba de células y suero en paralelo.
• Muestras
• 1. Glóbulos rojos lavados para investigar antígenos eritrocitarios débiles o ausentes.
• 2. Suero o plasma para investigar isoaglutininas faltantes.
• Interpretación
• Ninguna interpretación puede hacerse si el control con albúmina al 6% es positivo o si se detectan autoanticuerpos o 
aloanticuerpos.
PASO 3- Investigación ABO con hematíes tratados con enzimas 
• MÉTODO 2-6 INVESTIGACiÓN DE ANTíGENOS A Y B DÉBILES UTILIZANDO GLÓBULOS ROJOS
• TRATADOS CON ENZIMAS
• Principio
• Los glóbulos rojos tratados con enzimas pueden potenciar tanto las reacciones antígeno-anticuerpo del sistema 
ABO como de otros antígenos con estructura de hidrato de carbono.
• Interpretación:
• Los resultados de las pruebas se pueden considerar válidos s6lo si no se observa reactividad con el 
grupo de glóbulos rojos de control O tratado con enzimas. La reactividad de los antisueros anti-A, -B, 
o -A,B con glóbulos rojos O de control tratados con enzimas indica exceso de tratamiento con 
enzimas. No se puede realizar ninguna interpretación ABO si las células de control O dan reacción 
positiva.
PASO 4 – ADSORCION – ELUCION – ABO Débiles
• MÉTODO 2-7. CONFIRMACiÓN DEL SUBGRUPO A O B DÉBIL POR ADSORCiÓN Y ELUCIÓN
• Principios
• Algunos subgrupos ABO son muy débiles para ser detectados mediante aglutinación directa, aún luego de 
utilizar incubaciones a bajas temperaturas y potenciamiento de anticuerpos. La presencia de antígenos A, B o 
ambos requiere la adsorción de anti-A, anti-B a los glóbulos rojos, seguidos de la elución del anticuerpo fijado. 
Se evalúa el eluato en búsqueda de anti-A y anti-B mediante pruebas con glóbulos rojos reactivos Al y B.
• Interpretación
• 1. La presencia de anti-A o anti-B en el eluato indica, la existencia de antígenos A o B en las células en estudio. 
Los resultados del eluato son válidos sólo si ocurre lo siguiente: 
• a) el eluato reacciona con las tres células antígeno-positivo en cualquier fase; 
• b) el eluato no reacciona con las tres células O en ninguna fase, y 
• c) la solución de lavado final no reacciona con ninguna de las seis células.
PASO 5 Búsqueda Antígenos ABO en Saliva (1) 
• MÉTODO 2-8. INVESTIGACiÓN DE ANTíGENOS A, B, H, Lea y Leb EN SALIVA
• Principios: 
• Alrededor del 78% de los individuos posee el gen Se, que codifica la secreción de antígenos ABH hidrosolubles en todos 
los líquidos del organismo, con excepción del cefalorraquídeo. Estos antígenos pueden demostrarse en la saliva mediante 
pruebas de inhibición con antisueros ABH y Lewis.
• INTERPRETACION 
• 1. La aglutinación de los glóbulos indicadores en los tubos que contienen saliva, indica que ésta carece de los antígenos 
correspondientes.
• 2. Si los anticuerpos no aglutinan las células indicadoras después de la incubación con saliva, ésta posee los antígenos 
correspondientes.
• 3- Los controles deben validar los resultados. 
• LA APLICACIÓN DE BIOLOGIA MOLECULAR EN LA BUSQUEDAS DE LOS ALELOS ABO. EMPIEZAN A 
SER UNA PRACTICA MAS FRECUENTE QUE DESPLAZA Y SUSTITUYE POR SU CAPACIDAD DE 
ESPECIFICIDAD LAS PRUEBAS SOBRE SALIVA. 
Saliva grupo A –B o AB – Consume Anti AB + Gs. A – B o AB = 
Negativo Individuo Grupo A – B o AB
Saliva grupo O – No consume Anti A – B ni AB + Gs. A = Positiva - 
Individuo No A – B ni AB
Principio de la reacción de inhibición de la aglutinación 
ANTI A +
ANTI B + 
ANTI AB + 
ANTI H +
Ag. A
Ag. B
Ag. AB
Ag. H
Saliva grupo A o AB – Consume Anti A + Gs. A = Negativo 
Individuo Grupo A
Saliva grupo B o O – No consume Anti A + Gs. A = Positiva 
Individuo No A
Saliva grupo O – A – B- AB – Consume Anti H + Gs. A – B – O - AB = 
Negativo - Individuo SECRETOR 
Saliva grupo O – A- B- AB- No consume Anti H + Gs. A – B – O- AB 
= Positiva - Individuo NO SECRETOR 
Saliva grupo B o AB – Consume Anti A + Gs. A = Negativo 
Individuo Grupo B
Saliva grupo A o O – No consume Anti A + Gs. A = Positiva 
Individuo No B
Estudio de ABO en Glóbulos rojos y suero de la Paciente en medios convencionales a T.A. a 4°C y con hematíes tratados con enzimas.
PRUEBA DIRECTA
Anti A (monoclonales y policlonales humanos) Negativo
Anti B: Negativo 
Anti AB: Negativo
Anti A1 Lectina Dolichus Biflorus: Negativo
Anti H Lectina Ulex Europeus: 4+ 
Anti Lea: Negativo
Anti Leb: Positivo Débil 
PRUEBA INVERSA
Gs. A1 y A2: Negativo 
Gs. B: Positivo 4+
Gs. O: Negativo
Resultados del estudio de inhibición de la aglutinación en saliva paciente Álvarez Hospital Thompson 
Saliva+Anti A (1/64) 3+
Saliva+Anti A (1/64) 2+
Saliva+Anti B (1/64) 2+S
Saliva+AntiB (1/32) 2+
Saliva+Anti Lea: POSITIVO 
Saliva +Anti H: Negativo 
Es Secretor? Sì o No Qué grupo es?
A – PRACTICAS, Ejemplos a armar: 
En la siguiente discrepancia se realiza la prueba de inhibición de la aglutinación en saliva de un donante, 
previo debo saber si es secretor o no. COLOQUE EN CUADRO SI (si es secretor) y NO si no es secretor 
y/o del grupo ABO luego: 
 Saliva Donante + Anti A + Gs. A1 = 
 Saliva Donante + Anti A1 + Gs. A2 =
 Saliva Donante + Anti B + Gs. B = 
 Saliva Donante + Anti AB + Gs. A1 =
 Saliva Donante + Anti AB + Gs. A2=
 Saliva Donante + Anti AB + Gs. B = 
 Saliva Donante + Anti H + Gs. 0 = 
B – Este resultado, del punto A, es (redondee): 
Es Lewis a + 
Es Lewis b + 
Es Lewis a- 
Es Lewis b –