aislamiento de bacterias

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Aislamiento de bacterias en placa de microorganismos del ambiente
Objetivo
El objetivo de esta practica es que el alumno complemente sus conocimientos hacerca de los cultivos en la observación de los mismos, hechos un día antes.
Fundamento
En todos los ambientes naturales habitan múltiples microorganismos de diversos tipos y actividad fisiológica. Para efectuar el estudio de un organismo particular es necesario separarlo de la población mixta en la que se encuentra. Para tal fin se emplean técnicas de aislamiento que conduzcan a la obtención de un cultivo puro.
De manera general los métodos de aislamiento incluyen:
1. Separación física de los microorganismos mediante:
a) Diluciones seriadas y siembra por vertido en placa.
b) Siembra por agotamiento.
2. Utilización de medios de cultivo selectivos y diferenciales.
3. Aprovechamiento de características particulares de los microorganismos, tales como la formación de esporas, el metabolismo anaerobio y/ o facultativo, la capacidad para utilizar sustratos poco comunes, etc.
Para facilitar el proceso de aislamiento y obtener mejores resultados, frecuentemente se emplean combinaciones de las técnicas anteriores.
Materiales
· 6 placas para cultivo
· Isopos
· Cualquier material del ambiente para la muestra.
· Mechero 
Metodo
1.	En esta actividad escoger un fómite (cualquier objeto inanimado que pueda causar enfermedad en los organismos por contener microorganismos como: la manija, el marco, el control remoto de la televisión, una moneda). Este fómite ayudara a confirmar la presencia de microbios y los efectos de un desinfectante por medio del crecimiento de colonias de bacterias en un medio de cultivo en cajas Petri.
1.	Si tienes el cabello largo recógelo para mantenerlo lejos de las cajas de Petri cuando estés trabajando. Lava tus manos. Limpia tu área de trabajo frotando suavemente, con la solución desinfectante en una toalla de papel. Saca tus cajas de Petri pero no abras las cajas hasta que se te indique.
2.	Escoge un objeto del salón de laboratorio (la manija, el marco, el control remoto de la televisión, una moneda). Toma una caja de Petri sin abrir y con tu lápiz de cera o marcador, divide la base de la caja en cuatro secciones iguales. Escribe el nombre del objeto al otro lado y designa las secciones del numero 1 al 4. Abre la caja de hisopos de algodón y escoge uno con cuidado para no tocar la punta. Limpia tu objeto escogido con todos los lados de la punta del hisopo volteándolo y retorciendo el hisopo a medida que lo mueves por la superficie del objeto.
3.	Ahora abre la tapa de la caja y suavemente haz cuatro siembras sobre la superficie de la caja como se muestra en la ilustración, empezando en la sección designada “1” y continuando con el orden de secciones, de manera que la ultima siembra esté en la sección 4. Presiona firme pero suavemente y no retoques las siembras anteriores. Tus siembras solo deben dejar una impresión muy ligera en el Agar. Cierra la caja.
4.	Divide una segunda caja de Petri en 4 secciones numeradas de 1 hasta 4 y desígnala “Control.” Limpia la mitad del objeto que escogiste anteriormente con una toalla de papel humedecida con agua. Solo frótala un par de veces; no la restriegues. Con un nuevo hisopo estéril, toma muestra del área limpiada. Abre la tapa de la segunda caja y haz suavemente 4 siembras en la superficie de la caja, siguiendo el orden de las secciones numeradas como lo hiciste previamente. Cierra la caja.
5.	Divide la tercera caja de Petri en 4 secciones numeradas y desígnalas con el nombre del desinfectante que escogiste (por ejemplo “blanqueador”). Usa el desinfectante escogido para limpiar la otra mitad del objeto que trabajaste antes. Con un nuevo hisopo estéril, toma muestra del área. Repite el proceso de sembrar la caja. Ciérrala.
6.	Esteriliza los hiposos utilizados con desinfectante y descártalos. Pon las cajas en un lugar apartado y déjalas incubar a temperatura de 37ºC durante 24 a 48 horas. Limpia tu área de trabajo con la solución desinfectante y lava tus manos.
7.	Repite todo el experimento utilizando Cajas de cultivo con Agar sangre solo que ahora selecciona otro fómite que no hayas empleado.
8.	Después de que hayan pasado 24 y 48 horas, observa las cajas Petri iniciales. No las abras. A la vez examina las otras cajas Petri sin abrirlas. Crea una tabla que compare las cajas sembradas antes y después de limpiar el objeto. Asegúrate de indicar si los microorganismos crecieron en cada siembra.
9.	Cuidadosamente deposita las cajas en el área de esterilización para su posterior tratamiento, para colocarlas en una bolsa para RPBI. Asegúrate de no tocar la superficie de las cajas cuando las abras y lava tus manos cuidadosamente después de manipularlas. Limpia tu área de trabajo con la solución desinfectante.
Resultados y obsrvaciones
	AGAR UTRITIVO
	CAJA 1
	CAJA 2
	CAJA 3
	Siembra
	1
	2
	3
	4
	1
	2
	3
	4
	1
	2
	3
	4
	Crecimiento
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	AGAR SANGRE
	CAJA 1
	CAJA 2
	CAJA 3
	Siembra
	1
	2
	3
	4
	1
	2
	3
	4
	1
	2
	3
	4
	Crecimiento
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
Conclusiones
Al colocar microorganismos individualmente en la placa crecieron colonias individuales, asi como se dividio en un principio. No fue en todas, destacó la numero 3 del agar sangre que fue donde mas creció. Todo esto se debe de hacer muy minuciosamente porque cualquier error sera una perdida de tiempo al esperar el tiempo indicado para la observacion, ya que el resultado por el mal procedimiento puede salir mal.
Bibliografia
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/PracticaAislamientoDeMicroorganismos_21549.pdf 
 
A
islamiento de bacterias en 
placa de microorganismos del 
ambiente
 
 
 
 
 
 
 
 
Aislamiento de bacterias en 
placa de microorganismos del 
ambiente