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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS CARRERA DE MEDICINA CÁTEDRA DE VIROLOGÍA TAREA GRUPAL #11 SUBGRUPO # 3 TEMA MÉTODOS INDIRECTOS – ARTÍCULOS Y ANÁLISIS INTEGRANTES: SCARLET VIVIANA LAVID SANDOVAL ZINNA NAYELHI LINO ALVAREZ CELIA THAIS MOREIRA GARCIA DOMENICA YULISSA MOLINA GARCES DIEGO ANDRES PAREDES JIMENEZ CATEDRÁTICO DRA. CARMEN EULALIA MOSQUERA HERRERA MED-S-CO-4-7 2023-2024 CI NEUTRALIZACIÓN ESTUDIANTE: DOMENICA YULISSA MOLINA GARCES ENLACE: https://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/Medicina_Experimental/v18_n3- 4/pdf/neutralizacion_placas.pdf ANÁLISIS: La Fiebre Amarilla (FA) es una enfermedad febril aguda, causada por un virus de la familia Flaviviridae, género Flavivirus, se va a estudiar la capacidad neutralizante de muestras séricas humanas para ser empleada como prueba de confirmación frente a otras técnicas y evaluar la relación de neutralización en diferentes poblaciones para cepas de FA: 287-78 (nativa) y 17D (referencial). Se incluyeron 96 muestras séricas provenientes de la seroteca de Virología del INS, procedentes de zonas endémicas y no endémicas del país. Se empleó la cepa 17D para la https://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/Medicina_Experimental/v18_n3-4/pdf/neutralizacion_placas.pdf https://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/Medicina_Experimental/v18_n3-4/pdf/neutralizacion_placas.pdf estandarización de la prueba en células VERO utilizando dos métodos (sólido y semilíquido); además, Las poblaciones seleccionadas se enfrentaron por la prueba estandarizada (PRNT) frente a las cepas de FA: 17D (cepa vacunal derivada del prototipo Asibi) y 287-78 (primer aislamiento de FA del Instituto Nacional de Salud del Perú). Se obtuvieron buenos resultados con el método semilíquido, siendo el séptimo día el óptimo de coloración de las placas. La técnica semilíquida con tiempo de coloración al séptimo día ofrece óptimos resultados en plaqueo y neutralización. Además, el ELISA resultó ser menos específico frente al PRNT y se encontró variación en relación a títulos y capacidad neutralizante en algunos sueros para ambas cepas. Realizado por: TÉCNICA DE WESTERN BLOT ESTUDIANTE: SCARLET VIVIANA LAVID SANDOVAL ENLACE: http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v10n4/v10n4a10.pdf ANÁLISIS: El virus de la inmunodeficiencia humana pertenece a la familia Retroviridae, género Lentivirinae. El genoma de los retrovirus consta de dos copias idénticas de ARN de cadena simple y está compuesta por tres genes principales, denominados gag, pol y env, los cuales codifican las proteínas del core, la envoltura y las enzimas. También están compuestos por una envoltura formada por glucoproteínas de superficie y de transmembrana, una cápside viral, cápside y nucleocápside. Las pruebas están indicadas para adultos y adolescentes que han tenido relaciones sexuales sin protección, personas con antecedentes de distintos factores infectivos al VIH. El diagnostico se establece además de los criterios clínicos y epidemiológicos, detectando http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v10n4/v10n4a10.pdf anticuerpos, antígenos o ácido nucleico, o aislándolo en cultivo. Prueba utilizada de confirmación; Western Blot es la técnica más utilizada, consiste en que las proteínas constitutivas del virus se separan por electroforesis y, luego, se transfieren a un papel de nitrocelulosa. Estas proteínas fijadas son expuestas al suero del paciente, en el cual los anticuerpos específicos se unen a las proteínas presentes dando un patrón de bandas. Realizado por: TÉCNICA DE INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA ESTUDIANTE: CELIA THAIS MOREIRA GARCIA ENLACE: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1018- 130X2019000100006 ANÁLISIS: En el trabajo se intenta determinar la frecuencia de patrones de tinción de anticuerpos antinucleares identificados por inmunofluorescencia indirecta en pacientes con enfermedad del tejido conectivo en un hospital de nivel III de Lima, Perú. Utilizando un estudio de tipo cuantitativo, observacional y transversal, realizado en el Servicio de Inmunología del Hospital Nacional arzobispo Loayza entre enero 2017 y junio 2017. Se revisaron 291 historias clínicas de pacientes con enfermedad del tejido conectivo y con detección de los patrones de tinción de anticuerpos antinucleares en suero, usando la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta. Y de los siguiente se obtuvo que la frecuencia de estudios de anticuerpos antinucleares fue 322 (100 %), los patrones de anticuerpos antinucleares fueron PCNA6 (1,86%), patrón homogéneo 109(33,85%), patrón centromérico 34(10,56%), patrón moteado 135(41,93%), patrón citoplasmático 25(7,76%), patrón nucleolar 9(2,80%), patrón NUMA 1- Huso Acromático 3(0,93%) y http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1018-130X2019000100006 http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1018-130X2019000100006 patrón lisosoma 1(0,31%). La positividad de anticuerpos antinucleares se determinó mayormente en pacientes con lupus eritematoso sistémico 85(29.21%), esclerosis sistémica progresiva limitada (CREST) 34(11,68%), síndrome de Sjögren 77(26,46%), esclerodermia 15(5,15%), enfermedades mixtas del tejido conectivo72 (24,74%) y polimiositis 8 (2,75%). Concluyendo que existe una elevada frecuencia del patrón homogéneo y del patrón moteado en pacientes con enfermedad del tejido conectivo. El patrón homogéneo se asoció fuertemente al lupus eritematoso sistémico y el patrón moteado se asoció al síndrome de Sjögren. Por lo tanto, el método ANA-IFI puede reducir el gasto de un trabajo inmunológico detallado con una pérdida mínima en la exactitud diagnóstica de la enfermedad. Realizado por: TÉCNICA DE HEMOAGLUTINACIÓN INDIRECTA (HAI) ESTUDIANTE: ZINNA NAYELHI LINO ALVAREZ ENLACE: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=4780221 ANÁLISIS: Los métodos indirectos elegidos fueron: registros informáticos de administración obtenidos del departamento de farmacia (presentando los indicadores ADHmid3 y ADHmid, para el análisis temporal del proceso), cuestionario (SMAQ) y juicio clínico (CJ). ADHmid3 se estableció como un método estándar, evaluando la sensibilidad y especificidad de los demás frente a este. La LV indetectable se asoció con el cumplimiento del paciente. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre todos los indicadores, excepto entre ADHmid3 y ADHmidt. Los resultados del indicador de adherencia temporal ADHmid3, son los más cercanos al estado virológico del paciente. Por ello, podría considerarse una herramienta útil en intervenciones farmacéuticas sobre adherencia. Realizado por: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=4780221 TÉCNICA DE ENZIMOINMUNOENSAYO (ELISA INDIRECTA) ESTUDIANTE: DIEGO ANDRES PAREDES JIMENEZ ENLACE: https://revistamedica.com/metodos-serologicos-deteccion-sars-cov-2- ensayo-inmunologico-fijado-enzima-elisa/#ENSAYO-INMUNOLOGICO-LIGADO-A- ENZIMA-TECNICA-ELISA ANÁLISIS: Por medio de la técnica de ELISA indirecta, se pueden identificar diferentes tipos de anticuerpos producidos en las diferentes etapas de infección por COVID 19. La aparición de IgM representa un proceso de infección aguda, la IgG indica una infección primaria o aparecen como respuesta a la fase aguda de infecciones secundarias. El proceso debe realizarse en un pocillo e implica la mezcla de la muestra del paciente, anticuerpos, antígenos y enzimas junto al sustrato que debería de cambiar el color dependiendo del resultado de la prueba. Esta técnica requiere equipos poco costosos que son sensibles, el resultado es generado 1 o 2 horas después de recogida la muestra y esta técnica se limita a ser realizadaúnicamente en laboratorio. https://revistamedica.com/metodos-serologicos-deteccion-sars-cov-2-ensayo-inmunologico-fijado-enzima-elisa/#ENSAYO-INMUNOLOGICO-LIGADO-A-ENZIMA-TECNICA-ELISA https://revistamedica.com/metodos-serologicos-deteccion-sars-cov-2-ensayo-inmunologico-fijado-enzima-elisa/#ENSAYO-INMUNOLOGICO-LIGADO-A-ENZIMA-TECNICA-ELISA https://revistamedica.com/metodos-serologicos-deteccion-sars-cov-2-ensayo-inmunologico-fijado-enzima-elisa/#ENSAYO-INMUNOLOGICO-LIGADO-A-ENZIMA-TECNICA-ELISA Las limitaciones de esta técnica es su realización en exclusiva en laboratorio, en el caso del virus SARS-CoV-2 la limitación en la disposición de reactivos en esta época de aumento exponencial de pruebas. Realizado por: