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CATEDRA DE VIROLOGIA AÑO LECTIVO 2021 – 2022 DOCENTE DRA. CARMEN MOSQUERA DE CHOEZ MICROBIÓLOGO – BIOLOGA MOELECULAR MSC EN BIOTECNOLOGIA FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS ESCUELA DE MEDICINA SEGUNDO AÑO Contribución del diagnóstico virológico Etapas del diagnostico viral La responsabilidad Médico Tener el conocimiento acerca de las posibilidades reales del diagnóstico virológico y del envío de las diversas muestras adecuadas en el momento oportuno , así como también la correcta interpretación de resultados Virólogo Tiene la responsabilidad de una adecuada realización de los procedimientos diagnósticos así como el uso cotidiano de controles y el control de calidad de los reactivos en uso Conceptualización de los métodos • Son aquellos que detectan la presencia de virus en muestras clínicas • Se detecta al virus en formas: como agente infeccioso (aislamiento viral),como partícula viral(microscopia electrónica), o presencia de antigenos virales(inmunomarcacion)y como genoma viral (PCR) Métodos directos • son denominados los métodos de aislamiento viral ya que fueron los primeros utilizados en los comienzos de la virología • Son muy confiables pero lentos ,de alto costo y de realización compleja • Requiere de personal entrenado ,infraestructura y mantenimiento de animales Métodos clásicos o convencionales • Son aquellos que investigan la presencia del sistema inmune con la relación antigeno-anticuerpo neutralizante en el suero del paciente Métodos indirectos o serológicos Metodos rapidos permiten obtener un resultado a pocas horas de-obtenida la muestra, lo que resulta en un beneficio para los pacientes. Obtención de muestras Para obtención adecuada Patogenia de cada infección viral Características del virus Estadio de la enfermedad Se obtienen por: Hisopados Aspiraciones Muestras Normas de Bioseguridad Obtención de aislamiento viral Tubo con Medio de transporte para virus 0,2% Suero fetal bovino Antibióticos Antimicóticos Proteínas Antimicrobianos Obtenerlos en etapas tempranas Refrigerarlos Enviarlos correctamente Virus respiratorios Gastroenteritis Cutáneo-Mucosas Menisgitis y Encefalitis Conjuntivitis, Queratitis y Retinitis Conservación y transporte de laboratorio Normas de Bioseguridad Transporte de muestras para: Aislamiento Viral diagnostico rápido Biología Molecular Serológicos Alta Patogenicidad (Viruela, lassa, coronavirus asociado al sars) MÉTODOS DIRECTOS E INDIRECTOS MÉTODOS DIRECTOS Son aquellos que detectan la presencia del virus (o alguno de sus componentes) en muestras clínicas, lo que puede realizarse a través de diversas técnicas que investigan la presencia de: Agentes infecciosos ( mediante la observación de su replicación en cultivos celulares “ aislamiento viral”) Partículas virales (microscopia electrónica) Antígenos virales por técnicas de inmunomarcacion (IF;ELISA;IP) Fenómenos virales por técnicas moleculares Investigan la respuesta inmune humoral mediada por anticuerpos específicos antivirales en el suero o plasma del paciente. Por ende no detectan la presencia del agente etiológico. Para realizar un diagnóstico es necesario determinar la conversión serológica (seroconversión) o bien la presencia de IgM especifica antiviral MÉTODOS INDIRECTOS Clasificación de los métodos de diagnóstico virológico de acuerdo a la forma de detectar la infección MÉTODOS MOLECULARES: Detectan el genoma del virus, si ha sufrido mutaciones o cambios estructurales. PCR PCR larga PCR anidada RT-PCR PCR en tiempo real Hibridación RFLP Secuenciación nucleotídica Diapositiva 1 Diapositiva 3: Contribución del diagnóstico virológico Diapositiva 4: Etapas del diagnostico viral Diapositiva 5: La responsabilidad Diapositiva 6: Conceptualización de los métodos Diapositiva 7 Diapositiva 8 Diapositiva 9: Obtención de muestras Diapositiva 10: Obtención de aislamiento viral Diapositiva 11: Virus respiratorios Diapositiva 12: Gastroenteritis Diapositiva 13: Cutáneo-Mucosas Diapositiva 14: Menisgitis y Encefalitis Diapositiva 15: Conjuntivitis, Queratitis y Retinitis Diapositiva 16: Diapositiva 17: Conservación y transporte de laboratorio Diapositiva 18: MÉTODOS DIRECTOS E INDIRECTOS Diapositiva 19: MÉTODOS DIRECTOS Diapositiva 20: Clasificación de los métodos de diagnóstico virológico de acuerdo a la forma de detectar la infección Diapositiva 21